ATP 檢測分析（冷光法）| 貨號KTB1019

CheKine™ Luminescent ATP Detection Assay

在ATP、鎂離子和氧氣存在的情況下，螢光素酶(Luciferase)（又稱螢火蟲螢光素酶）可以催化螢火蟲螢光素( firefly luciferin) 產生氧化螢光素(Oxyluciferin)，氧化螢光素在氧化過程(oxidation )中產生光訊號。在一定範圍內，螢光強度與ATP濃度成正比。

樣本製備:

1. 血清或血漿樣本：依0.1 mL血清或血漿的比例加入0.9 mL Extraction Buffer，以移液器重複吹打混勻，4℃ 12,000 g離心5 min，取上清，置於冰用於檢測。

2.動物組織或植物組織樣本：依0.1 g組織的比例加入1 mL Extraction Buffer，冰上勻漿。 4℃、12,000 g離心5 min，取上清，置於冰上檢測。

3.貼壁細胞：棄去培養基，依照6孔板每孔的比例加入200 μL Extraction Buffer，用移液器重複吹打或搖晃培養板，讓Extraction Buffer充分接觸裂解細胞。 4℃、12,000 g離心5 min，取上清，置於冰上檢測。

4.懸浮細胞：收集5×106個細胞至離心管中，離心後棄上清。加入1 mL Extraction Buffer，用移液器重複吹打並裂解細胞。 4℃、12,000 g離心5 min，取上清，置於冰上檢測。

5. 細菌樣本：收集5×106細菌至離心管中，離心後棄上清。加入 1 mL 萃取緩衝液。超音波冰浴破菌1分鐘（功率20%或200w，超音波2秒，間隔1秒，重複20次）。 4℃、12,000 g離心5 min，取上清，置於冰上檢測。

(1) ATP，尤其是裂解樣品中的ATP，在室溫下較不穩定，需要在4℃或冰上操作。萃取的樣品需要在6小時內進行檢測。
(2)以本試劑盒中的Extraction Buffer裂解所得的細胞或組織樣本不僅可以用於ATP檢測，還可以用於蛋白濃度檢測、SDS-PAGE或Western檢測一些常規的溶解度較高的蛋白。如果需要測定樣本的蛋白質濃度，建議使用Abbkine目錄編號：KTD3001 Protein Quantification Kit (BCAAssay)來測量樣本的蛋白質濃度。

 

測定程序:

偵測步驟

1. 在96孔黑板或96孔白板的每個偵測孔中加入100 μLReaction Buffer。在室溫下孵育 3-5 分鐘以消耗所有背景 ATP，從而降低背景。 100 μL Reaction Buffer 中可一次添加 10-20 個偵測孔，以節省時間。

2. 在每個檢測孔中加入20 μL樣品或標準品，快速混勻，立即在光度計或多模式讀數器中檢測化學發光值。

(1) 一次性檢測孔（含標準孔）數量必須控制在20個以下。
(2) 根據預測試結果，應適當調整標準物質的濃度。
(3) 樣品體積可在10-100 μL範圍內調整。若樣品中ATP濃度較低，可添加100μL樣品，若樣品中ATP濃度較高，可添加較小體積的樣品，需使用相同體積為標準。如果樣品中ATP濃度特別高，可以用萃取緩衝液稀釋樣品後再進行測定。當添加10-100 μL標準品時，試劑盒在大約1 nM-10 µM的濃度範圍內具有良好的線性關係。
(4) 對於某些特殊組織或樣品，如果發現檢測到的ATP水平明顯低於預期，可在樣品裂解後離心前將部分樣品煮沸2分鐘，以充分釋放ATP。樣品中的蛋白質在煮沸後發生變性，並且可以在隨後的離心步驟中沉澱，因此煮沸的樣品不能用於蛋白質濃度測定、SDS-PAGE和Western測定。其餘樣品可用於蛋白質濃度測定、SDS-PAGE 和 Western 測定。

Kit components	•Extraction Buffer •Assay Buffer •Firefly Luciferase Substrate •Luciferase •ATPStandard(5mM)
Features & Benefits	The verified samples are complete in type and easy to operate
Usage notes	•Fresh samples are recommended and can be stored at − 80°C for several weeks if experiments are not performed immediately. When measuring, the temperature and time of thawing should be controlled. When thawing at room temperature, the sample should be thawed within 4 hours. • Ensure that all components and equipment are at the appropriate temperature before starting the experiment.
Storage instructions	Stored at -20℃ for 12 months, protected from light
Shipping	Gel pack with blue ice.
Precautions	The product listed herein is for research use only and is not intended for use in human or clinical diagnosis. Suggested applications of our products are not recommendations to use our products in violation of any patent or as a license. We cannot be responsible for patent infringements or other violations that may occur with the use of this product.

BRAND/AGENCY/台灣代理商/ Abbkine台灣代理商

Abbkine Scientific Co., Ltd由一群志同道合的科學家和行銷專家，在2012年成立於美國加利福尼亞州，隨著亞洲市場的迅猛增長，Abbkine將總部搬遷至中國。結合了Abbkine美國技術和中國製造兩方面的巨大優勢，Abbkine致力於提供創新的、高品質的、買得起的實驗試劑盒、蛋白質、抗體以及其它研究工具，以期成為生命科學研究發展，藥物研發等領域的關鍵推動者。

 

發展歷程: Abbkine致力於提供創新的、高品質的、買得起的實驗試劑盒、蛋白質、抗體以及其它研究工具以期成為生命科學研究發展，藥物研發等領域的關鍵推動者。Abbkine以特色的蛋白質生產與檢測試劑起家，致力於創新和研發各類抗體、生化試劑、蛋白質和實驗試劑盒，以期望為全球科研工作者提供革新的解決方案。我們很自豪地為客戶提供如下特色產品線，並會一如既往地開發新型的、高品質的、買得起的生命科學研究和診斷試劑產品。

2017年檢測細胞因數和激素的ELISA試劑盒應運而生: 根據市場需求，開發EliKine™系列ELISA試劑盒，涵蓋各類細胞因數和激素熱門指標，如白介素（IL）、腫瘤壞死因數（TNF）、干擾素（IFN）等明星級偶聯標記試劑盒全球發售:2018年憑藉先進的蛋白質偶聯技術和嚴格的品質控制，我們提供LinKine™偶聯標記試劑盒，在抗體、蛋白質、多肽或者其它生物分子上可直接標記HRP，Biotin，FITC，Cy3，AbFluor™以滿足科研應用，藥物研發以及診斷試劑盒開發的需求。2019年生化、細胞類產品線逐步擴充搭建細胞產品研發平臺，細胞狀態檢測、細胞染色、細胞提取、生化試劑盒產品得到越來越多全球客戶的認可。

1. 全套表位標籤抗體和內參抗體，以及相應的定制偶聯產品
2. 小包裝的磷酸化和甲基化特異性的抗體產品
3. 最熱門的二抗產品：用於IF的IFKine系列產品，以及IP-WB的IPKine系列產品
4. 全套高品質，買得起的蛋白質純化工具（填料，預裝柱和試劑盒）
5. 暢銷的重組蛋白，包含各類細胞因數和生長因數
6. 更多細胞功能分析試劑盒，ELISA試劑盒，以及細胞示蹤試劑

此外，Abbkine還建立了技術服務平臺，包括免疫學相關實驗服務（WB/IHC/IF/IP）、蛋白偶聯服務、蛋白表達、生化/細胞學實驗代測、Elisa實驗代測、抗體製備等，憑藉專業技術、設備和服務態度，為客戶提供一站式實驗解決方案。Abbkine時刻把握客戶需求變化，並積極應對、及時調整，使得Abbkine成為許多國際領先的研究機構和臨床診斷公司值得信賴的可靠供應商。

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https://www.abbkine.com/

Abbkine Scientific Co., Ltd由一群志同道合的科學家和行銷專家，在2012年成立於美國加利福尼亞州，隨著亞洲市場的迅猛增長，Abbkine將總部搬遷至中國。結合了Abbkine美國技術和中國製造兩方面的巨大優勢，Abbkine致力於提供創新的、高品質的、買得起的實驗試劑盒、蛋白質、抗體以及其它研究工具，以期成為生命科學研究發展，藥物研發等領域的關鍵推動者。

發展歷程

Abbkine致力於提供創新的、高品質的、買得起的實驗試劑盒、蛋白質、抗體以及其它研究工具以期成為生命科學研究發展，藥物研發等領域的關鍵推動者。Abbkine以特色的蛋白質生產與檢測試劑起家，致力於創新和研發各類抗體、生化試劑、蛋白質和實驗試劑盒，以期望為全球科研工作者提供革新的解決方案。我們很自豪地為客戶提供如下特色產品線，並會一如既往地開發新型的、高品質的、買得起的生命科學研究和診斷試劑產品。2017年檢測細胞因數和激素的ELISA試劑盒應運而生: 根據市場需求，開發EliKine™系列ELISA試劑盒，涵蓋各類細胞因數和激素熱門指標，如白介素（IL）、腫瘤壞死因數（TNF）、干擾素（IFN）等明星級偶聯標記試劑盒全球發售。2018年憑藉先進的蛋白質偶聯技術和嚴格的品質控制，我們提供LinKine™偶聯標記試劑盒，在抗體、蛋白質、多肽或者其它生物分子上可直接標記HRP，Biotin，FITC，Cy3，AbFluor™以滿足科研應用，藥物研發以及診斷試劑盒開發的需求。2019年生化、細胞類產品線逐步擴充搭建細胞產品研發平臺，細胞狀態檢測、細胞染色、細胞提取、生化試劑盒產品得到越來越多全球客戶的認可。

1. 全套表位標籤抗體和內參抗體，以及相應的定制偶聯產品
2. 小包裝的磷酸化和甲基化特異性的抗體產品
3. 最熱門的二抗產品：用於IF的IFKine系列產品，以及IP-WB的IPKine系列產品
4. 全套高品質，買得起的蛋白質純化工具（填料，預裝柱和試劑盒）
5. 暢銷的重組蛋白，包含各類細胞因數和生長因數
6. 更多細胞功能分析試劑盒，ELISA試劑盒，以及細胞示蹤試劑

此外，我們還建立了技術服務平臺，包括免疫學相關實驗服務（WB/IHC/IF/IP）、蛋白偶聯服務、蛋白表達、生化/細胞學實驗代測、Elisa實驗代測、抗體製備等，憑藉專業技術、設備和服務態度，為客戶提供一站式實驗解決方案。Abbkine時刻把握客戶需求變化，並積極應對、及時調整，使得Abbkine成為許多國際領先的研究機構和臨床診斷公司值得信賴的可靠供應商。

細胞增殖&毒理&衰老 (8)

產品貨號	產品品項	反應	測量儀器
貨號KTA1001	活&死細胞雙染色試劑盒	100個反應	活細胞綠色螢光染劑Ex/Em = 488/530 nm; 死細胞紅色螢光染料(Ex/Em = 535/617)
貨號KTA3030	細胞衰老檢測（β-半乳糖苷酶）	100個反應	光學顯微鏡
貨號KTA1020	CCK-8細胞增殖和細胞毒性試劑盒	1000個反應	吸收光450nm
貨號KTA2030	EdU Image細胞增殖試劑盒 (BrdU替代法)	100個反應	AbFluor 488 azide (Ex/Em = 501/525 nm)
貨號KTB1110	（LDH）乳酸脫氫酶測定試劑盒	96個反應/	λmax= 450 nm 1- 20 U/mL of LDH
貨號 KTA2020	細胞週期染色檢測	50個反應/100個反應	Ex/Em=535/615 nm.
貨號KTA1030	LDH細胞毒性測定試劑盒	48個反應/ 96個反應	OD 565 nm 10,00-100,0000 cells per well
貨號BMD00064-50UG	Calcein AM鈣黃綠素活細胞螢光染劑	50ug	λEX/λEm: 494/517 nm (pH 8) (calcein)

 細胞凋亡&細胞染色 (8)

產品貨號	產品品項	反應	測量儀器
貨號 KTA2010	TUNEL細胞凋亡檢測試劑盒	50個反應	螢光酶標儀、螢光顯微鏡或流式細胞儀。FITC通道（Ex / Em = 490nm / 520 nm）
貨號KTA0002	Annexin V-AbFluor™488細胞凋亡檢測試劑盒	50個反應	Annexin V- AbFluor™ 488: Abs/Em = 491/517 nm; PI: Abs/Em = 535/617 nm (with DNA)
貨號KTA4001	JC-1線粒體膜電位測定試劑盒	20個反應	（聚結的JC-1，Ex / Em = 585/590 nm）發出綠色螢光（JC-1單體，Ex / Em = 510/527 nm） JC-1 Stain CCCP (10 mM)  Assay Buffer (5×)
貨號BMD00063	DAPI Staining Solution	10MG	λEx/λEm: 358/461 nm (with DNA)
KTD102-EN	凋亡細胞分析(Annexin V法和TUNEL法)	40個分析/20個分析
貨號KTC4100	Pro活細胞微管蛋白染色	50個反應/250個反應	Ex/Em = 500/520 nm
貨號KTC4001	Abbkine 細胞膜染色	100個反應/500個反應	Ex/Em = 484/501 nm
貨號KTC4003	TraKine™粒線體染色	100個反應	Ex / Em = 490/523 nm增殖(proliferating)和非增殖細胞(non-proliferating cells)

DNA Damege損傷/細胞Stress (8)

產品貨號	產品品項	反應	測量儀器
貨號KTB1050	脂質過氧化檢測試劑盒(MDA)	96個反應	OD 532 nm 1-100 µM/L
貨號KTB1910	活性氧（ROS）檢測分析試劑盒	50個反應/100個反應	DCFH-DA (10 mM)
貨號KTB1400	一氧化Dan（NO）檢測試劑盒	48個反應/ 96個反應	colorimetric (540 nm) 檢測範圍：1-100 µM
貨號KTB1080	超氧陰離子清除測定試劑盒	48個反應/ 96個反應	Superoxide anion scavenging rate D% =（∆∆ODControl – ∆∆ODSample）÷ ∆∆ODControl ×100%
貨號 KTB1091	羥基自由基清除能力比色測定試劑盒	48個反應/ 96個反應	吸收光 520nm
貨號KTB1041	CheKine™ 過氧化氫 (H2O2) 檢測試劑盒	96個反應/ 480個反應	OD 580 nm : 1 µM-100 µM
貨號KTB1210	CheKine™ 超氧陰離子比色測定試劑盒	48個反應/ 96個反應	absorption peak at 540nm 0.0125-0.5 mg/mL
貨號KTB1020	NAD/NADH 分析試劑盒	48個反應	OD565 nm 96 孔板測定中的檢測限值為 0.78 μM 線性最高 50 μM NAD+/NADH。

抗氧化分析試劑 (8)

產品貨號	產品品項	反應	測量儀器
貨號KTB1030	超氧化物歧化酶（SOD）活性測定試劑盒	48個反應 96個反應	200-3.13 U/ml
貨號KTB1040	Catalase過氧化氫酶活性檢測試劑盒	96個反應	OD 540 nm 2-75 µM
貨號KTB1500	總抗氧化劑能力TCA分析	96個反應/ 480個反應	593 nm 偵測範圍: 0.15-3 mM
貨號 KTB1660	硫氧還蛋白過氧化物酶（TPX）檢測	48個反應/ 96個反應	240nm
貨號KTB1600	穀胱甘肽(Glutathione)檢測	48個反應 96個反應	412 nm  2-200 µg/mL
貨號KTB3010	CheKine™ 花青素還原酶（ANR）活性比色測定試劑盒	96個反應	absorption at 340 nm
貨號KTB1530	黃酮類化合物檢測套組	48個反應 96個反應	absorption peak at 502 nm 0.156-10 mg/g
貨號KTB1140	多酚氧化酶檢測套組	48個反應 96個反應	absorption peak at 525 nm

膽固醇代謝/代謝試驗 (8)

產品貨號	產品品項	反應	測量儀器
貨號KTB1510	CheKine™尿酸（UA）比色分析試劑盒	48個反應/ 96個反應	吸收光505 nm Standard: 5 μmol/mL.
貨號KTB1300	Glucose葡萄糖測定試劑盒	96個反應	吸光值630nm 4- 300 mg/dL)
貨號KTB1340	CheKine™ 肝醣/糖原測定試劑盒	96個反應
貨號KTB2220	TC總膽固醇檢測試劑盒	48個反應/ 96個反應	500nm Standard: 5 μmol/mL
貨號KTB2250	CheKine™ 微量高密度脂蛋白膽固醇 (HDL-C) 檢測試劑盒	48個反應/ 96個反應	Absorption peak at 500nm Detection range: 0.078-5 mmol/L(The Detection range corresponds to the standard, and the actual content of sample is 0.156-10 mmol/L）
貨號KTB2260	CheKine™ 微量低密度脂蛋白膽固醇 (LDL-C) 檢測試劑盒	48個反應/ 96個反應	Absorption peak at 500nm Detection range: 0.078-5 mmol/L(The Detection range corresponds to the standard, and the actual content of sample is 0.117-7.5 mmol/L）
貨號KTB1390	CheKine™ 澱粉分支酶 (SBE) 活性比色測定試劑盒	48個反應/	absorption at 660 nm
貨號KTB1070	CheKine™黃嘌呤氧化酶檢測	96個反應	OD 450 nm 線性範圍15.6 -500 mU/

生化檢測試劑盒 (8)

產品貨號	產品品項	反應	測量儀器
貨號KTB1700	組織和血液鹼性磷酸酶（ Alkaline Phosphatase, AKP / ALP）比色測定	96個反應/	吸收光510 nm
貨號KTB1542	Tannase(TAN) 活性比色測定試劑盒	48個反應/	absorbance at 270 nm 0.3125-20 μmoL/mL
貨號KTB1541	CheKine™ 單寧比色測定試劑盒 | CheKine™ Tannin Colorimetric Assay Kit	48個反應/	absorbance at 760 nm 0.0156-1 mg/mL
貨號KTB1290	CheKine™ 烏頭酸酶 (ACO) 活性比色測定試劑盒	48個反應/	absorption at 340 nm.
貨號KTB1560	醇醯基轉移酶（AAT）活性比色檢測試劑盒	48個反應/ 96個反應	absorption at 412 nm.
貨號KTB1070	CheKine™黃嘌呤氧化酶檢測	96個反應	OD 450 nm 線性範圍15.6 -500 mU/
貨號KTB1380	β-澱粉酶活性比色測定	48個反應	absorption peak at 540 nm 0.0156-1 mg/mL
貨號KTB1310	葡萄糖氧化酶活性測定	48個反應	OD 580 下測量 偵測範圍: 0.05 – 2 U/L

發炎反應ELISA分析

產品貨號	產品品項	反應	測量儀器
貨號KET7013	IL-6 ELISA Kit試劑盒	96個反應/	450 nm 偵測範圍: 250pg/mL-16000 pg/mL, 最低靈敏度100 pg/mL
貨號KET6032	TNF–α Alpha型腫瘤壞死因子 ELISA試劑盒	96個反應/	450 nm 7.8 pg/ml-500 pg/ml
貨號KET6033	VEGF血管內皮生長因子ELISA試劑盒	96個反應/	450 nm 偵測範圍: 31.25 pg/mL-2000 pg/mL
KET7013	IL-22 ELISA試劑盒	96個反應/
貨號KET7003	IFN-γ（干擾素-γ）ELISA試劑盒	96個反應/	31.25 pg/ml- 2000 pg/ml
貨號KET6019	IL-10 ELISA試劑盒	96個反應/	2.35 pg/ml-150 pg/ml
貨號KET7002	GM-CSF ELISA試劑盒	96個反應/	7.8 pg/mL-500 pg/mL
貨號KET7005	白介素-1βELISA試劑盒	96個反應/ 96 X5盤	Microplate reader capable of measuring absorbance at 450 nm, with the correction wavelength set at 540 nm or 570 nm. 偵測範圍: 15.6 pg/ml-1000 pg/ml

重組蛋白&單多株抗體

產品貨號	產品品項	反應	測量儀器
貨號PRP1012	Human IL-6 protein重組蛋白	5ug	human IL-6 (NP_000591.1) (Val 30-Met 212)/ E. coli
貨號PRP100273	Human IL-4 protein重組蛋白	20ug	ED50 for this effect is 0.05-0.2 ng/mL. The specific activity of Recombinant Human IL-4 is approximately 3.2 × 10E4 IU/μg.
貨號PRP100159	Human EGF protein重組蛋白	100ug
貨號PRP1012	Human IL-6 protein重組蛋白	5ug	human IL-6 (NP_000591.1) (Val 30-Met 212)/ E. coli
貨號ABP52783	GAPDH Polyclonal Antibody	30ul	Human, Mouse, Rat。可應用於ELISA, IHC-P, WB實驗。
貨號A21010	HRP, Goat Anti-Mouse IgG	100ul
貨號A21020	HRP, Goat Anti-Rabbit IgG	100ul
貨號A23220	Dylight 488, Goat Anti-Rabbit IgG	100ul

抗體蛋白純化&其它

產品貨號	產品品項	反應	特點
貨號KTP2070	抗體純化試劑盒（蛋白 A/G）	1ml
貨號BMR2001	His-Tag Ni-NTA Resin樹脂	5ml
貨號 KTD105-EN	IP/Co-IP Toolkit (Agarose)	20個反應
貨號KTD3001	BCA蛋白定量試劑盒	500個反應	OD 562 nm 相容性 5 % SDS, 5 % Triton X-100, 5 % Tween-20, 60, 80 50 to 1000 µg/ml.
貨號KTP2140	PurKine™內毒素去除樹脂(套組)	1ml×5	More than 2,000,000 EU/mL to eliminate >99% of endotoxins.
BMD0062	Hoechst 33342	10MG
BMU104-EN	增強型Antifade封片劑	10ml
貨號BMS0050	正常山羊血清	10ml

細胞培養相關

產品貨號	產品品項	反應	特點
BMU108-EN	SuperKine™ 無血清/無蛋白細胞冷凍培養基	100ML	成分清晰，無血清/無蛋白，避免病毒、細菌、支原體等污染