皮質醇（唾液）人體ELISA試劑盒  (Saliva) | 貨號K7434 (ab285353)

Sensitive, Colorimetric Assay

BioVision的皮質醇（唾液）酶聯免疫吸附測定（ELISA）試劑盒是一種體外測定唾液中皮質醇的定量測定。皮質醇是一種從激素ACTH引起的從腎上腺皮質釋放的類固醇激素。它可以增加血壓和血糖水平，並抑制免疫系統。皮質醇通過特定的細胞內受體起作用，並且對許多生理系統有影響，包括免疫系統，葡萄糖對抗調節，血管緊張度，底物利用和骨代謝。它作為游離形式存在於血液中，或與皮質類固醇結合球蛋白（CBG）結合。血液中只有1-10％的皮質醇以未結合/游離的形式存在，這一部分代表了引起生物反應的皮質醇的活性池，並且能夠擴散到靶組織和唾液中。研究一致報導唾液和血清皮質醇水平之間高度相關，表明唾液皮質醇可以可靠地估計血清皮質醇水平。 BioVision的皮質醇（Saliva）ELISA試劑盒是一種競爭性酶免疫測定試劑盒。該測定法使用塗覆在96孔板上的皮質醇特異性抗體。樣品中的皮質醇和標記為皮質醇的HRP競爭結合固定的抗體。同時孵育後，將多餘的試劑洗去，並將a B基質加入孔中。顏色與結合的皮質醇HRP綴合物的量成比例地發生，並且強度與樣品中皮質醇的濃度成反比。 Stop Solution將顏色從藍色變為黃色，並且在450nm處測量顏色的強度。試劑盒的靈敏度為1 ng / ml，檢測範圍為1 ng / ml至100 ng / ml。該ELISA測定的交叉反應性為 prednisolone為6.8％，Cortisone為4.22％，其他激素為0.1％，包括11-deoxycortisol， estradiol， testosterone和progesterone。

商品需用儀器測量  酵素免疫分析儀請按此 (405、450、492、630 nm)

 

 

 

 

 

 

 

Cat # +Size	K7434-100
Size	100 assays
Detection Method	Absorbance (450 nm)
Species Reactivity	human
Applications	Quantitative detection of Cortisol
Features & Benefits	• Easy, convenient and time-saving method to measure cortisol • Sensitivity: 1 ng/ml and detection range: 1 ng/ml to 100 ng/ml
Kit Components	• Plate Coated with Cortisol Ab • Assay Diluent • Wash Buffer (10x) • Standard Diluent • Cortisol Standard (4800 ng/ml) • Cortisol HRP Conjugate • ™B Substrate • Stop Solution • Plate Sealer

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皮質醇（唾液）人體ELISA試劑盒 操作方式：

1.樣品製備：收集唾液樣品並冷凍/解凍至少一次。在室溫下3000xg離心5分鐘。去除樣品中的Pellet（粘蛋白）。收集清澈的上清液以備測量。

2.試劑製備: 將所有緩衝液和所需數量的Coated strips至室內溫度（18-25°C）回溫。建議標準稀釋液二重覆。

3.標準品製備: 準備一系列稀釋劑，用於皮質醇標準品（4800 ng / ml）標準稀釋劑，如圖1所示。在轉移之前，皆輕輕地徹底混合試管，以確保標準液為混合均勻狀態。標準稀釋劑用作零標準（0ng / ml）。

4. 移取20μl皮質醇標準品或樣品到各Well中。

5. 製備1x皮質醇HRP結合物溶液（1000x）: 以Assay Diluent稀釋為1X。盡可能多做一些。加入100μl1x皮質醇HRP綴合物及溫和地Shaker。用Plate Sealer蓋上孔並溫和搖動孵育5分鐘。室溫在37°C孵育1小時。

6.移除溶液後以200μl1x洗滌緩衝液輕輕搖動洗滌4次（每次3-4分鐘）。

7.加入100μlTMB底物/孔並輕輕搖動。測量650nm處的吸光度1-4分鐘。在室溫下監測藍色顯色，其強度與樣品和標準品中皮質醇的濃度成反比。

注意事項: 添加TMB底物後的孵育時間可以優化，以避免顏色過度發展。推薦的吸光度0ng / ml皮質醇標準品在650nm處為~0.5-0.8。最佳化：準備一個平行孔用於背景控制並添加TMB底物。

8.向每個孔中加入100μl終止液，包括背景對照，輕輕搖動混合。若有氣泡, 則去除氣泡。在5分鐘內測量450nm處的吸光度。

9.計算：計算每組重複標準品的平均吸光度。繪製皮質醇標準曲線。計算皮質醇通過標準曲線的插值來濃縮樣品。如果稀釋樣品，則將該值乘以稀釋因子進行計算樣品中皮質醇的濃度。

注意：每次讀數的背景扣除對於計算樣品皮質醇濃度是可選的，並且不會改變最終結果。