【超氧離子研究】SOD超氧化物歧化酶/MDA脂質過氧化/Xanthine黃嘌呤氧化酶檢測

超氧離子（Superoxide ion , O2·-）研究的意義

超氧離子（Superoxide ion , O2·-）被認為是自由基(radical)和帶有自由基符號radical sign ( . )且電荷為-1的陰離子(anion)，是通過分子氧(molecular oxygen)的單電子還原產生的，並且作為自由基具有重要意義，與多種化學(diverse chemical)和生物系統有關的radical species。超氧陰離子(Superoxide anion)是呼吸的副產物(byproduct)，是免疫防禦系統的重要組成部分。它可以從兩個主要來源生成：線粒體呼吸鍊 (mitochondrial respiratory chain) 和吞噬煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶（phagocytic nicotinamide adenine dinucleotide phosphate oxidase , NADPH氧化酶）。在正常情況下，生物系統會釋放一種酶，即超氧化物歧化酶（SOD），該酶可將超氧化物陰離子(Superoxide anion)的濃度特別保持在最佳水平。

然而，當發生超氧化物陰離子(Superoxide anion)的過量生產和/或抗氧化劑防禦能力不足時，可能產生氧化應激(oxidative stress)，從而損害重要的生物分子並改變其生理功能。例如，超氧陰離子(Superoxide anion)攻擊細胞成分，導致脂質(lipids)，蛋白質(proteins)和核酸(nucleic acids)受損。這可以引發多種疾病，包括癌症(cancer,)，動脈粥樣硬化(atherosclerosis)，類風濕性關節炎(rheumatoid arthritis)，糖尿病(diabetes)，肝損傷(liver damage)，肌肉減少症(sarcopenia)，肥胖症(obesity)，引起泌尿系統疾病的變性疾病(urological disorders)，纖維性肺泡(fibrous alveoli)，支氣管肺炎發育不良(bronchopneumonia dysplasia)，成人呼吸窘迫綜合徵(adult respiratory distress syndrome)，阿爾茨海默氏病(Alzheimer’s disease)和中樞神經系統疾病(nervous system disorders)。

Abbkine提供一系列氧化應激(oxidative stress)相關檢測商品: 超氧化物歧化酶（SOD）活性測定試劑盒 (貨號KTB1030)， CheKine™超氧化物歧化酶（SOD）活性測定試劑盒(CheKine™ Superoxide dismutase (SOD) Activity Assay Kit, 貨號KTB1030)為定量測定血清(serum)，血漿(plasma)，組織(tissue)/細胞裂解液(cell lysates)和其他生物液體(biological fluids)中的SOD酶活性(SOD enzyme activity)提供了一種簡便的比色測定法(colorimetric assay)。在測定中，黃嘌呤氧化酶（xanthine oxidase, XO）催化反應提供了超氧陰離子()（superoxide anion , O2-）。 O2-與四唑鎓鹽WST-8染料( tetrazolium salt WST-8 dye)反應生成水溶性 formazan產物。 SOD清除了O2－，因此用於顯色反應的O2－較少。通過比色法在OD 450nm下測量SOD的這種抑制活性。由於SOD試劑盒（KTB1030）報告為抑制％，因此可以不使用標準試劑。樣品中的SOD越多，產生的 less WST-8 formazan產物（這取決於黃嘌呤氧化酶（XO）活性）。CheKine™ MDA脂質過氧化檢測試劑盒 (貨號KTB1050)（CheKine™ Lipid Peroxidation (MDA) Assay Kit, MDA）檢測試劑盒為檢測各種樣品中存在的丙二醛（malondialdehyde, MDA）提供了便利的工具。 MDA與4-羥基壬烯醛（4-hydroxynonenal , 4-HNE）一起是脂質過氧化(lipid peroxidation)作用的天然副產物，其定量通常用作脂質過氧化(lipid peroxidation)作用的標記。樣品中的MDA與硫代巴比妥酸（thiobarbituric acid ,TBA）反應生成MDA-TBA加合物，可以很容易地在OD 532 nm處進行比色定量。同時，測量600nm處的吸光度，並通過532nm和600nm處的吸光度之差計算MDA（以避免蔗糖(saccharose) 的干擾）。偵測靈敏度1-100 µM/L。 CheKine™黃嘌呤氧化酶檢測 | CheKine™ Xanthine Oxidase Assay Kit (貨號KTB1070) (CheKine™ Xanthine Oxidase Assay Kit, KTB1070) 提供了一種簡便的比色測定法，用於定量測定各種樣品中存在的黃嘌呤氧化酶（Xanthine oxidase, XO）。在測定中，黃嘌呤氧化酶（Xanthine oxidase, XO）將黃嘌呤氧化成超氧化物（superoxide , O2-）。超氧化物（superoxide , O2-）與四唑鹽WST-8 (tetrazolium salt WST-8) 染料反應形成水溶性的formazan product產物，可以很容易地在OD 450 nm處進行比色定量。因此，樣品中存在的黃嘌呤氧化酶（Xanthine oxidase, XO）與所獲得的訊號成比例。線性範圍15.6 -500 mU/mL.

Product name	Catalog No.	Product Features
超氧化物歧化酶（SOD）活性測定試劑盒 CheKine™ Superoxide Dismutases (SOD) Assay Kit	貨號KTB1030	• Determination of SOD enzyme activity in serum, plasma, tissue/cell lysates and other biological fluids. • Determining SOD activity by WST-8 method, the maximum inhibition percentage can be close to 100%, and it can not be interfered by some common interfering factors. • A broad range linearity: 200-3.13 U/ml.
MDA脂質過氧化檢測試劑盒CheKine™ Lipid Peroxidation (MDA) Assay kit	貨號KTB1050	• Determination of MDA in serum, plasma, urine, tissue/cell lysates and other biological fluids. • A broad range linearity: 1-100 µM/L. • Fast and convenient, measuring lipid peroxidation in a wide range of samples.
黃嘌呤氧化酶檢測CheKine™ Xanthine Oxidase Assay Kit	貨號KTB1070	• Determination of xanthine oxidase activity in serum, plasma, tissue/cell lysates and other biological fluids. • A broad range linearity: 15.6 -500 mU/mL.
CheKine™ Superoxide anion Scavenging Capacity Assay Kit	KTB1080	• Determination the Superoxide anion Scavenging ability in various samples, including serum, plasma, tissue/cell lysates and other biological fluids.

超氧化物歧化酶（SOD）活性測定試劑盒 | Superoxide dismutase Activity Assay Kit, 貨號KTB1030

超氧化物歧化酶（Superoxide dismutases , SOD，EC1.15.1.1）是催化超氧化物陰離子(superoxide anion)分解為O2和H2O2的酶。它們是抵抗暴露於O2的所有細胞中超氧自由基(superoxide radical)毒性的重要抗氧化劑(antioxidant defense against)。 SOD異常活動與肌萎縮性側索硬化(amyotrophic lateral sclerosis)，圍產期致死率(perinatal lethality)，神經疾病(neural disorders)和癌症(cancer)等疾病有關。超氧化物歧化酶(superoxide dismutase)有三個主要家族：Cu / Zn，Fe / Mn和Ni型。人類中存在三種形式的超氧化物歧化酶(superoxide dismutase)。 SOD1位於細胞質(cytoplasm)中，SOD2位於線粒體(mitochondria)中，SOD3位於細胞外(extracellular)。

Fig. Plot the Standard Curve inhibition rate vs SOD activity.
產品描述： CheKine™超氧化物歧化酶（SOD）活性測定試劑盒(CheKine™ Superoxide dismutase (SOD) Activity Assay Kit, 貨號KTB1030)為定量測定血清(serum)，血漿(plasma)，組織(tissue)/細胞裂解液(cell lysates)和其他生物液體(biological fluids)中的SOD酶活性(SOD enzyme activity)提供了一種簡便的比色測定法(colorimetric assay)。

Kit components
Assay Buffer
• Sample Diluent
• WST-8
• Enhancer
• SOD Standard (200 U/mL)
• Xanthine Oxidase
• Xanthine
Features & Benefits
Determination of SOD enzyme activity in serum, plasma, tissue/cell lysates and other biological fluids.
• Determining SOD activity by WST-8 method, the maximum inhibition percentage can be close to 100 %, and it can not be interfered by some common interfering factors.
• A broad range linearity: 200-3.13 U/ml.
Usage notes
Briefly centrifuge small vials at low speed prior to opening.
• Prior to assay, bring all reagents to room temperature (25°C). The Xanthine reagent may appear to be turbid. Briefly vortext this tube before pipetting.
• If not assayed immediately, samples can be stored at -80°C.

CheKine™脂質過氧化檢測試劑盒| CheKine™ Lipid Peroxidation (MDA) Assay Kit, MDA貨號KTB1050

氧化應激(Oxidative stress)與包括心血管疾病(chronic diseases)在內的許多慢性疾病的病因有關。脂質過氧化(Lipid peroxidation)是由於氧化損傷(oxidative damage)而發生的脂質(lipids)降解(degradation)，是氧化應激(oxidative stress)的有用標記(useful marker)。多不飽和脂質(Polyunsaturated lipids)通常易受活性氧(reactive oxygen)的影響而受到氧化攻擊，從而導致產生明確的鏈反應，並生成最終產物，如丙二醛（malondialdehyde ,MDA）脂質過氧化(Lipid peroxidation)可能導致許多疾病的病理，包括動脈粥樣硬化(atherosclerosis)，糖尿病(diabetes)和阿爾茨海默氏病(Alzheimer’s)。
產品描述：

CheKine™脂質過氧化（CheKine™ Lipid Peroxidation (MDA) Assay Kit, MDA）檢測試劑盒為檢測各種樣品中存在的丙二醛（malondialdehyde, MDA）提供了便利的工具。 MDA與4-羥基壬烯醛（4-hydroxynonenal , 4-HNE）一起是脂質過氧化(lipid peroxidation)作用的天然副產物，其定量通常用作脂質過氧化(lipid peroxidation)作用的標記。樣品中的MDA與硫代巴比妥酸（thiobarbituric acid ,TBA）反應生成MDA-TBA加合物，可以很容易地在OD 532 nm處進行比色定量。同時，測量600nm處的吸光度，並通過532nm和600nm處的吸光度之差計算MDA（以避免蔗糖(saccharose) 的干擾）。1-100 µM/L

Fig. Typical MDA standard calibration curve. The y-axis is ΔOD and the x-axis is MDA concentration (uM).

Kit components
Lysis Buffer
• Reaction Mix
• 1 mM Standard
Features & Benefits
Determination of MDA in serum, plasma, urine, tissue/cell lysates and other biological fluids.
• A broad range linearity: 1-100 µM/L.
• Fast and convenient, measuring lipid peroxidation in a wide range of samples.
Usage notes
The Reaction Mix may form precipitate, you can sonicate it in a 70°C water bath.
• If not assayed immediately, samples can be stored at -80°C.
Storage instructions

Storage at -20°C immediately upon receipt. Kit has a storage time of 6 months from receipt. Refer to list of materials supplied for storage conditions of individual components.

CheKine™黃嘌呤氧化酶檢測 | CheKine™ Xanthine Oxidase Assay Kit貨號KTB1070

黃嘌呤氧化酶（Xanthine oxidase , EC 1.17.3.2）或黃嘌呤氧化還原酶(xanthine oxidoreductase) 被認為是嘌呤(purine)在人體內分解代謝的末端酶，可催化次黃嘌呤(hypoxanthine)氧化為黃嘌呤(xanthine)然後變為尿酸(uric acid)。當充當為NADH氧化酶 (NADH oxidase) 時，XO是超氧化物（superoxide , O2-）的生成器(generator)，超氧化物（superoxide , O2-）是一種強大的活性氧（reactive oxygen species , ROS）。還已經發現XO在缺血再灌注損傷(ischemia-reperfusion injury)期間會產生過氧化氫（hydrogen peroxide , H2O2）和超氧化物（superoxide , O2-）。由於它們的高反應性，這些ROS影響細胞的各種分子成分，過量會導致細胞變性(cell degeneration)和死亡(death)。 XO（Xanthine oxidase , EC 1.17.3.2）在健康個體的肝臟(liver)和空腸(jejunum)中存在大量。但是，在各種肝臟疾病(liver disorders)中，已發現循環XO的水平急劇增加。因此，血清XO(serum XO)水平的測定可作為急性肝損傷(acute liver damage), 如黃疸( jaundice）的敏感指標。

產品描述： CheKine™黃嘌呤氧化酶檢測試劑盒(CheKine™ Xanthine Oxidase Assay Kit, KTB1070) 提供了一種簡便的比色測定法，用於定量測定各種樣品中存在的黃嘌呤氧化酶（Xanthine oxidase, XO）。在測定中，黃嘌呤氧化酶（Xanthine oxidase, XO）將黃嘌呤氧化成超氧化物（superoxide , O2-）。超氧化物（superoxide , O2-）與四唑鹽WST-8 (tetrazolium salt WST-8) 染料反應形成水溶性的formazan product產物，可以很容易地在OD 450 nm處進行比色定量。因此，樣品中存在的黃嘌呤氧化酶（Xanthine oxidase, XO）與所獲得的訊號成比例。線性範圍15.6 -500 mU/mL.

Kit components

Assay Buffer
• Sample Diluent
• WST-8
• Enhancer
• Xanthine Oxidase Standard(10 U/mL)
• Xanthine