【體外血管新生分析】Tube Formation Assay / in vitro angiogenesis 貨號K905-50

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血管生成是從預先存在的脈管系統產生新血管的過程，是生長和發育、傷口癒合、組織肉芽生成和惡性腫瘤形成所必需的。血管生成的快速評估包括測量內皮細胞形成三維管狀結構的能力。血管新生作用是由內皮細胞所引導的，過程中細胞會分泌酵素來分解基底膜，造成細胞之遊走，經由一連串的增生分化後，最後形成管狀般的血管構造。 BioVision的血管形成試驗提供了一個強大的方法來確定血管生成（體外）不到18小時。該檢測試劑盒提供了一種評估血管生成的簡單，易於執行的半定量工具。可以偵測血管細胞血管形成之inducers及inhibitors分析。Angiogenesis is the process of generating new blood vessels from the pre-existing vasculature. Angiogenesis is required for growth and development, wound healing, tissue granulation and formation of malignant tumors. The quick assessment of angiogenesis involves measurement of the ability of endothelial cells to form three-dimensional tube-like structures. BioVision’s Tube Formation Assay provides a robust method to determine angiogenesis (in vitro) in less than 18 hrs. This assay kit provides a simple, easy to perform, semi-quantitative tool for assessing angiogenesis.

Angiogenesis (Tube Formation) Assay

Extracellular Matrix Solution 2 X 1.25 ml

Wash Buffer 10 ml

Staining Dye Concentrate 25 µl

Inhibitor Control -Vinblastine (2 µM) 10 µl

Cat # +Size	K905-50
Size	50 assays
Detection Method	Light & Fluorescence microscope
Applications	Screening inhibitors and stimulators of angiogenesis Study of angiogenesis related signal transduction
Features & Benefits	• Robust method to determine angiogenesis (in vitro) in less than 18 hrs • Simple & convenient • semi-quantitative tool for assessing angiogenesis
Kit Components	• Extracellular Matrix Solution (2 vials) • Wash Buffer • Staining Dye Concentrate • Inhibitor Control -Vinblastine (2 µM)

Extracellular Matrix Solution細胞外基質溶液：長期（6個月）儲存，我們建議在無菌條件下分幾次並在-20°C儲存。避免凍結解凍循環。始終在冰上或4°C無霜冰箱中緩慢融化。溫度高於4°C會迅速膠凝胞外基質溶液。解凍可能需要在4°C過夜。解凍的矩陣可以存儲在2-8°C一個星期。Inhibitor Control抑制劑控制組 – -Vinblastine長春鹼：-20°C保存。用對照 – 長春鹼進行的處理將根據細胞類型而變化。內皮細胞系（EA.hy926細胞），推薦使用終濃度1 pmol / L。在Wash中稀釋Vinblastin 。

血管生成（管形)分析操作介紹

細胞培養：將培養的內皮細胞以所需培養基培養至〜90％密度（含有5％CO 2的37℃培養箱）。無菌條件下下收穫細胞。並於在含有0.5-5％血清的所需培養基中Resuspend細胞。血管生成：預冷的（在冰上）96孔無菌細胞培養板每孔中加入50μl解凍的細胞外基質溶液。確保凝膠在井壁表面均勻分佈（輕輕搖動或輕敲以展開）。 37°C孵育1小時，使溶液形成凝膠。使用大約1-2×10^{4 內皮細胞}/100μl培養基/孔。將細胞添加到凝固物上細胞外基質凝膠或對照孔（無細胞外基質凝膠或具有長春鹼的細胞外基質孔）。添加血管生成因素/調節器到所需Well。在含有5％CO2的37℃培養箱中培養細胞4-18小時。數據分析：使用 pipette小心移除培養基而不干擾細胞或細胞外基質凝膠。輕輕地洗用100μl洗滌緩衝液清除血清。小心地取出清洗緩衝液。準備100μl/孔染色染料工作將染色濃縮物1：200（例如5μl染色濃縮物在995μl洗滌緩衝液中）按照使用well數。每孔加入100μlStaining Dye工作溶液。孵育30分鐘。在37℃下。檢查內皮管使用光和螢光顯微鏡（綠色過濾器）形成。我們建議每個well收集幾張圖像。有幾個選項可用於分析圖片。對於手動分析，我們推薦使用圖像處理軟件。圖片J（從NIH免費）。對於自動分析，我們推薦使用WimTube圖像分析工具。它基於小管特徵即小管的數量，連接的數量，小管長度和環的數量。

Cultrex® DIVAA™ Starter Kit活體血管新生套組 | 貨號3450-048-SK

產品介紹: 活體新血管試驗套組DIVAA，是市面上唯一可以定量且具重覆性的活體內血管新生套組。取代傳統Plug assay自體吸收問題。此套組利用血管新生試驗管(angioreactor)，將待測藥物與BME混合物填至試驗管，並植入老鼠體內進行血管新生試驗。與傳統的Matrigel plug方法相比，BME混合物不會被自體吸收。因此，除了定性外亦可同時定量血管新生的程度，試驗結果再現性高、人為誤差程度小等優點是做活體血管新生的最佳選擇。實驗結果已刊登在Cell、American J Pathol、J Biol Chem、Blood等期刊，皆獲得良好回應。

註明: PathClear®基底膜提取物BME： BME產物在USP XXIV第71章無菌試驗後，37℃下孵育14天後，不得檢測到細菌或真菌生長。通過PCR檢測為陰性，支原體，通常包括在小鼠抗體生產（MAP）測試中的17種細菌和病毒株，以及總共31種有機體和病毒的13種另外的鼠感染因子，包括LDEV。

Catalog Number	Description	Qty
3450-048-02	DIVAA BME	1
3450-048-04	DIVAA FGF-2 Positive Control	1
3450-048-05	DIVAA Cell Sperse	1
3450-048-B10	DIVAA FGF-2 (1800ng)/ VEGF (600ng)	1
3450-048-01	DIVAA Angioreactor	1
3450-048-09	DIVAA AngioRack	1
3450-048-03	DIVAA Wash Buffer	1
3450-048-06	DIVAA FITC-Lectin 200X	1
3450-048-07	25X FITC-Lectin Diluent	1
3450-048-08	Heparin Solution	1

DIVAA™ FITC-Lectin & Buffer提供DIVAA™FITC凝集素作為濃度為200X的儲備溶液。螢光標記的Griffonia Simplicifolia凝集素I結合內皮細胞表面上的α-D-半乳糖基和N-乙酰半乳糖胺基。 Cultrex®DIVAA FITC-Lectin提供了定向體內血管生成測定（DIVAA™）之內皮細胞結合的最佳緩衝液。

產品型號	產品名稱	包裝
3450-048-SK	Cultrex® DIVAA Starter Kit	48 tests
3450-048-K	Cultrex® DIVAA Activation Kit	48 Wells
3450-048-IK	Cultrex® DIVAA Inhibition Kit	48 Wells
3450-048-DA	Cultrex® DIVAA Angioreactor and BME	48 Wells
3450-048-FL	Cultrex® DIVAA FITC-Lectin & Buffer	48 Wells
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