脂肪酸攝取測定試劑盒| Fatty Acid Uptake Assay Kit 貨號Abnova™KA4084

100 assays 

脂肪酸攝取(Fatty acid uptake )是治療肥胖、第2型糖尿病( type 2 diabete )和肝脂肪變性等許多人類疾病的重要治療標靶。 測定原理 脂肪酸攝取測定試劑盒提供了一種簡單而靈敏的方法，用於測量含有脂肪酸轉運蛋白(fatty acid transporters)的細胞中的脂肪酸攝取。本試劑盒使用專有的十二烷酸螢光脂肪酸底物。此脂肪酸攝取測定試劑盒可在任何具有底部讀取模式或 FITC 通道的螢光酶標儀上進行。此測定可以在 96 孔或 384 孔微量滴定板中透過簡單的混合和讀取程序進行，並且可以輕鬆適應高通量篩選應用。

測定程序

依需要用測試化合物處理細胞。 從培養箱中取出經化合物處理的細胞板，加入 100 µL/孔（96 孔板）或 25 µL/孔（384 孔板）（包括空白孔）脂肪酸染料上樣溶液。使用底部讀取模式，使用螢光酶標儀在 Ex/Em = 485/515 nm（在 495 nm 截止）測量螢光訊號。

對於動力學讀數：立即以 20 秒的間隔讀取螢光強度，持續 30-60 分鐘。

對於終點讀數：在 30-60 分鐘孵育結束時讀取螢光強度。

將細胞在生長培養基中培養4-6 小時將細胞轉移至無血清培養基中1 小時，並根據需要處理細胞添加100 μL/孔的脂肪酸染料上樣溶液監測螢光立即在Ex/Em = 485/515 nm 處增加以進行動力學分析，或在孵育60 分鐘後進行終點讀取（底部讀取模式）

重要提示：在開始實驗之前，請在室溫下解凍所有試劑盒組件。

3T3-L1脂肪細胞和纖維母細胞脂肪酸攝取的比較。

將細胞以50,000個細胞/100uL/孔鋪在96孔黑壁/透明底部聚-D賴氨酸板中5小時，然後去血清1小時。細胞不使用（對照）或用胰島素（150 nM）處理，並在 37°C、5% CO2 培養箱中孵育 30 分鐘。孵育時間結束時，將100ul脂肪酸混合物加入孔中，並再孵育60分鐘，使用FlexStation讀板器使用底部讀取模式測量螢光訊號。 A：纖維母細胞（對照）； B：纖維母細胞（胰島素）； C：脂肪細胞（對照）； D：脂肪細胞（胰島素）。從含有細胞的孔的值中減去含有生長培養基的空白孔中的螢光。空白孔的背景螢光可能會根據生長培養基或微量滴定板的來源而改變。

應用：

✓ 應用： 
檢測：生物樣本中的磷脂，例如血清和非 EDTA 血漿。藥物發現/藥理學：藥物對含膽鹼磷脂代謝的影響。 

特點：

✓主要特性 靈敏：使用 20 µL 樣品。線性偵測範圍：比色測定 3 - 200 μM，螢光測定 0.6 - 20 μM 磷脂質。