【DNA damage】Comet assay SCGE 單細胞電泳 / 彗星分析—Trevigen
美國TREVIGEN公司成立於1992年。致力於研發偵測細胞凋亡、DNA斷損與修復、體內血管新生分析套組(In vivo angiogenesis assay, DIVAA)、體外血管新生分析套組(in vitro angiogenesis assay)、慧星分析法(Comet assay Kit)、細胞移行/細胞侵襲(Cell migration and Cell invasion assay)、基底膜萃取物(Basement Membrane Extract)、以及PAR、PARP、PARG所需用到的抗體與試劑。
單細胞凝膠電泳(Single Cell Gel Electrophoresis Assay)是一種快速、 簡易性、及高靈敏度檢測單獨細胞DNA受損的方法。利用LM agarose膠體電泳分離不同大小片段的DNA,偵測細胞DNA斷裂的情況。斷裂之DNA片段在電泳後會移動至細胞核外,經由核酸染色後,會形成拖尾的現象,故又名為彗星分析法(COMET assay);若細胞DNA未損害則移動慢,且會留在核質體內。可藉由分析DNA分布的情況,判斷細胞受損的嚴重度。
特性:
- 依使用緩衝液之不同,分別針對雙股(double strand)與單股(single strand)DNA斷裂進行偵測。
- 緩衝液可使用中性(Neutral)或鹼性(Alkaline)兩種不同的緩衝液,進行多種DNA斷裂分析。
- 除應用在DNA damage、細胞凋亡外,亦可分析藥理毒性、Sperm DNA fragmentation(in vitro fertilization)。
操作流程:
- 待測細胞與低熔點瓊脂膠 (LM Agarose),在37oC下均勻混合。
- 將細胞放置在CometSlide™上。
- 給予細胞Lysis Solution,移除細胞膜與DNA上的histones。
- 加入試劑使DNA變性、解旋。
- 樣品使用核酸染劑進行染色,並使用螢光顯微鏡,觀測電泳後斷裂DNA移動的情形。
商品型號 |
產品名稱 |
包裝規格 |
Comet Assay分析試劑組 |
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4250-050-K |
CometAssay® Kit(25X2 well slides) |
50 samples |
4252-040-K |
CometAssay® Kit(2X20 well slides) |
40 samples |
4253-096-K |
CometAssay® Kit(1X96 well slide) |
96 samples |
Comet Assay專用玻片 |
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4250-050-03 |
CometSlides™ 專用玻片(2 Well) |
25 片 |
4252-040-01 |
CometAssay® HT 專用玻片(20 Well) |
2 片 |
4253-096-03 |
CometSlide™ 專用玻片(96 Well) |
1 片 |
Comet Assay 專用試劑 |
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4250-010-01 |
CometAssay Lysis Solution |
100 ml |
4250-050-02 |
CometAssay® LM Agarose |
15 ml |
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