Catalase過氧化氫酶 (觸酶) 活性檢測試劑盒 | CheKine™ Catalase Activity Assay Kit貨號KTB1040

偵測範圍2-75 µM (最低靈敏度2 U/ml) 

過氧化氫酶/觸酶（Catalase , CAT）是幾乎在所有活生物體中常見的抗氧化酶(antioxidant enzyme)。它的主要功能是催化過氧化氫(hydrogen peroxide)分解為水(water)和氧氣(oxygen)，並去除體內的過氧化氫(hydrogen peroxide)，從而防止細胞被過氧化氫中毒。它是生物防禦系統(biological defense system)中的關鍵酶之一，為人體提供了抗氧化防禦機制(antioxidant defense mechanism)。CheKine™過氧化氫酶/觸酶活性檢測試劑盒(CheKine™ Catalase Activity Assay Kit, KTB1040) 可應用於各種生物樣品（例如Tissue Homogenate, Cell Lysate, serum, plasma, erythrocyte lysate）中的過氧化氫酶活性(catalase activity)檢測, 提供了一種簡便的比色測定方法。 該檢測試劑盒基於過氧化氫酶(catalase)與甲醇(methanol)的反應，在最佳濃度的H2O2存在下，利用過氧化氫酶(catalase)的過氧化功能來測量過氧化氫酶活性。 產生的甲醛(formaldehyde)可以在OD 540 nm處進行比色測定。 因此，樣品中存在的過氧化氫酶活性(catalase activity)與獲得的信號成正比。測量線性範圍為 2-75 µM, 最低測量活性為2 U/ml。Abbkine對於CAT活性測定試劑盒(CAT Activity Assay Kit)，選擇了不同的品牌（Cayman Chemical，Abcam，Biovision），與Abbkine CheKine™過氧化氫酶（CAT）活性測定試劑盒（Cat＃：KTB1040）進行了比較。CAT活性測定試劑盒，Abbkine和Cayman Chemical品牌的測定原理相似。甲醇(Methanol)被用作反應底物。而Abcam和Biovision將H2O2作為反應底物。H2O2不僅是過氧化氫酶（catalase , CAT）的單一底物，樣品中的其他過氧化物酶可能會干擾實驗結果，並且標準曲線誤差可能是由過氧化氫的不穩定性引起的。儘管甲醇(Methanol)是過氧化氫酶的獨特底物，但其他過氧化物酶不能使用甲醇(Methanol)作為底物，因此可以避免訊號干擾。

Fig. Formaldehyde standard curve. The y-axis is absorbance of standards and the x-axis is final formaldehyde concentration (uM).

1.標準曲線的繪製：

以標準溶液的甲醛終濃度（μM）為縱軸，ΔAStandard為橫軸，繪製標準曲線。

2. 使用標準曲線線性迴歸所得的方程，並取代每個樣品的校正吸光度值，計算樣品的甲醛濃度。甲醛（μM）=y×（0.17 mL÷0.02 mL）=8.5×y

3.使用下列公式計算樣本的 CAT 活性。一個單位定義為在25℃下每分鐘產生1.0nmol甲醛的酵素量。 CAT活性=樣品μM÷(20分鐘)×樣品稀釋度=0.425×y×樣品稀釋度(nmol/min/mL)

Brand	Assay Principle	Sample type
Abbkine	過氧化氫酶活性(catalase activity)檢測, 提供了一種簡便的比色測定方法。 該檢測試劑盒基於過氧化氫酶(catalase)與甲醇(methanol)的反應，在最佳濃度的H2O2存在下，利用過氧化氫酶(catalase)的過氧化功能來測量過氧化氫酶活性。 產生的甲醛(formaldehyde)可以在OD 540 nm處進行比色測定。 因此，樣品中存在的過氧化氫酶活性(catalase activity)與獲得的信號成正比。測量線性範圍為 2-75 µM, 最低測量活性為2 U/ml。	Tissue Homogenate, Cell Lysate, serum, plasma, erythrocyte lysate
Cayman Chemical	該檢測試劑盒基於過氧化氫酶與甲醇的反應，在最佳濃度的H2O2存在下，利用過氧化氫酶的過氧化功能來測量過氧化氫酶活性。 產生的甲醛可以在OD 540 nm處進行比色測定。 因此，樣品中存在的過氧化氫酶活性與獲得的信號成正比。	Tissue Homogenate, Cell Lysate, serum, plasma, erythrocyte lysate
Abcam	樣品中存在的過氧化氫酶與過氧化氫（H2O2）反應生成水和氧氣。 未轉化的H2O2與探針反應生成可以在OD 570 nm處進行比色法測量的產物。	Serum, Plasma, Cell Lysate, Tissue Lysate, Urine
Biovision	樣品中存在的過氧化氫酶與過氧化氫（H2O2）反應生成水和氧氣。 未轉化的H2O2與探針反應生成可以在OD 570 nm處進行比色法測量的產物。	Tissue Homogenate, Cell Lysate, erythrocyte lysate

(文獻引用出自) Figure 7. (a–c) Enzymatic antioxidant levels in the ethanolic extract of C. papaya in the control and diabetic rats. Each bar indicates the mean ± SEM of eight rats, with p < 0.05 indicating significant differences between the groups as: a—control; b—diabetes; c—diabetic rats treated with ethanolic extract of C. papaya; and d—diabetic rats treated with metformin.

(文獻出自) To assess the effect of Cd exposure on the oxidative state, the activity of catalase (CAT), malondialdehyde (MDA), and total antioxidant capacity (TAC) in MC3T3-E1 cells was detected using the commercial kit (Abbkine, China).

Product name	CheKine™ Micro Catalase (CAT) Activity Assay Kit
Applications notes	CheKine™ Micro Catalase Activity Assay Kit provides a simple and easy colorimetric assay for the study of catalase activity in a variety of biological samples such as cell and tissue lysates or biological fluids. This assay kit utilizes the peroxidatic function of catalase for measuring catalase activity, based on the reaction of catalase with methanol, with the presence of an optimal concentration of H2O2. The formaldehyde produced can be measured colorimetrically at OD 540 nm. Therefore, the catalase activity present in the sample is proportional to the signal obtained.
Kit components	• Assay Buffer • Sample Diluent • Formaldehyde standard (4.25 M) • Catalase (control) • Potassium Hydroxide • Hydrogen Peroxide • Chromogen • Potassium Periodate
Features & Benefits	• Determination of catalase activity in serum, plasma, tissue/cell lysates and other biological fluids. • Determining catalase activity directly by utilizing the peroxidatic function of catalase, which can not be interfered by other peroxidases. • A broad range linearity: 2-75 µM. • Measure catalase activity down to 2 U/ml
Usage notes	• If not assayed immediately, samples can be stored at -80°C. • Overheating can inactivate catalse. The enzyme should be kept cold during sample preparation and assaying. • In general, catalase is very unstable at high dilution. It is recommned to store samples concentrated and assay within 30 minutes afrer dilution.
Storage instructions	Storage at -20°C and Keep from light immediately upon receipt. Kit has a storage time of 6 months from receipt. Refer to list of materials supplied for storage conditions of individual components.
Shipping	Gel pack with blue ice.
Background	Catalase (EC 1.11.1.6), is a common antioxidant enzyme that catalyzes the decomposition of hydrogen peroxide (H2O2) to water and oxygen, ubiquitously present in aerobic cells containing a cytochrome system. Hydrogen peroxide is highly deleterious to the cell and its accumulation will cause oxidation of cellular targets such as DNA, proteins, and lipids, thus leading to mutagenesis and cell death. Removal of the hydrogen peroxide (H2O2) from cells by using catalase provides protection against oxidative damage to the cell. The role of catalase in oxidative stress related diseases has been widely studied. Catalase also demonstrates peroxidatic activity, in which low molecular weight alcohols can serve as electron donors. Aliphatic alcohols are specific substrates for catalase, however, other enzymes with peroxidatic activity do not utilize these substrates.

商品需用儀器測量  酵素免疫分析儀請按此 (標配405、450、492、630 nm, 可擴增至7個濾片)

 

 

 

 

 

 

檢測脂質氧化損傷程度-（SOD、CAT、GPx、MDA）檢測試劑盒

判斷機體或細胞的脂質氧化損傷程度，一方面需要檢測抗氧化酶（SOD、CAT、GPx）活力以判斷藥物等清除氧自由基的能力，另一方面檢測脂質過氧化產物MDA的水平以間接判斷細胞受自由基攻擊的嚴重程度。同時分析SOD、CAT、GPx、MDA的水平結果分析可更全面評估氧化壓力水平的變化。眾所周知，氧化壓力(oxidative stress)是因為機體活性氧水平和內源性抗氧化能力之間失去了平衡，導致細胞抗氧化能力不足，細胞內毒性活性氧（ROS）增加，產生氧自由基（ O2-，.OH, H2O2），使生物大分子受到攻擊，因而造成的細胞和組織損傷。

脂質氧化傷害

身體中氧化還原狀態失衡勢必會造成嚴重後果，不同組織細胞等會遭受到不同程度的損傷與破壞，主要表現在脂質、胺基酸和蛋白質的氧化損傷、核酸和染色體等氧化損傷方面。脂質與ROS（尤其是• OH）反應是細胞氧化損傷的普遍機制，此反應主要取決於細胞膜流動性。自由基攻擊不飽和脂肪酸，降低膜的流動性，影響細胞生理功能；脂質過氧化過程中產生的氧自由基可氧化修飾細胞膜上和質內的酶，使其失去活性。脂質過氧化產物，如丙二醛（MDA）能與蛋白、核酸及腦磷脂等含氨基化合物反應，使之發生交聯。脂質過氧化可藉由產生的自由基損傷細胞，誘導細胞凋亡，同時其細胞毒性可影響多種酵素的活性及ATP的合成。

正常情況下，生物體中天然的抗氧化劑防禦系統中的抗氧化酶可以與飲食或藥物中的抗氧化劑協同作用，清除過氧化物。其中最重要的抗氧化酵素包括超氧化物歧化酶（SOD），穀胱甘肽過氧化物酶（GPx）和過氧化氫酶（Cat）。SOD負責將超氧陰離子歧化為過氧化氫，而Cat和GPxs則可以減少過氧化氫，阻止高毒性羥基自由基的產生。重要的是，GPxs還可以減少多元不飽和脂肪酸的氫過氧化物，抵消脂質過氧化的毒性作用。

同時因為脂質過氧化是由自由基啟動的，不飽和脂肪酸在自由基和一些氧化引發脂類氧化的最初階段形成共軛二烯, 然後形成環狀過氧化物, 最後的主要產物是丙二醛（MDA）。

所以，判斷機體或細胞的脂質氧化損傷程度，一方面需要檢測抗氧化酶（SOD、CAT、GPx）活力以判斷藥物等清除氧自由基的能力，另一方面檢測脂質過氧化產物MDA的水平以間接判斷細胞受自由基攻擊的嚴重程度。同時分析SOD、CAT、GPx、MDA的水平結果分析可更全面評估氧化壓力水平的變化。

Abbkine 可提供全套脂質氧化損傷檢測試劑盒，檢測方法簡單、方便、靈敏，產品詳情如下：

產品名稱	檢測方法	靈敏度&檢測範圍	適合樣本	貨號
CheKine™ 超氧化物歧化酶(SOD) 活力檢測試劑盒	較穩定/靈敏的WST-8顯色法	3.13U/ml -200U/ml	血清，血漿，組織/細胞裂解物和其他生物體液	KTB1030
CheKine™ Catalase (CAT) 過氧化氫酶活性檢測試劑盒	直接利用過氧化氫酶的過氧化功能直接測定過氧化氫酶活性	靈敏度低至2 U/ml	血清、血漿、紅血球裂解產物、組織勻漿、細胞裂解液等生物樣品	KTB1040
CheKine™脂質過氧化（MDA）檢測試劑盒	改良的硫代巴比妥酸(TBA)法	1-100 µM/L	血清，血漿，尿液，組織/細胞裂解物和其他生物體液	KTB1050
CheKine™穀胱甘肽過氧化物酶（GSH-Px）檢測試劑盒	直接利用GSH-Px酶催化H 2 O 2的活性進行檢測	//	血清，血漿，組織/細胞裂解物和其他生物體液	KTB1640

相關發表的文獻：

Anton Bahtiar*, Putri Sagita Utami，etc. The Antioxidant Effects of the Ethanolic Extract of Binahong Leaves Unilateral Ureteral Obstruction Rat Model，Pharmacogn J. DOI : 10.5530/pj.2021.13.26.

常見抗氧化活性的評估方法

Abbkine所有生化試劑盒都可用分光光度計檢測的，需確認一個先決條件：具備與分光光度計匹配的微量比色皿。

分類	貨號	品項	內容	更多資料
常見抗氧化活性的評估方法 <抗氧化維生素系統&小分子>	貨號KTB1070	CheKine™黃嘌呤氧化酶檢測	CheKine™ Xanthine Oxidase Assay Kit 線性範圍15.6 -500 mU/mL	操作手冊
	貨號KTB1910	CheKine™活性氧（ROS）檢測分析試劑盒 <螢光檢測>	活性氧ROS檢測 DCFH-DA (10 mM)	操作手冊
	貨號KTB1400	一氧化氮（NO）檢測	一氧化氮（NO）檢測範圍：1-100 µM	操作手冊
	貨號KTB1040	Catalase過氧化氫酶/觸酶活性檢測	測量線性範圍為 2-75 µM, 最低測量活性為2 U/ml。	操作手冊
	貨號KTB1500	總抗氧化劑能力分析	偵測範圍: 0.15-3 mM	操作手冊
	貨號KTB1530	黃酮類化合物檢測套組 <植物>	偵測範圍:0.156-10 mg/g	操作手冊
	貨號KTB1050	CheKine™脂質過氧化檢測試劑盒	MDA與硫代巴比妥酸（thiobarbituric acid ,TBA）反應生成MDA-TBA加合物在OD 532 nm處進行比色定量。1-100 µM/L	操作手冊
	貨號KTB1091	羥基自由基清除能力比色測定試劑盒	Hydroxyl Free Radical Scavenging Capacity Colorimetric Assay Kit	操作手冊
	貨號KTB1210	超氧陰離子比色測定試劑盒	Superoxide Anion Colorimetric Assay Kit	操作手冊
	貨號KTB1020	Coenzyme Ⅰ NAD(H) 分析試劑盒| <組織/細胞>	NAD是一種酶共體(enzymatic cofactor)，涉及許多氧化還原反應(redox reactions)	操作手冊
	貨號KTB1041	CheKine™ 過氧化氫 (H2O2) 檢測試劑盒	過氧化氫 (Hydrogen Peroxide , H2O2) 是一種活性氧(reactive oxygen)代謝副產物	操作手冊
	貨號KTB1080	超氧陰離子清除測定試劑盒|	O2-與四唑鎓鹽WST-8染料反應形成水溶性的有色formazan產物	操作手冊
常見抗氧化活性的評估方法 <抗氧化酵素系統>	貨號KTB1610	英文名稱: CheKine™ Glutathione Oxidized (GSSG) Colorimetric Assay Kit 氧化型穀胱甘肽（GSSG）檢測	穀胱甘肽氧化（GSSG）比色分析試劑盒：還原型穀胱甘肽可與DTNB反應並生成2-硝基-5-巰基苯甲酸，在412nm波長處具有最大的光吸收率。	操作手冊
	貨號KTB1600	英文名稱: CheKine™ Reduced Glutathione (GSH) Colorimetric Assay Kit 還原型穀胱甘肽（GSH）檢測	利用DTNB與還原型穀胱甘肽反應形成黃色產物。在412 nm處測得的光密度可以直接反映樣品中的穀胱甘肽濃度。	操作手冊
	貨號 KTB1620	英文名稱: CheKine™ Glutathione Oxidized (GSSG) Colorimetric Assay Kit 氧化型穀胱甘肽（GSSG）檢測	還原型穀胱甘肽可與DTNB反應並生成2-硝基-5-巰基苯甲酸，在412nm波長處具有最大的光吸收率。10-20uM	操作手冊
	貨號KTB1640	英文名稱: CheKine™ Glutathione Peroxidase (GSH-Px) Colorimetric Assay Kit GSH-Px 穀胱甘肽過氧化物酶檢測	GSH-Px催化H2O2氧化GSH生成GSSG；穀胱甘肽還原酶（GR）催化NADPH還原GSSG從而再生GSH，而NADPH氧化產生NADP +。 NADPH在340 nm處有一個特徵吸收峰，而NADP +沒有。通過測量340 nm處吸光度的降低速率來確定NADPH脫氫速率，以計算GSH-Px活性。	操作手冊
	貨號KTB1630	英文名稱: CheKine™ Glutathione S-Transferase (GST) Colorimetric Assay Kit GST穀胱甘肽S-轉移酶分析	FGST催化GSH與CDNB的結合。共軛伴隨著在340nm處吸光度的增加。增加速率與樣品中的GST活性成正比。	操作手冊
	貨號KTB1650	英文名稱: CheKine™ Thioredoxin Reductase (TrxR) Colorimetric Assay Kit  硫氧還蛋白還原酶 (TrxR) 檢測試劑盒	TrxR可以催化NADPH還原DTNB從而生成TNB和NADP +。 TNB在412nm處具有特徵吸收峰。 TrxR活性可以通過測量412 nm處TNB的增加速率來計算。	操作手冊
	貨號KTB1660	英文名稱: CheKine™ Thioredoxin Peroxidase (TPX) Colorimetric Assay Kit 硫氧還蛋白過氧化物酶（TPX）檢測	TPX催化H2O2氧化二硫蘇糖醇（DTT）。 H2O2的吸收波長為240nm。 TPX活性可以通過測量240nm處吸光度的降低速率並減去過氧化氫酶（CAT）催化的H2O2來計算。因此，該試劑盒可以同時測量樣品的TPX和CAT活性。	操作手冊
	貨號KTB1030	Superoxide dismutase Activity Assay Kit, 超氧化物歧化酶（SOD）活性測定試劑盒	WST-8法測定SOD活性，最大抑制率可接近100%，不受一些常見干擾因素的干擾。廣泛的線性範圍：3.13-200U/mL。	操作手冊
	貨號CEA660Ge	8-羥基去氧鳥苷(8-OHdG)檢測試劑盒(酵素免疫分析法	偵測的靈敏度74.07-6000pg/mL、最低靈敏度27.53pg/mL	操作手冊
	貨號KTB1011	CheKine™ 葡萄糖-6-磷酸脫氫酶 (G6PDH) 活性比色測定試劑盒 | 貨號KTB1011	樣品中存在的 G6PDH 將 NADP+ 轉化為 NADPH，其在 340 nm 處具有吸光度。	操作手冊
	貨號KTB1140	PPO多酚氧化酶檢測套組	Polyphenol Oxidase (PPO) Activity Colorimetric Assay Kit	操作手冊
常見抗氧化活性的評估方法 <蛋白質>	貨號KTB1200	CheKine™蛋白羰基比色測定試劑盒 | 貨號KTB1200	羰基蛋白(Protein carbonyl)是蛋白質氧化修飾(protein oxidative modification)過程中早期信號，是衡量蛋白質氧化損傷(protein oxidative damage)的主要指標	操作手冊