JC-1 粒線體膜電位檢測試劑盒(JC-1 Mitochondrial Membrane Potential Assay Kit) | SERVICEBIO 貨號G1515-100T
SERVICEBIO細胞螢光染色(Cell Fluorescence Staining)系列產品-JC-1 Mitochondrial Membrane Potential Assay Kit
JC-1 粒線體膜電位檢測試劑盒(JC-1 Mitochondrial Membrane Potential Assay Kit) | SERVICEBIO 貨號G1515-100T
產品介紹:
JC-1是一種陽離子羰基花青染料(cationic carbonyl cyanine dye)，在粒線體膜電位的作用下，可以穿過細胞膜(cell membrane )，向粒線體(mitochondria )聚集。是廣泛應用於檢測粒線體膜電位的理想螢光探針。當粒線體膜電位(mitochondrial membrane potential)較高時，染料聚集在粒線體基質中，呈現紅色螢光（Ex=585 nm，Em=590 nm）；當粒線體膜電位較高時，染料聚集在粒線體基質中，呈現紅色螢光（Ex=585 nm，Em=590 nm）；電位較低，JC-1主要以單體形式存在於細胞質中，呈綠色螢光（Ex=514 nm， Em=529 nm）。因此，根據螢光顏色和電位的變化可以判斷粒線體膜電位的變化。比例的變化、粒線體膜電位的降低也是早期細胞凋亡的重要標誌。JC-1粒線體膜電位檢測試劑盒，是在JC-1螢光探針的基礎上改進了易沉澱等缺點。該試劑盒可快速、靈敏地檢測細胞、組織或純化線粒體中線粒體膜電位的變化，也是檢測早期細胞凋亡的常用方法。此外，本試劑盒還提供CCCP氰化碳3-氯苯腙試劑((Carbonyl cyanide 3-chlorophenylhydrazone)、質子載體（氫離子載體）和粒線體氧化磷酸化解偶聯劑，可促進粒線體對氫離子通透性的變化，導致粒線體膜電位喪失，可作為誘導粒線體膜電位下降的陽性對照。
| Product Name | Cat.No. | Spec. |
| JC-1 Mitochondrial Membrane Potential Assay Kit | G1515-100T | 100T |
| Component Number | Component | G1515-100T |
| G1515-1 | JC-1 dye（500 ×） | 4 x 50 μL |
| G1515-2 | JC-1 buffer (10 x) | 50 mL |
| G1515-3 | JC-1 diluent | 100 mL |
| G1515-4 | CCCP（100 mM） | 50 μL |
Assay Protocol
1. prepare the working solution of JC-1 dye(2x) and JC-1 buffer(1x):
a. In a suitable container mix 2 μL JC-1 dye（500 ×）to 900 μL JC-1 diluent,then add 100 μL JC-1 buffer (10 x).(Note:this solution should be prepared in order.)
b. In a suitable container diluent the JC-1 buffer (10 x) with ddH2O.
2. prepare a positive control(optional ):
a. Take an appropriate amount of CCCP (100 mM) and dilute 1000 times with cell culture medium to obtain 100 μM CCCP working solution;
b. Incubate the cells with CCCP working solution for about 30 minutes, and then follow the JC-1 staining procedure below to detect the mitochondrial membrane potential.
Note: For different cells, the concentration and incubation time of CCCP may be different, please refer to reference or do experiment to find the optimal conditions.
3. Cell stain and analyze
a. Take 100,000 to 600,000 cells, wash cells in JC-1 buffer(1x) or PBS;
b. Add JC-1 dye(2x) and cell culture medium with a ratio of 1:1 to the cells,and incubate in a CO2 incubator for 15-30 min in the dark；
c. Wash cells twice with 1x JC-1 buffer;
d. Analyze on a fluorescence microscope, laser confocal microscope, or flow cytometry.If the cell mainly shows red fluorescence, it indicates that its mitochondrial membrane potential is normal; if the green fluorescence is greatly increased, it indicates that the mitochondrial membrane potential has decreased, and it may be in the early stage of cell apoptosis.
4. Mitochondria stain and analyze
a. Add 100 μL of JC-1 staining working solution to 100 μL of purified mitochondria with a total protein content of 10-100 μg;
b. After mixing, use a fluorescence spectrophotometer (excitation wavelength is 485 nm, emission wavelength is 590 nm) or microplate reader and other instruments for scanning detection (when the excitation wavelength cannot be set to 485 nm, it can be set in the range of 475 ~ 520 nm Excitation wavelength), can also be observed by fluorescence microscope or laser confocal microscope
Fluorescence Microscopy to Observe The Procedure of Living Dead Cells：
For the accuracy of the experiment, it is recommended that the samples after JC-1 incubation should be tested within 30 minutes.
流式細胞儀偵測細胞週期程序：
1.準備JC-1染料(2x)和JC-1緩衝液(1x)的工作溶液：
a.在適當的容器中將2 μL JC-1 染料（500 ×）與900 μL JC-1 稀釋液混合，然後加入100 μL JC-1 緩衝液（10 x）。（註：此溶液應依序配製。 ）
b.在適當的容器中以 ddH2O 稀釋 JC-1 緩衝液 (10 x)。
2.準備陽性對照（可選）：
a.取適量CCCP（100 mM），以細胞培養基稀釋1000倍，得到100 μM CCP工作液；
b.將細胞與 CCCP 工作液一起孵育約 30 分鐘，然後按照下面的 JC-1 染色程序檢測粒線體膜電位。
注意：對於不同的細胞，CCCP的濃度和孵育時間可能不同，請參考參考資料或透過實驗尋找最佳條件。
3.細胞染色和分析
a.取100,000至600,000個細胞，用JC-1緩衝液(1x)或PBS洗滌細胞；
b.將JC-1染料(2x)和細胞培養基以1:1的比例加入細胞中，並在CO2培養箱中避光孵育15-30分鐘；
c.用 1x JC-1 緩衝液清洗細胞兩次；
d.以螢光顯微鏡、雷射共聚焦顯微鏡或流式細胞儀進行分析。如果細胞主要顯示紅色螢光，則表示其粒線體膜電位正常；如果細胞主要顯示紅色螢光，則表示其粒線體膜電位正常。如果綠色螢光大幅增加，表示粒線體膜電位降低，可能處於細胞凋亡的早期階段。
4.粒線體染色與分析
a.在100μL純化的粒線體中加入100μL JC-1染色工作液，總蛋白含量為10-100μg；
b.混勻後，以螢光分光光度計（激發波長為485 nm，發射波長為590 nm）或酶標儀等儀器進行掃描檢測（當激發波長無法設定為485 nm時，可設定在475 nm範圍內） ~ 520 nm 激發波長），也可以透過螢光顯微鏡或雷射共焦顯微鏡觀察
螢光顯微鏡觀察活死細胞的過程：
為了實驗的準確性，建議JC-1孵育後的樣品在30分鐘內進行檢測。
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Cat.No.
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Product Name
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Spec.
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|---|
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G1011-10ML
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Hoechst 33258 Staining Solution (Ready-To-Use)
Hoechst 33258 染色液（即用型） |
10 mL
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G1012-100ML
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DAPI Staining Reagent (Ready to Use)
DAPI 染色試劑（即使用型） |
100 mL
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G1012-10ML
|
DAPI Staining Reagent (Ready to Use)
DAPI 染色試劑（即使用型） |
10 mL
|
|
G1021-10ML
|
PI Stain
碘化丙啶(propidium iodide, PI) |
10 mL
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|
G1127-1ML
|
Hoechst 33342 Staining Solution
Hoechst 33342 染色液 |
1 mL
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G1515-100T
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JC-1 Mitochondrial Membrane Potential Assay Kit
JC-1 粒線體膜電位檢測試劑盒 |
100 T
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G1704
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DiO Cell Membrane Green Fluorescence Staining Kit
DiO 細胞膜綠色螢光染色試劑盒 |
100-1000 T
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G1705
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Dil Cell Membrane Red Fluorescence Staining Kit
Dil 細胞膜紅色螢光染色試劑盒 |
100-1000 T
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G1720-20UL
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ER-Tracker Green
ER-追蹤器綠色(ER-Tracker Green) |
20 μL
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|
G1721-20UL
|
ER-Tracker Red
ER-追蹤器紅色(ER-Tracker Red) |
20 μL
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G1722-50UL
|
Lyso-Tracker Green
溶血追蹤器綠色(Lyso-Tracker Green) |
50 μL
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G1723-50UG
|
MitoTracker Red CMXRos
MitoTracker 紅色 |
50 μg
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G1905-100T
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Lipid Droplets Fluorescence Assay Kit
脂滴螢光檢測試劑盒 |
100 T
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Servicebio台灣品牌介紹-BRAND/AGENCY/品牌介紹- Servicebio
| Classfication | Cat No. | Name | Place of Origin | Spec. |
|
Amino Acids
|
GC304002 | L-Glutamine | 產品資料 | 100 g |
| GC304003 | L-Arginine hydrochloride | 產品資料 | 25 g | |
| GC304004-100g | L-Glutamine acid | 產品資料 | 100 g | |
| GC304005 | L-Isoleucine | 產品資料 | 25 g | |
| GC304006-25g | L-Leucine | 產品資料 | 25 g | |
| GC304007 | L-Lysine hydrochloride | 產品資料 | 25 g | |
| GC304009 | L-Methionine | 產品資料 | 25 g | |
| GC304010 | L-Phenylalanine | 產品資料 | 10 g | |
| GC304011-25g | L-Alanine | 產品資料 | 25 g | |
| GC304012 | L-Histidine | 產品資料 | 25 g | |
| GC304013 | L-Serine | 產品資料 | 25 g | |
| GC304014 | L-tryptophan | 產品資料 | 5 g | |
| GC304016 | L-Threonine | 產品資料 | 25 g | |
| GC304017 | L-Valine | 產品資料 | 10 g | |
| GC304019 | Glycine | 產品資料 | 500 g | |
| GC304021 | L-Histidine hydrochloride monohydrate | 產品資料 | 25 g | |
| GC304022 | Glycine cell culture grade 甘氨酸Glycine (細胞培養等級 |
產品資料 | 100 g | |
|
Protein Derivatives
|
GC305002-5g | Iodoacetamide | 產品資料 | 5 g |
| GC305003 | Trypsin 1:250 Source: Porcine Pancreas | 產品資料 | 10 g | |
| GC305004-5g | Pepsin 1:3000 | 產品資料 | 5 g | |
| GC305005 | Horseradish peroxidase | 產品資料 | 1 g | |
| GC305006 | Bovine Serum Albumin – import | 產品資料 | 100 g | |
| GC305009 | Human Albumin-FITC | 產品資料 | 0.5 mL | |
| GC305010 | Bovine Serum Albumin BSA | 產品資料 | 100 g | |
| GC305010-25G | Bovine Serum Albumin BSA | 產品資料 | 25 g | |
| GC305010-50G | Bovine Serum Albumin BSA | 產品資料 | 50 g | |
| GC305010-5G | Bovine Serum Albumin BSA | 產品資料 | 5 g | |
| GC305013-100mg | Collagenase I | 產品資料 | 100 mg | |
| GC305014-100mg | Collagenase II | 產品資料 | 100 mg | |
| GC305015-100mg | Collagenase IV 膠原酶IV (Collagenase IV) |
產品資料 | 100 mg | |
| GC305016-100g | Gelatine | 產品資料 | 100 g | |
|
Hormones
|
GC302002-25mg | Abscisic acid | 產品資料 | 25 mg |
| GC302003 | Angiotensin II | 產品資料 | 10 mg | |
|
Biological pigments
|
GC307002-25g | Crystal violet | 產品資料 | 25 g |
| GC307003-5g | Trypan Blue | 產品資料 | 5 g | |
| GC307005 | Alcian Blue8GX | 產品資料 | 1 g | |
| GC307006-5g | Bromphenol Blue | 產品資料 | 5 g | |
| GC307007 | Serva blue G-250 | 產品資料 | 10 g | |
| GC307008-5g | Congo Red | 產品資料 | 5 g | |
| GC307009-25g | Alizarin Red S | 產品資料 | 25 g | |
| GC307010-1g | Giemsa′s Stain | 產品資料 | 1 g | |
| GC307011 | Fuchsin basic | 產品資料 | 5 g | |
| GC307012-10g | Ponceau S | 產品資料 | 10 g | |
| GC307013 | Acid red 26 2R | 產品資料 | 5 g | |
| GC307014 | Direct Red 80 | 產品資料 | 5 g | |
| GC307015-5g | Sudan Black B | 產品資料 | 5 g | |
| GC307017 | Aniline blue | 產品資料 | 5 g | |
| GC307018 | Nuclear fast red | 產品資料 | 5 g | |
| GC307019 | Solvent Blue 38 | 產品資料 | 5 g | |
| GC307020 | Hematoxylin | 產品資料 | 5 g | |
| GC307021 | Solvent Red 43 | 產品資料 | 10 g | |
| GC307022 | Eosin Y, water soluble | 產品資料 | 10 g | |
| GC307023 | Safranin O | 產品資料 | 10 g | |
| GC307024 | Fast Green | 產品資料 | 10 g | |
| GC307026-5g | Pyronin G | 產品資料 | 5 g | |
| GC307027-1g | Janus Green B | 產品資料 | 1 g | |
| GC307030-10g | Brilliant Cresyl Blue | 產品資料 | 10 g | |
| GC307031 | Coomassie brilliant blue R-250 | 產品資料 | 5 g | |
| GC307034-1g | Thionine acetate | 產品資料 | 1 g | |
| GC307035-1g | Cresyl Fast Violet | 產品資料 | 1 g | |
| GC307036-1g | Orcein | 產品資料 | 1 g | |
| GC307037-1g | Carmine | 產品資料 | 1 g | |
| GC307039-10g | Mordant Blue 29 | 產品資料 | 10 g | |
| GC307042-5g | Oil Red O | 產品資料 | 5 g | |
| GC307045-25g | Rhodamine B | 產品資料 | 25 g | |
|
Vitamins
|
GC301015-25g | Vitamin C | 產品資料 | 25 g |
| GC303001 | Folic acid | 產品資料 | 5 g | |
| GC303004 | Ribofavin | 產品資料 | 25 g | |
| GC303005-5g | VitaminB6 | 產品資料 | 5 g | |
| GC303006-25g | VitaminB3 | 產品資料 | 25 g | |
| GC303008 | VitaminB12 | 產品資料 | 1 g | |
| GC303011-25mg | NADPH-Na4 | 產品資料 | 25 mg | |
| GC303013-250mg | β-nicotinamide adenine dinucleotide NAD | 產品資料 | 250 mg | |
| GC303014-250mg | NADH-Na2 | 產品資料 | 250 mg | |
|
Antibiotics
|
GC301002 | Streptozocin STZ | 產品資料 | 1 g |
| GC301002-100mg | Streptozocin STZ | 產品資料 | 100 mg | |
| GC301003 | Penicillin G Sodium salt | 產品資料 | 1 g | |
| GC301004 | Ampicillin | 產品資料 | 1 g | |
| GC301005 | Streptomycin sulfate | 產品資料 | 5 g | |
| GC301008 | Kanamycin | 產品資料 | 1 g | |
| GC301009 | Kanamycin sulfate | 產品資料 | 5 g | |
| GC301009-1g | Hygromycin B | 產品資料 | 1 g | |
| GC301011 | Geneticin G-418 | 產品資料 | 1 g | |
| GC301013 | Chloramphenicol | 產品資料 | 5 g | |
| GC301013-10mg | Pseudomonic acid | 產品資料 | 10 mg | |
| GC301014-5g | Norfloxacin | 產品資料 | 5 g | |
| GC301016 | Cisplatin | 產品資料 | 100 mg | |
| GC301017-100mg | Sirolimus | 產品資料 | 100 mg | |
|
Heterocyclic compounds
|
GC207001 | Imidazole | 產品資料 | 10 g |
| GC207002 | PMSF | 產品資料 | 5 g | |
| GC207003 | Freund’s Adjuvant Complete | 產品資料 | 10 mL | |
| GC207004 | Freund’s Adjuvant Incomplete | 產品資料 | 10 mL | |
|
Salt
|
GC201001 | Guanidine HCl | 產品資料 | 500 g |
| GC201002 | Guanidine thiocyanate | 產品資料 | 500 g | |
|
Sugar Alcohols
|
GC205001 | L(+)-Lactic acid | 產品資料 | 100 g |
| GC205002 | Pyruvic acid sodium salt | 產品資料 | 25 g | |
| GC205003 | D-Glucose, anhydrous | 產品資料 | 500 g | |
| GC205004-10g | D(+)-Trehalose dihydrate | 產品資料 | 10 g | |
| GC205005 | D(+)- Galactose | 產品資料 | 100 g | |
| GC205006-10g | D-(-)Arabinose | 產品資料 | 10 g | |
| GC205007-1g | DTE | 產品資料 | 1 g | |
| GC205008 | Glycerol | 產品資料 | 100 mL | |
| GC205009 | LPS | 產品資料 | 10 mg | |
| GC205010 | DTT | 產品資料 | 1 g | |
| GC205011 | IPTG | 產品資料 | 1 g | |
| GC205013 | Agarose | 產品資料 | 100 g | |
| GC205014 | Sucrose | 產品資料 | 500 g | |
| GC205015 | D-Sorbitol | 產品資料 | 500 g | |
|
Solvent
|
GC203001 | TEMED | 產品資料 | 100 mL |
| GC203002 | DMSO(Dimethyl sulfoxide) | 產品資料 | 100 mL | |
| GC203003 | Urea | 產品資料 | 500 g | |
| GC203005 | DMSO cellular level | 產品資料 | 10 mL | |
|
Complex
|
GC202001 | EDTA | 產品資料 | 500 g |
| GC202002 | EDTA -Na2 | 產品資料 | 500 g | |
|
Buffer salt
|
GC208001 | Tris (Hydroxymethyl) Aminomethane | 產品資料 | 500 g |
| GC208003 | RIS-HCL | 產品資料 | 500 g | |
| GC208004-100g | BIS-TRIS | 產品資料 | 100 g | |
| GC208006 | N-Tris[Hydroxymethyl]Methylglycine | 產品資料 | 100 g | |
| GC208007 | 4-propanesulfonyl morpholine | 產品資料 | 100 g | |
| GC208008-25g | HEPPS | 產品資料 | 25 g | |
| GC208009 | HEPES, Free acid | 產品資料 | 100 g | |
| GC208012-1g | TCEP·HCL | 產品資料 | 1 g | |
|
Surfactant
|
GC204001 | Tween-80 | 產品資料 | 100 mL |
| GC204002 | Tween-20 | 產品資料 | 100 mL | |
| GC204003 | Triton X-100 | 產品資料 | 100 mL | |
| GC204004 | Sodium dodecylsulfate | 產品資料 | 500 g | |
| GC204005 | Sodium dodecylsulfate | 產品資料 | 100 g | |
| GC204006 | Nonidet TM P40 Substitute NP-40 | 產品資料 | 100 g | |
| GC204007 | Deoxycholic acid， sodium salt | 產品資料 | 25 g | |
| GC204009-100ml | APES | 產品資料 | 100 mL | |
|
Amine organics
|
GC206002 | Acrylamide | 產品資料 | 500 g |
| GC206003 | N’-MBA | 產品資料 | 100 g | |
|
Polymer
|
GC209002-250g | PEG 8000 | 產品資料 | 250 g |
| GC209003-250g | PEG 6000 | 產品資料 | 250 g | |
| GC209004-100g | PEG 3350 | 產品資料 | 100 g | |
| GC209005-500g | Poly(ethylene glycol)2000 | 產品資料 | 500 g | |
| GC209006-250g | Poly(ethylene glycol) 20000 | 產品資料 | 250 g | |
|
Inorganic salt
|
GC106001 | Orthoboric acid | 產品資料 | 500 g |
| GC104004 | Sodium bicarbonate | 產品資料 | 500 g | |
| GC108003 | Citric acid monohydrate | 產品資料 | 100 g | |
| GC108004 | Sodium citrate dihydrate | 產品資料 | 100 g | |
| GC102001 | Calcium chloride | 產品資料 | 100 g | |
| GC102002 | Magnesium chloride hexahydrate | 產品資料 | 100 g | |
| GC102003 | Potassium chloride | 產品資料 | 500 g | |
| GC102004 | Sodium chloride | 產品資料 | 500 g | |
| GC101004 | Magnesium Sulfate | 產品資料 | 100 g | |
| GC101013 | Ammonium persulfate | 產品資料 | 25 g | |
| GC105001 | Sodium phosphate monobasic | 產品資料 | 500 g | |
| GC105002 | Sodium Phosphate, Dibasic | 產品資料 | 500 g | |
| GC105003 | Potassium Phosphate Monobasic | 產品資料 | 500 g | |
| GC107001 | Sodium hydroxide | 產品資料 | 100 g | |
| GC306001 | Lodixanol | 產品資料 | 5 g | |
| GC310001-100g | skimmed milk powder | 產品資料 | 100 g |