【植物過氧化酶檢測】 Peroxidase (POD) Activity Assay Kit 貨KTB1060
植物過氧化酶檢測 –Peroxidase (POD) Activity Assay Kit
POD過氧化酶(Peroxidase)廣泛存在於植物體內的不同組織，屬活性較高的誘導酶，能夠反應植物的代謝狀況和對環境的適應性。 POD 過氧化酶(Peroxidase)具有雙重的作用特性，在逆境或衰老初期的表現為清除 H2O2 ，達到保護細胞的功能。但在逆境或衰老後期，則參與活性氧的生成、葉綠素的降解，引發膜脂過氧化作用，加速細胞的衰老死亡，成為植物的衰老指標。植物體清除活性氧的保護系統又稱為抗氧化系統， 包括抗氧化酵素及非酵素型抗氧化 劑 （表 2 ），以應付具擴散性、水溶性及可與各種生物分子反應之活性氧化物，避免發生使活性物種毒性加強的連鎖反應。酵素抗氧化系統，包括對活性氧直接作用過氧化酶（ peroxidase, POD ）、超氧歧化酶（ SOD ）、過氧化氫酶（ catalase, CAT ）等三種、以及保持抗氧化物質還原性的抗壞血酸過氧化酶（ ascorbate peroxidase, APX ）、穀胱苷肽還原酶（ glutathione reductase, GR ）、及單脫氫抗壞血酸還原酶（ monodehydroascorbate reductase, MDHAR ）等。(出自農業部植物對環境逆境之調控與應用100年9月(第231期)。
植物POD過氧化酶（Peroxidases）分析試劑盒| 貨號KTB1150
CheKine™ Micro Peroxidase (POD) Activity Assay Kit
過氧化酶（Peroxidases , EC編號1.11.1.x）是一大類酶，通常催化以下形式的反應：ROOR’+電子給體（2 e-）+ 2H +→ROH + R’OH。對於這些酶中的許多酶，最佳底物是過氧化氫(hydrogen peroxide)，但其他酶則對有機氫過氧化物(organic hydroperoxides)（例如脂質過氧化物, lipid peroxides）更具活性。過氧化物酶(Peroxidases)可在其活性位點(active sites)包含血紅素輔因子(heme cofactor)，或在氧化還原活性的半胱氨酸(redox-active cysteine)或硒代半胱氨酸殘基(selenocysteine residues)上具有替代性。過氧化物酶（Peroxidase ）偶聯物被廣泛用作ELISA，免疫組織化學技術以及Northern，Southern和Western印跡分析的輔助檢測試劑。過氧化物酶，POD（EC 1.11.1.7）廣泛存在於動物、植物、微生物和培養細胞中。能催化過氧化氫(hydrogen peroxide)、酚類( phenols )和胺類化合物(amine compounds)的氧化，並消除過氧化氫(hydrogen peroxide)、酚類(phenols )和胺類(amines)。毒性的雙重作用。CheKine™ Micro過氧化酶分析試劑盒 (KTB1060)，該試劑盒提供了一種檢測植物組織(plant tissues)、細菌(bacteria)、真菌(fungus )或細胞等多種生物樣本中 POD 活性的簡單方法。在測定中，POD透過H2O2催化特定底物的氧化，產生在460nm處具有特徵光吸收的有色物質。 (貨號KTB1150)
CheKine™ Superoxide dismutase (SOD) Activity Assay Kit
超氧化物歧化酶（Superoxide dismutases , SOD，EC1.15.1.1）是催化超氧化物陰離子(superoxide anion)分解為O2和H2O2的酶。 它們是抵抗暴露於O2的所有細胞中超氧自由基(superoxide radical)毒性的重要抗氧化劑(antioxidant defense against)。 SOD異常活動與肌萎縮性側索硬化(amyotrophic lateral sclerosis)，圍產期致死率(perinatal lethality)，神經疾病(neural disorders)和癌症(cancer)等疾病有關。 超氧化物歧化酶(superoxide dismutase)有三個主要家族：Cu / Zn，Fe / Mn和Ni型。 人類中存在三種形式的超氧化物歧化酶(superoxide dismutase)。 SOD1位於細胞質(cytoplasm)中，SOD2位於線粒體(mitochondria)中，SOD3位於細胞外(extracellular)。測定血清、血漿、組織/細胞裂解液和其他生物體液中的 SOD 酶活性。 WST-8法測定SOD活性，最大抑制率可接近100%，不受一些常見干擾因素的干擾。廣泛的線性範圍：3.13-200U/mL。
超氧化物歧化酶 (SOD) 是一種抗氧化酶，參與針對活性氧 (ROS) 的防禦系統。SOD催化超氧自由基陰離子(O 2 -)歧化反應生成過氧化氫，過氧化氫再被穀胱甘肽過氧化物酶和過氧化氫酶催化生成無害的O 2和H 2 O。已經確定了幾種類型的 SOD。這些包括細胞內銅、鋅 SOD（Cu、Zn SOD/SOD1）、線粒體錳 SOD（Mn SOD/SOD2）和細胞外 Cu、Zn SOD（EC SOD/SOD3）。CheKine™超氧化物歧化酶（SOD）活性測定試劑盒 (CheKine™ Superoxide dismutase (SOD) Activity Assay Kit, 貨號KTB1030) 為定量測定血清(serum)，血漿(plasma)，組織(tissue)/細胞裂解液(cell lysates)和其他生物液體(biological fluids)中的SOD酶活性(SOD enzyme activity)提供了一種簡便的比色測定法(colorimetric assay)。 在測定中，黃嘌呤氧化酶（xanthine oxidase, XO）催化反應提供了超氧陰離子（superoxide anion , O2-）。 O2-與四唑鎓鹽WST-8染料( tetrazolium salt WST-8 dye)反應生成水溶性 formazan產物。 SOD清除了O2－，因此用於顯色反應的O2－較少。 通過比色法在OD 450nm下測量SOD的這種抑制活性。由於SOD試劑盒（KTB1030）報告為抑制％，因此可以不使用標準試劑。 樣品中的SOD越多，產生的 less WST-8 formazan產物（這取決於黃嘌呤氧化酶（XO）活性）。(貨號KTB1030)
植物Catalase過氧化氫酶 (觸酶) 活性檢測試劑盒 | CheKine™ Catalase Activity Assay Kit貨號KTB1040
過氧化氫酶/觸酶（Catalase , CAT）是幾乎在所有活生物體中常見的抗氧化酶(antioxidant enzyme)。它的主要功能是催化過氧化氫(hydrogen peroxide)分解為水(water)和氧氣(oxygen)，並去除體內的過氧化氫(hydrogen peroxide)，從而防止細胞被過氧化氫中毒。它是生物防禦系統(biological defense system)中的關鍵酶之一，為人體提供了抗氧化防禦機制(antioxidant defense mechanism)。CheKine™過氧化氫酶/觸酶活性檢測試劑盒(CheKine™ Catalase Activity Assay Kit, KTB1040) 可應用於各種生物樣品（例如Tissue Homogenate, Cell Lysate, serum, plasma, erythrocyte lysate）中的過氧化氫酶活性(catalase activity)檢測, 提供了一種簡便的比色測定方法。 該檢測試劑盒基於過氧化氫酶(catalase)與甲醇(methanol)的反應，在最佳濃度的H2O2存在下，利用過氧化氫酶(catalase)的過氧化功能來測量過氧化氫酶活性。 產生的甲醛(formaldehyde)可以在OD 540 nm處進行比色測定。 因此，樣品中存在的過氧化氫酶活性(catalase activity)與獲得的信號成正比。測量線性範圍為 2-75 µM, 最低測量活性為2 U/ml。(貨號KTB1040)
植物抗壞血酸過氧化物酶 (Ascorbate Peroxidase, APX) 活性測定 (290nm波長測定)
抗壞血酸過氧化物酶（Ascorbate Peroxidase, APX）是植物體內清除活性氧(scavenging reactive oxygen species)的重要抗氧化酶之一，也是抗壞血酸代謝(ascorbic acid metabolism)的關鍵酵素之一。抗壞血酸過氧化物酶（Ascorbate Peroxidase, APX）具有多種同工酶，定位於葉綠體(chloroplasts)、細胞質(cytoplasm)、粒線體(mitochondria)、過氧化物( peroxides )和乙醛酸體(glyoxylate bodies)，以及過氧化物(peroxide)和類囊體膜( thylakoid membranes)上。抗壞血酸過氧化物酶（Ascorbate Peroxidase, APX）催化 H2O2 對 AsA 的氧化，是植物中 AsA 的主要消耗者。 抗壞血酸過氧化物酶（Ascorbate Peroxidase, APX）活性直接影響AsA含量，且抗壞血酸過氧化物酶（Ascorbate Peroxidase, APX）與AsA呈負相關。 CheKine™ 微量抗壞血酸過氧化物酶 (APX) 活性檢測試劑盒 (KTB3091) 提供了一種簡單的檢測方法，用於檢測植物組織樣本等生物樣本中的 抗壞血酸過氧化物酶（Ascorbate Peroxidase, APX）活性。抗壞血酸過氧化物酶（Ascorbate Peroxidase, APX）透過H2O2催化AsA的氧化，透過測量AsA的氧化速率來計算抗壞血酸過氧化物酶（Ascorbate Peroxidase, APX）的活性。 (貨號KTB3091)
穀胱甘肽還原酶（Glutathione Reductases, GR）GR是一種黃素蛋白氧化還原酶，廣泛存在於真核生物和原核生物中。 穀胱甘肽還原酶（Glutathione Reductases, GR）催化GSSG還原為GSH。 它是穀胱甘肽氧化還原循環中的關鍵酶之一（通常在昆蟲中GR被TrxR代替）。 穀胱甘肽還原酶（Glutathione Reductases, GR）催化NADPH向GSH還原GSSG，有助於維持體內GSH / GSSG的比率。 穀胱甘肽還原酶（Glutathione Reductases, GR）在響應氧化應激清除活性氧方面起著關鍵作用，並且穀胱甘肽還原酶（Glutathione Reductases, GR）也參與抗壞血酸-穀胱甘肽循環途徑。GR穀胱甘肽還原酶檢測貨號KTB1620 穀胱甘肽還原酶（Glutathione Reductases, GR）可以催化NADPH還原成GSSG，從而再生GSH，NADPH脫氫生成NADP +。 NADPH在340 nm有一個特徵吸收峰，而NADP +在該波長沒有吸收峰。 通過測量340 nm處吸光度的降低率來計算穀胱甘肽還原酶（Glutathione Reductases, GR）活性，從而確定NADPH脫氫率。(貨號KTB1620)
類胡蘿蔔素是一種重要的天然色素(natural pigment)。廣泛存在於動物、高等植物、真菌(fungi )和藻類(algae)的黃色、橙色或紅色色素中。類胡蘿蔔素(Carotenoid )是體內維生素A(vitamin A 0的前體，還具有抗氧化( antioxidant)、免疫調節(immune regulation)、抗癌(anticancer)、減少心血管疾病(cardiovascular disease)和著色(colorant)等作用。植物的類胡蘿蔔素(carotenoids )存在於各種黃色質體或有色物質中，如黃色葉子(yellow leaves)、黃色花朵(yellow flowers)、黃色和紅色果實( red fruits )以及黃色塊莖(yellow tubers)等。通過溶劑萃取法分離提取樣品中的類胡蘿蔔素。在440±10 nm處有一個特殊的吸收峰。大多數高等植物和藻類微生物的葉綠體還含有類胡蘿蔔素。主要吸收藍紫光，而葉綠素A和葉綠素B同時吸收紅光和藍紫光。因此，為了消除葉綠素A(chlorophyll A)和B對類胡蘿蔔素的干擾，首先根據經驗公式計算出葉綠素A和葉綠素B的含量，然後進一步得到類胡蘿蔔素的含量；對於不含葉綠素的組織，可根據類胡蘿蔔素的經驗消光係數直接計算出類胡蘿蔔素含量。 (貨號AK0080-50T-48S)
抗壞血酸（Ascorbic acid , AsA）是一種輔酶(coenzyme)、自由基清除劑(free radical scavenger)、電子共同受體(electron common-acceptor)以及草酸鹽(oxalate)和酒石酸鹽生物合成的底物。AsA作為植物細胞中最重要的抗氧化劑，在保護葉綠體(protecting chloroplasts)免受氧化損傷( oxidative damage )方面發揮重要作用，也是作物產品品質的重要指標。脫氫抗壞血酸 (Dehydroascorbic acid , DHA) 是 ASA 的可逆氧化( reversible oxidizing)形式。在體內，脫氫抗壞血酸(dehydroascorbic )和抗壞血酸(AScorbic acid )一起形成氧化還原系統並充當電子受體。ASA具有還原性，能將Fe3+還原為Fe2+，與2,2′-聯吡啶形成粉紅色絡合物，在525nm處有特徵吸收峰。DTT可還原DHA並產生ASA，可用於檢測金針菇中總抗壞血酸（ASA+DHA）的含量。(貨號AK0628-100T)
穀胱甘肽(Glutathione) 是甘氨酸(glycine)，谷氨酸(glutamic)和半胱氨酸(cysteine)的三肽(tripeptide)。在紅血球細胞(red blood cell)中，還原型穀胱甘肽（reduced glutathione , GSH）是保持血紅蛋白處於還原狀態並保護細胞免受氧化損傷(oxidative damage)的關鍵。GSH是細胞中最重要的抗氧化劑巰基化合物(antioxidant sulfhydryl compound)，在抗氧化(oxidation resistance)，蛋白質巰基保護(protein sulfhydryl protection)和氨基酸跨膜運輸中起重要作用。還原型(reduced glutathione)和氧化型穀胱甘肽(oxidized glutathione)之間的比例（GSH / GSSG）是細胞氧化還原狀態的主要指標。因此，測量細胞中GSH和GSSG的含量，以及GSH / GSSG的比值可以反映細胞的氧化還原狀態，但是其他具有過氧化活性的酶沒有利用這些底物。DTNB與還原型穀胱甘肽(reduced glutathione) 反應形成黃色產物。在412 nm處測得的光密度可以直接反映樣品中的穀胱甘肽( glutathione)濃度。(貨號 KTB1600)
氧化應激(Oxidative stress)與包括心血管疾病(chronic diseases)在內的許多慢性疾病的病因有關。 脂質過氧化(Lipid peroxidation)是由於氧化損傷(oxidative damage)而發生的脂質(lipids)降解(degradation)，是氧化應激(oxidative stress)的有用標記(useful marker)。 多不飽和脂質(Polyunsaturated lipids)通常易受活性氧(reactive oxygen)的影響而受到氧化攻擊，從而導致產生明確的鏈反應，並生成最終產物，如丙二醛（malondialdehyde ,MDA）脂質過氧化(Lipid peroxidation)可能導致許多疾病的病理，包括動脈粥樣硬化(atherosclerosis)，糖尿病(diabetes)和阿爾茨海默氏病(Alzheimer’s)。CheKine™脂質過氧化（CheKine™ Lipid Peroxidation (MDA) Assay Kit, MDA）檢測試劑盒為檢測各種樣品中存在的丙二醛（malondialdehyde, MDA）提供了便利的工具。 MDA與4-羥基壬烯醛（4-hydroxynonenal , 4-HNE）一起是脂質過氧化(lipid peroxidation)作用的天然副產物，其定量通常用作脂質過氧化(lipid peroxidation)作用的標記。 樣品中的MDA與硫代巴比妥酸（thiobarbituric acid ,TBA）反應生成MDA-TBA加合物，可以很容易地在OD 532 nm處進行比色定量。 同時，測量600nm處的吸光度，並通過532nm和600nm處的吸光度之差計算MDA（以避免蔗糖(saccharose) 的干擾）。1-100 µM/L (貨號KTB1050)
抗氧化劑(Antioxidants)在防止自由基和其他潛在有毒氧化物質的形成和清除方面(scavenging of free radicals )發揮著重要作用。抗氧化劑(antioxidant species)種類有三類：酵素系統穀胱甘肽還原酶(GSH reductase)、過氧化氫酶(catalase)、過氧化物酶(peroxidase)等、小分子抗壞血酸(ascorbate, uric acid)、尿酸(uric acid)、穀胱甘肽(GSH)、維生素E等及蛋白質白蛋白(albumin)、轉鐵蛋白( transferrin)等。CheKine™總抗氧化劑能力（Total Antioxidant Capacity , TAC）測定試劑盒提供了一種簡單易用的比色測定法，用於測量血清，血漿，細胞培養上清液，尿液，組織/細胞裂解液和其他生物流體中的總抗氧化劑能力。 在該測定中，Fe3 + -TPTZ被抗氧化劑還原為Fe2 + -TPTZ。 酶催化的反應產物Fe2 + -TPTZ可以在比色讀數為593 nm的條件下進行測量。偵測範圍: 0.15-3 mM。可應用於以下樣品來源: serum, plasma, cell culture supernatants, urine, tissue/ cell lysates and other biological fluids. (貨號KTB1500)
一氧化氮(NO)是一種反應性自由基，在神經傳遞、免疫反應、細胞凋亡等重要生理功能中發揮重要作用。一氧化氮(NO)是由L-精氨酸經NO合酶(NOS)合成的，已被鑒定為內皮源性舒張因數(EDRF)和抗血小板物質。它是由中性粒細胞和活化巨噬細胞產生的神經遞質和細胞毒性物質。雖然一氧化氮(NO)在生物系統中的分子作用是多種多樣的，但一氧化氮(NO)最重要的作用是啟動鳥苷酸環化酶。Abbkine 一氧化氮(NO)（Nitric Oxide Assay Kit , NO）檢測試劑盒，應用原理為一氧化氮(NO) 被氧化成亞硝酸鹽和硝酸鹽，測定亞硝酸鹽和硝酸鹽的總量來算一氧化氮(NO)總量。 採用改良Griess 方法將硝酸鹽還原為亞硝酸鹽後，準確測定 一氧化氮(NO)的量。Griess分析機理為重氮類之間的偶氮耦合，重氮類是由磺胺(sulfanilamide)和 NO2-和 N-（1-萘基）乙二月安二yan酸鹽產生的，產生與 一氧化氮(NO)代謝物成正比的比色（540 nm）產物。該反應原理的優勢：Abbkine的一氧化氮（NO）檢測試劑盒，首先將硝酸鹽還原為亞硝酸鹽，結果更為準確。一氧化氮(NO)溶於液體後會生成亞硝酸鹽和硝酸鹽，亞硝酸鹽和硝酸鹽的相對含量變化很大，最準確確定總一氧化氮(NO)量，需同時測量硝酸鹽和亞硝酸鹽。檢測範圍：1-100 µM (貨號KTB1400)