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DiO 細胞膜綠色螢光染色試劑盒(DiO Cell Membrane Green Fluorescence Staining Kit) | SERVICEBIO 貨號G1704

代理廠牌:
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DiO-細胞膜綠色螢光染色試劑盒操作手冊

特點

SERVICEBIO細胞螢光染色(Cell Fluorescence Staining)系列產品-DiO 細胞膜染劑

DiO 細胞膜綠色螢光染色試劑盒(DiO Cell Membrane Green Fluorescence Staining Kit) | SERVICEBIO 貨號G1704

產品介紹:

DiO,又稱DiOC18(3),3-十八烷基-2-[3-(3-十八烷基-2(3H)-苯並噁唑-2-亞基)-1-丙烯-1 -基]苯並噁唑高氯酸鹽(3-octadecyl-2 -[3-(3-octadecyl-2 (3H) -benzooxazole-2-subunit) -1-propene-1-yl] benzooxazole perchlorate),分子量881.72 ,是一種具有親脂性(lipophilic property)的長鏈二烷基碳花青染料螢光染料( dialkyl carbocyanine dye fluorescent dye)。它通常用於標記細胞膜和其他脂溶性生物結構。進入細胞膜後,DiO可以橫向擴散並逐漸染色整個(cell membrane)。 DiO螢光在進入細胞膜(cell membrane)之前非常弱,但與細胞結合後,螢光強度會大大增強。 DiO受激發後可發出綠色螢光,可用標準FITC濾光片檢測。 DiO的最大激發波長為484nm,最大發射波長為501nm。根據DiO的特性,它既可用於活細胞染色,也可用於固定細胞或組織的染色。此外,DiO探針一般不會影響細胞的活力,因此可以使用正向或反向標記的細胞或某些物質(外泌體)作為示蹤劑來檢測。

本產品DiO細胞膜(cell membrane)綠色螢光染色試劑盒含有DiO螢光探針及優化的染色緩衝液,可使細胞膜(cell membrane)染色更快,螢光更明亮穩定,效果更好。

Component Number Component G1704
G1704-1  DiO cell membrane green fluorescent probe 400 μL
G1704-2 Staining buffer  100 mL
 Manual  One copy

1. DiO染色工作液的製備:

將DiO細胞膜綠色螢光探針與染色緩衝液以1:250的比例混合稀釋,製備DiO染色工作液(即用型);注意,DiO探針的稀釋比例可在1:250至1:50之間調整,以達到最佳染色效果。

2. 活體細胞懸浮液的染色

2.1. 將懸浮細胞在室溫下以500-1000×g離心3-5分鐘,去除細胞上清液;

2.2. 加入適量的DiO染色工作液,將細胞重懸至最終細胞濃度為1-2×10⁶細胞/mL。

2.3.在37℃避光孵育5-20分鐘。不同細胞的最佳孵育時間有所不同。建議先孵育5分鐘,然後根據最終染色結果最佳化孵育時間。

2.4. 孵育結束後,室溫以500-1000 g離心3-5分鐘,吸取DiO染色工作液;

2.5. 將細胞以預熱至37℃的PBS或細胞培養基重懸,並以500-1000 g離心3-5分鐘,去除上清液;

2.6. 重複步驟2.5。

2.7. 將細胞轉移至多孔板、細胞培養皿或細胞爬片後,直接以流式細胞儀檢測,或以螢光顯微鏡檢測。 DiO的最大激發波長為484 nm。
3. 活細胞染色(以6孔板為例):

3.1. 將貼壁細胞以一定密度接種於6孔板中。

3.2. 移除培養基,用PBS(建議G4202)洗滌細胞兩次。加入1 mL Dio染色工作液(其他規格的孔板需依實際狀況調整用量,確保染料覆蓋細胞)。

3.3. 避光,37℃孵育5-20分鐘。不同細胞的最佳孵育時間有所不同。建議先孵育5分鐘,然後根據最終染色結果最佳化孵育時間。

3.4. 吸出細胞膜染色工作液,以預熱的PBS或細胞培養基洗滌細胞1-2次。

3.5. 加入預熱的細胞培養基或37℃的細胞培養基,並以螢光顯微鏡觀察細胞。 Dio 的激發波長最大值為 484 nm,發射波長最大值為 501 nm。

4. 固定貼壁細胞的染色:

4.1. 樣品預處理:

細胞:移除細胞培養基,用 PBS 洗滌 1-2 次。加入 4% 多聚甲醛固定液(建議 G1101),室溫孵育 10 分鐘。去除固定液,用 PBS 洗滌 2-3 次;

4.2. 透化:加入 0.1-0.5% Triton-100(用 PBS 配製),室溫透化 10 分鐘。去除透化液,用 PBS 洗滌 2-3 次。

4.3. (可選,免疫螢光標記)根據免疫染色方案與抗體孵育,或與其他染料孵育。

注意:免疫染色的封閉液、抗體稀釋液和洗滌液均不應含有去污劑。 4.4. 加入適量的DiO染色工作液覆蓋細胞,於37℃避光孵育5-20分鐘,然後吸出DiO染色工作液。建議重複染色以獲得最佳染色效果。

4.5. 用PBS洗滌細胞2-3次,然後在螢光顯微鏡下觀察(細胞需用適量PBS覆蓋)。 DiO的最大激發波長為484nm。

5. 外泌體的螢光標記:

5.1. 以適量的DiO染色工作液重懸外泌體沉澱。

5.2. 於37℃避光孵育30分鐘。

5.3. (選購)以10倍體積的PBS稀釋樣品。

5.4. 依照先前的萃取步驟再次萃取外泌體,以去除過量的染料。

5.5. 收集外泌體沉澱物,並以PBS重懸,得到DIO標記的外泌體。此外泌體可用於後續實驗,例如細胞攝取實驗。

 

Cat.No.
Product Name
Spec.
G1011-10ML
Hoechst 33258 Staining Solution (Ready-To-Use)
Hoechst 33258 染色液(即用型)
10 mL
G1012-100ML
DAPI Staining Reagent (Ready to Use)
DAPI 染色試劑(即使用型)
100 mL
G1012-10ML
DAPI Staining Reagent (Ready to Use)
DAPI 染色試劑(即使用型)
10 mL
G1021-10ML
PI Stain
碘化丙啶(propidium iodide, PI)
10 mL
G1127-1ML
Hoechst 33342 Staining Solution
Hoechst 33342 染色液
1 mL
G1515-100T
JC-1 Mitochondrial Membrane Potential Assay Kit
JC-1 粒線體膜電位檢測試劑盒
100 T
G1704
DiO Cell Membrane Green Fluorescence Staining Kit
DiO 細胞膜綠色螢光染色試劑盒
100-1000 T
G1705
Dil Cell Membrane Red Fluorescence Staining Kit
Dil 細胞膜紅色螢光染色試劑盒
100-1000 T
G1720-20UL
ER-Tracker Green
ER-追蹤器綠色(ER-Tracker Green)
20 μL
G1721-20UL
ER-Tracker Red
ER-追蹤器紅色(ER-Tracker Red)
20 μL
G1722-50UL
Lyso-Tracker Green
溶血追蹤器綠色(Lyso-Tracker Green)
50 μL
G1723-50UG
MitoTracker Red CMXRos
MitoTracker 紅色
50 μg
G1905-100T
Lipid Droplets Fluorescence Assay Kit
脂滴螢光檢測試劑盒
100 T

Servicebio台灣品牌介紹-BRAND/AGENCY/品牌介紹- Servicebio

Classfication Cat No. Name Place of Origin Spec.
Amino Acids
GC304002 L-Glutamine 產品資料 100 g
GC304003 L-Arginine hydrochloride 產品資料 25 g
GC304004-100g L-Glutamine acid 產品資料 100 g
GC304005 L-Isoleucine 產品資料 25 g
GC304006-25g L-Leucine 產品資料 25 g
GC304007 L-Lysine hydrochloride 產品資料 25 g
GC304009 L-Methionine 產品資料 25 g
GC304010 L-Phenylalanine 產品資料 10 g
GC304011-25g L-Alanine 產品資料 25 g
GC304012 L-Histidine 產品資料 25 g
GC304013 L-Serine 產品資料 25 g
GC304014 L-tryptophan 產品資料 5 g
GC304016 L-Threonine 產品資料 25 g
GC304017 L-Valine 產品資料 10 g
GC304019 Glycine 產品資料 500 g
GC304021 L-Histidine hydrochloride monohydrate 產品資料 25 g
GC304022 Glycine cell culture grade
甘氨酸Glycine (細胞培養等級
產品資料 100 g
Protein Derivatives
GC305002-5g Iodoacetamide 產品資料 5 g
GC305003 Trypsin 1:250 Source: Porcine Pancreas 產品資料 10 g
GC305004-5g Pepsin 1:3000 產品資料 5 g
GC305005 Horseradish peroxidase 產品資料 1 g
GC305006 Bovine Serum Albumin – import 產品資料 100 g
GC305009 Human Albumin-FITC 產品資料 0.5 mL
GC305010 Bovine Serum Albumin BSA 產品資料 100 g
GC305010-25G Bovine Serum Albumin BSA 產品資料 25 g
GC305010-50G Bovine Serum Albumin BSA 產品資料 50 g
GC305010-5G Bovine Serum Albumin BSA 產品資料 5 g
GC305013-100mg Collagenase I 產品資料 100 mg
GC305014-100mg Collagenase II 產品資料 100 mg
GC305015-100mg Collagenase IV
膠原酶IV (Collagenase IV)
產品資料 100 mg
GC305016-100g Gelatine 產品資料 100 g
Hormones
GC302002-25mg Abscisic acid 產品資料 25 mg
GC302003 Angiotensin II 產品資料 10 mg
Biological pigments
GC307002-25g Crystal violet 產品資料 25 g
GC307003-5g Trypan Blue 產品資料 5 g
GC307005 Alcian Blue8GX 產品資料 1 g
GC307006-5g Bromphenol Blue 產品資料 5 g
GC307007 Serva blue G-250 產品資料 10 g
GC307008-5g Congo Red 產品資料 5 g
GC307009-25g Alizarin Red S 產品資料 25 g
GC307010-1g Giemsa′s Stain 產品資料 1 g
GC307011 Fuchsin basic 產品資料 5 g
GC307012-10g Ponceau S 產品資料 10 g
GC307013 Acid red 26 2R 產品資料 5 g
GC307014 Direct Red 80 產品資料 5 g
GC307015-5g Sudan Black B 產品資料 5 g
GC307017 Aniline blue 產品資料 5 g
GC307018 Nuclear fast red 產品資料 5 g
GC307019 Solvent Blue 38 產品資料 5 g
GC307020 Hematoxylin 產品資料 5 g
GC307021 Solvent Red 43 產品資料 10 g
GC307022 Eosin Y, water soluble 產品資料 10 g
GC307023 Safranin O 產品資料 10 g
GC307024 Fast Green 產品資料 10 g
GC307026-5g Pyronin G 產品資料 5 g
GC307027-1g Janus Green B 產品資料 1 g
GC307030-10g Brilliant Cresyl Blue 產品資料 10 g
GC307031 Coomassie brilliant blue R-250 產品資料 5 g
GC307034-1g Thionine acetate 產品資料 1 g
GC307035-1g Cresyl Fast Violet 產品資料 1 g
GC307036-1g Orcein 產品資料 1 g
GC307037-1g Carmine 產品資料 1 g
GC307039-10g Mordant Blue 29 產品資料 10 g
GC307042-5g Oil Red O 產品資料 5 g
GC307045-25g Rhodamine B 產品資料 25 g
Vitamins
GC301015-25g Vitamin C 產品資料 25 g
GC303001 Folic acid 產品資料 5 g
GC303004 Ribofavin 產品資料 25 g
GC303005-5g VitaminB6 產品資料 5 g
GC303006-25g VitaminB3 產品資料 25 g
GC303008 VitaminB12 產品資料 1 g
GC303011-25mg NADPH-Na4 產品資料 25 mg
GC303013-250mg β-nicotinamide adenine dinucleotide NAD 產品資料 250 mg
GC303014-250mg NADH-Na2 產品資料 250 mg
Antibiotics
GC301002 Streptozocin STZ 產品資料 1 g
GC301002-100mg Streptozocin STZ 產品資料 100 mg
GC301003 Penicillin G Sodium salt 產品資料 1 g
GC301004 Ampicillin 產品資料 1 g
GC301005 Streptomycin sulfate 產品資料 5 g
GC301008 Kanamycin 產品資料 1 g
GC301009 Kanamycin sulfate 產品資料 5 g
GC301009-1g Hygromycin B 產品資料 1 g
GC301011 Geneticin G-418 產品資料 1 g
GC301013 Chloramphenicol 產品資料 5 g
GC301013-10mg Pseudomonic acid 產品資料 10 mg
GC301014-5g Norfloxacin 產品資料 5 g
GC301016 Cisplatin 產品資料 100 mg
GC301017-100mg Sirolimus 產品資料 100 mg
Heterocyclic compounds
GC207001 Imidazole 產品資料 10 g
GC207002 PMSF 產品資料 5 g
GC207003 Freund’s Adjuvant Complete 產品資料 10 mL
GC207004 Freund’s Adjuvant Incomplete 產品資料 10 mL
Salt
GC201001 Guanidine HCl 產品資料 500 g
GC201002 Guanidine thiocyanate 產品資料 500 g
Sugar Alcohols
GC205001 L(+)-Lactic acid 產品資料 100 g
GC205002 Pyruvic acid sodium salt 產品資料 25 g
GC205003 D-Glucose, anhydrous 產品資料 500 g
GC205004-10g D(+)-Trehalose dihydrate 產品資料 10 g
GC205005 D(+)- Galactose 產品資料 100 g
GC205006-10g D-(-)Arabinose 產品資料 10 g
GC205007-1g DTE 產品資料 1 g
GC205008 Glycerol 產品資料 100 mL
GC205009 LPS 產品資料 10 mg
GC205010 DTT 產品資料 1 g
GC205011 IPTG 產品資料 1 g
GC205013 Agarose 產品資料 100 g
GC205014 Sucrose 產品資料 500 g
GC205015 D-Sorbitol 產品資料 500 g
Solvent
GC203001 TEMED 產品資料 100 mL
GC203002 DMSO(Dimethyl sulfoxide) 產品資料 100 mL
GC203003 Urea 產品資料 500 g
GC203005 DMSO cellular level 產品資料 10 mL
Complex
GC202001 EDTA 產品資料 500 g
GC202002 EDTA -Na2 產品資料 500 g
Buffer salt
GC208001 Tris (Hydroxymethyl) Aminomethane 產品資料 500 g
GC208003 RIS-HCL 產品資料 500 g
GC208004-100g BIS-TRIS 產品資料 100 g
GC208006 N-Tris[Hydroxymethyl]Methylglycine 產品資料 100 g
GC208007 4-propanesulfonyl morpholine 產品資料 100 g
GC208008-25g HEPPS 產品資料 25 g
GC208009 HEPES, Free acid 產品資料 100 g
GC208012-1g TCEP·HCL 產品資料 1 g
Surfactant
GC204001 Tween-80 產品資料 100 mL
GC204002 Tween-20 產品資料 100 mL
GC204003 Triton X-100 產品資料 100 mL
GC204004 Sodium dodecylsulfate 產品資料 500 g
GC204005 Sodium dodecylsulfate 產品資料 100 g
GC204006 Nonidet TM P40 Substitute NP-40 產品資料 100 g
GC204007 Deoxycholic acid, sodium salt 產品資料 25 g
GC204009-100ml APES 產品資料 100 mL
Amine organics
GC206002 Acrylamide 產品資料 500 g
GC206003 N’-MBA 產品資料 100 g
Polymer
GC209002-250g PEG 8000 產品資料 250 g
GC209003-250g PEG 6000 產品資料 250 g
GC209004-100g PEG 3350 產品資料 100 g
GC209005-500g Poly(ethylene glycol)2000 產品資料 500 g
GC209006-250g Poly(ethylene glycol) 20000 產品資料 250 g
Inorganic salt
GC106001 Orthoboric acid 產品資料 500 g
GC104004 Sodium bicarbonate 產品資料 500 g
GC108003 Citric acid monohydrate 產品資料 100 g
GC108004 Sodium citrate dihydrate 產品資料 100 g
GC102001 Calcium chloride 產品資料 100 g
GC102002 Magnesium chloride hexahydrate 產品資料 100 g
GC102003 Potassium chloride 產品資料 500 g
GC102004 Sodium chloride 產品資料 500 g
GC101004 Magnesium Sulfate 產品資料 100 g
GC101013 Ammonium persulfate 產品資料 25 g
GC105001 Sodium phosphate monobasic 產品資料 500 g
GC105002 Sodium Phosphate, Dibasic 產品資料 500 g
GC105003 Potassium Phosphate Monobasic 產品資料 500 g
GC107001 Sodium hydroxide 產品資料 100 g
GC306001 Lodixanol 產品資料 5 g
GC310001-100g skimmed milk powder 產品資料 100 g

 

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