ALP/AKP鹼性磷酸酶顯色試劑盒 | APExBIO貨號 K4151

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APExBIO Technology LLC 是一家領先的小分子抑制劑 (Small Molecule Inhibitors)/活化劑 (Activators)、化合物庫( Compound Libraries)、胜肽(Peptides)、檢測試劑盒(Assay Kits)、螢光標記(Fluorescent Label)、酶(Enzymes)、修飾核苷酸(Modified Nucleotides)、mRNA 合成以及各種分子生物學工具的供應商。APExBIO提供廣泛的產品線,涵蓋 20 多個不同的研究領域,例如癌症(cancer)、免疫學(immunology)、神經科學(neurosciences)、細胞凋亡(apoptosis)和表觀遺傳學(epigenetics)等。公司總部位於美國德州休士頓USA (Houston, Texas),致力於服務全球客戶。高度重視產品品質。所有產品均遵循嚴格的生產指南,並附有分析證書、HPLC、質譜(Mass Spectrum)和HMNR以及體外驗證(in vitro validation)。 APExBIO產品已被《Nature》、《Cell》和《Science》等眾多頂級同行評審期刊引用。>>更多APExBio商品

ALP/AKP鹼性磷酸酶顯色試劑盒 | APExBIO貨號 K4151
產品介紹
鹼性磷酸酶 (AP/ALP/AKP/ALKP/ALPase/Alk Phos) 是一類同工酶( isoenzymes ),它們能夠水解磷酸單酯( phosphate ions),去除底物分子上的磷酸基團,產生磷酸根離子和遊離羥基。其去磷酸化底物包括核苷酸、蛋白質和生物鹼,且在鹼性條件下最為有效。鹼性磷酸酶( Alkaline phosphates)具有水解酶活性(hydrolase activities),例如常見的小牛腸鹼性磷酸酶 (calf intestinal alkaline phosphatase , CIAP/CIP),廣泛用於標記蛋白質和核酸(例如二抗)的檢測,以及用於 DNA 或 RNA 5′ 和 3′ 端(特別是質粒的 5′ 端)的去磷酸化(脫磷酸化),以避免質粒自連接。硝基藍(5-溴-4-氯-3-吲哚基磷酸鹽,BCIP)是鹼性磷酸酶(alkaline phosphatase)的最佳底物組合之一,而硝基藍四唑氯化物(NBT)是一種深藍色無定形微溶性物質。在鹼性磷酸酶(alkaline phosphatase)的催化下,BCIP 水解生成一種強反應性產物,該產物與 NBT 反應生成不溶性的深藍色至藍紫色化合物 NBT-甲臢。此試劑盒顏色鮮豔,目測可見,穩定性高,在光照下不會褪色。本試劑盒可用於免疫組織化學層析(immunohistochemical chromography)、Western 和其他膜顯色法(membrane chromogenic),以及誘導性多能幹細胞iPS的鑑定。

1. 樣本處理 – 組織切片/細胞樣本/膜的處理
對於組織切片、細胞樣本或膜,在與鹼性磷酸酶標記的抗體或其他形式的探針孵育後,選擇適當的洗滌溶液洗滌3-5次,每次3-5分鐘。對於檢測內源性鹼性磷酸酶的組織或細胞樣本,在樣本固定後,也使用適當的洗滌溶液洗滌3-5次,每次3-5分鐘。
2. BCIP/NBT染色液的配製
將1 mL NBT和1 mL BCIP分別溶於100 mL配製染色液中。注意:建議依實際用量進行配製。
3. 顯色反應
步驟1:最後一次洗滌後,棄去洗滌液,加入適量BCIP/NBT染色液,以確保樣本充分覆蓋。室溫避光孵育1~5分鐘,直到顯色至預期深度。
4. 終止顯色反應
顯色反應可以透過棄去BCIP/NBT染色液,然後用蒸餾水洗滌1-2次,或用1%冰醋酸沖洗來終止。
5. 後處理
將膜(如PVDF膜等)風乾後,置於塑膠套中避光保存。註:乾膜可置於兩張轉印紙之間的塑膠套中,於2-8°C保存。
對於組織切片或細胞樣本,顯色反應結束後,如有需要,可使用中性紅染色液(K1185中性紅染色液)進行染色,以便於觀察。對於膜,顯色反應結束後,可在室溫下乾燥並避光保存。
APExBIO提供優質的胜肽和生物分析試劑,廣泛產品線如Protease、Chromatin/Epigenetics表觀遺傳學、MAPK Signal、DNA Damege/DNA repair、細胞凋亡、腫瘤生物學、Stem cell等研究領域, 還提供定制的服務,包括多肽合成,抗體的生產和檢測的發展。產品線DNA/RNA prep kit、Drug Screening panel、Bioactive peptides、Growth factors、Biotinylation Reagents、tag peptides、amino Acids、Growth factors等。APExBIO產品質量都伴隨著證書的分析,高效液相色譜,質譜,和HMNR數據。>>更多APExBio商品
化學染色試劑
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