【羥脯氨酸 & 膠原蛋白測定】Hydroxyproline & Collagen Assay KITS-Abcam (Biovision)
【羥脯氨酸 & 膠原蛋白分析】Hydroxyproline (4-hydroxyproline) & Collagen Assay KITS-Abcam (Biovision)
Total Collagen Assay Kit (Perchlorate-Free)
產品介紹: 膠原蛋白是哺乳動物中含量最豐富的蛋白質，佔體內蛋白質含量的近30％。膠原蛋白是在皮膚，肌腱，骨，軟骨，韌帶和肌肉等組織中發現的細胞外支架蛋白。有超過20種不同的特徵類型的膠原蛋白，但是纖維類型I，II和III佔哺乳動物總膠原的90％以上。膠原蛋白具有三螺旋結構，由三個具有重複Gly-X-Hyp三肽序列的’前原膠原’鏈組成，其中X是任何氨基酸，Hyp是羥脯氨酸，翻譯後修飾的氨基酸由脯氨酸通過脯氨酰-4-羥化酶。在動物中，羥脯氨酸幾乎全部存在於膠原蛋白（其質量含有大約12-14％的羥脯氨酸）並且有助於其結構剛性和高拉伸強度。羥脯氨酸因此是組織中存在的膠原量的直接量度。據信許多疾病影響膠原蛋白的周轉，包括腫瘤侵襲和轉移，類風濕性關節炎，心肺纖維化和肌營養不良。
BioVision的Total Collagen Assay Kit II（不含高氯酸鹽）是一種用於檢測各種生物樣品中少量膠原蛋白的快捷方便程序。該測定基於樣品的水解以產生游離的Hyp，其被氧化並反應以產生在560nm處具有吸收峰的亮色髮色團。該檢測方法採用專有的酸性顯影液，無需使用有害的高氯酸即可精確測量水解液中的膠原蛋白，無需任何特殊處理和廢物處理方案。該測定法可以檢測96孔格式中每孔最少0.5μg膠原蛋白，並產生與經典的基於高氯酸的方法實際上相同的比色結果。
| Cat # +Size | K406-100 |
| Size | 100 Reactions |
| Kit Summary | • Detection method- Absorbance (OD = 560 nm). • Sample Types- Mammalian tissues, protein/peptide hydrolysates, serum, Urine • Applications- Measurement of collagen in various sample types. |
| Detection Method | Detection method- Absorbance (OD = 560 nm). |
| Species Reactivity | Mammalian tissues, protein/peptide hydrolysates, serum, urine |
| Applications | Measurement of collagen in various sample types. |
| Features & Benefits | • Simple, fast and convenient assay • Can detect as low as 0.5 µg of collagen in a variety of samples • Simple procedure; takes less than ~60 minutes • Faster than Perchlorate-Based Assay • PCA-free |
| Kit Components | • Oxidation Buffer • Chloramine T Concentrate • Developer Solution • DMAB Concentrate (in DMSO) • Collagen I Standard (3 mg/ml) • Microplate Sealing Film |
總膠原蛋白分析套組Total Collagen Assay Kit | 貨號K218-100
A simple, sensitive & easy colorimetric assay to quantitate total collagen levels.
產品規格: Total Collagen Assay Kit總膠原蛋白分析套組 貨號K218-100 | 100個分析 產品描述: 總膠原蛋白分析套組，吸收光Absorbance (560 nm)偵測；可用於哺乳動物組織培養液、protein/peptide hydrolysates、serum、尿液之樣品。測量最低靈敏度0.5ug的膠原。
產品描述：
Collagen膠原蛋白，豐富存在細胞外基質和結締組織中，是不溶性蛋白質。亦存在皮膚、腱、骨、軟骨、肌肉、玻璃體液和韌帶以及其他組織中。存在超過十六種類型的膠原；type I，II和III型膠原在哺乳動物中包含超過80％的含量。膠原的三螺旋結構是相當獨特的：它由基本三聚體的重複模式：甘氨酸 – 脯氨酸 – 羥脯氨酸。在細胞中，膠原作為前膠原分泌並且這些鏈被轉運到內質網中，其中許多轉譯後修飾具有二硫鍵的三螺旋的形成。膠原的過度產生與包括肝硬化、肺纖維化、和腫瘤生長的病理狀況相關。 BioVision的膠原蛋白檢測試劑盒是一種簡單靈敏的檢測方法，可檢測各種樣品中的少量膠原蛋白。該測定基於樣品的酸水解以形成水解產物和羥脯氨酸。該釋放的羥脯氨酸被氧化形成反應中間體，以（Abs 560nm）。該測定對膠原是簡單，敏感和特異的，並且可以在多種樣品例如組織勻漿，生物流體和純化蛋白中檢測低至0.5μg的膠原蛋白。
膠原酶（膠原降解/酶譜法）測定試劑盒（螢光法）｜貨號K490-100
Collagenase (Collagen Degradation/Zymography) Assay Kit (Fluorometric)
產品介紹: Collagenases膠原酶是基質金屬蛋白酶matrix metalloproteinase (MMP)家族的成員，是消化triple helix region三螺旋區域中的天然膠原,並參與結締組織的生理和病理turnover的內肽酶。膠原蛋白是動物細胞外結締組織的主要fibrous component纖維組分。Bacterial collagenases細菌膠原酶不同於脊椎動物膠原酶，因為它們表現出更寬substrate特異性。Collagenases膠原酶可能在轉移過程的多個階段促進metastatic腫瘤cell invasion細胞侵入細胞extracellular matrix外基質。膠原酶也被批准用於醫療用途，用於治療Dupuytren’s攣縮症，Peyronie’s disease佩羅尼氏病和傷口癒合。膠原酶活性測定其應用原理通常以小肽的活性測定檢測膠原酶活性，其可能缺乏底物特異性。膠原酶活性的其他方法包括膠原蛋白酶譜法，其中樣品在含膠原的SDS-PAGE上電泳，並進一步在合適的緩衝液中復性12-16小時。zymogram酶譜隨後被染色，並且消化區域對於底物已經被酶降解的深色染色背景顯現為清晰條帶。這種方法費時費力，並且可能導致酶活性的喪失，可能不完全可逆reversible。BioVision的膠原酶活性檢測試劑盒採用混合方法檢測膠原酶活性，採用高度淬滅的膠原蛋白底物，通過適當的膠原酶切割釋放螢光團fluorophore，可以使用常規microplate reader輕鬆定量。該方法具有底物特異性，簡單，快速，高通量適應性，並且適用於生物樣品中膠原酶活性的靈敏檢測（低至0.6 mCDU的細菌膠原酶
| Cat # +Size | K490-100 |
| Size | 100 assays |
| Kit Summary | • Detection method- Fluorometric (490/520 nm) • Species reactivity- mammalian • Applications- – Measurement of collagenase activity – For screening/studying/characterizing collagenase inhibitors |
| Detection Method | Fluorescence (490/520 nm) |
| Species Reactivity | Mammalian |
| Applications | • Measurement of collagenase activity • For screening/studying/characterizing collagenase inhibitors |
| Features & Benefits | • Rapid & sensitive • Simple assay to measure collagenase activity as well as to screen/study/characterize potential inhibitors of collagenase • Includes Fluorometric Collagenase Substrate and Positive Control |
| Kit Components | • Collagenase Assay Buffer • Cell Lysis Buffer • Enzyme Positive Control • Collagenase (Substrate) • FITC Standard (5 mM) |
Collagenase Activity Colorimetric Assay Kit)
產品介紹: 膠原酶（EC 3.4.24.3）是基質金屬蛋白酶家族中的一種酶，可分解膠原蛋白，協助細胞外基質降解，這是細菌發病機制中的關鍵步驟。 膠原蛋白是存在於動物結締組織中的豐富結構蛋白質。 膠原酶已被臨床用於治療Dupuytren氏攣縮，這是一種以結締組織增厚為特徵的疾病。 BioVision的膠原酶活性檢測試劑盒提供了一種快速簡單的方法來確定膠原酶的活性。 該試劑盒使用模擬膠原蛋白結構的合成肽（FALGPA）測量膠原酶活性。 它適用於測量細菌膠原酶如來自溶組織梭菌I-XI型的活性。 此外，它也可用於篩選/表徵膠原酶制劑。 該測定的檢測限為0.02mU膠原酶。
Collagenase Activity Colorimetric Assay Kit
| Cat # +Size | K792-100 |
| Size | 100 assays |
| Detection Method | Absorbance (345 nm) |
| Species Reactivity | Bacterial |
| Applications | Measurement of collagenase activity For screening/studying/characterizing collagenase inhibitors |
| Features & Benefits | • Rapid & sensitive • Simple assay to measure collagenase activity as well as to screen/study/characterize potential inhibitors of collagenase • Includes Inhibitor Control (1,10-Phenanthroline) |
| Kit Components | • Collagenase Assay Buffer • Collagenase (0.35 U/ml) • Collagenase Substrate (FALGPA) • Inhibitor (1 M 1,10-Phenanthroline) |
Collagenase Activity Colorimetric Assay Kit)
產品介紹: 膠原酶（EC 3.4.24.3）是基質金屬蛋白酶家族中的一種酶，可分解膠原蛋白，協助細胞外基質降解，這是細菌發病機制中的關鍵步驟。 膠原蛋白是存在於動物結締組織中的豐富結構蛋白質。 膠原酶已被臨床用於治療Dupuytren氏攣縮，這是一種以結締組織增厚為特徵的疾病。 BioVision的膠原酶活性檢測試劑盒提供了一種快速簡單的方法來確定膠原酶的活性。 該試劑盒使用模擬膠原蛋白結構的合成肽（FALGPA）測量膠原酶活性。 它適用於測量細菌膠原酶如來自溶組織梭菌I-XI型的活性。 此外，它也可用於篩選/表徵膠原酶制劑。 該測定的檢測限為0.02mU膠原酶。
Collagenase Activity Colorimetric Assay Kit
| Cat # +Size | K792-100 |
| Size | 100 assays |
| Detection Method | Absorbance (345 nm) |
| Species Reactivity | Bacterial |
| Applications | Measurement of collagenase activity For screening/studying/characterizing collagenase inhibitors |
| Features & Benefits | • Rapid & sensitive • Simple assay to measure collagenase activity as well as to screen/study/characterize potential inhibitors of collagenase • Includes Inhibitor Control (1,10-Phenanthroline) |
| Kit Components | • Collagenase Assay Buffer • Collagenase (0.35 U/ml) • Collagenase Substrate (FALGPA) • Inhibitor (1 M 1,10-Phenanthroline) |
Collagenase Activity Colorimetric Assay Kit)
產品介紹: 膠原酶（EC 3.4.24.3）是基質金屬蛋白酶家族中的一種酶，可分解膠原蛋白，協助細胞外基質降解，這是細菌發病機制中的關鍵步驟。 膠原蛋白是存在於動物結締組織中的豐富結構蛋白質。 膠原酶已被臨床用於治療Dupuytren氏攣縮，這是一種以結締組織增厚為特徵的疾病。 BioVision的膠原酶活性檢測試劑盒提供了一種快速簡單的方法來確定膠原酶的活性。 該試劑盒使用模擬膠原蛋白結構的合成肽（FALGPA）測量膠原酶活性。 它適用於測量細菌膠原酶如來自溶組織梭菌I-XI型的活性。 此外，它也可用於篩選/表徵膠原酶制劑。 該測定的檢測限為0.02mU膠原酶。
Collagenase Activity Colorimetric Assay Kit
| Cat # +Size | K792-100 |
| Size | 100 assays |
| Detection Method | Absorbance (345 nm) |
| Species Reactivity | Bacterial |
| Applications | Measurement of collagenase activity For screening/studying/characterizing collagenase inhibitors |
| Features & Benefits | • Rapid & sensitive • Simple assay to measure collagenase activity as well as to screen/study/characterize potential inhibitors of collagenase • Includes Inhibitor Control (1,10-Phenanthroline) |
| Kit Components | • Collagenase Assay Buffer • Collagenase (0.35 U/ml) • Collagenase Substrate (FALGPA) • Inhibitor (1 M 1,10-Phenanthroline) |
Hydroxyproline Colorimetric Assay Kit羥脯氨酸呈色分析套組
產品規格: 羥脯氨酸呈色分析套組 貨號K555 | 100個分析
產品描述: Hydroxyproline (4-hydroxyproline) 羥脯氨酸（4-羥基脯氨酸）是常見的非蛋白生成氨基酸。它僅存在於哺乳動物的膠原和彈性蛋白中，但存在於植物中的許多其它蛋白質中。羥脯氨酸僅存在翻譯後修飾肽鏈中，脯氨酸羥化酶非游離的羥基化脯氨酸。組織水解產物中的Hydroxyproline羥脯氨酸，為測量collagen膠原或gelatin明膠量的指標。多種疾病狀態影響膠原蛋白轉變，並可導致血清或尿羥脯氨酸升高。這種病症的範圍從腫瘤、炎症、腎或骨疾病到內分泌和自身免疫性疾病。 BioVision的羥脯氨酸測定試劑盒K555-100，設計用於測量組織或蛋白/肽水解產物中的羥脯氨酸。它可用於測量來自其他生物樣品如血清或尿液的羥脯氨酸（如果它們已經經歷了之前的純化過程）;方法容易、方便，在560nm處具有最大吸光度的色原體，該測定範圍0.1-2μg。
| Size | 100 assays |
| SKU+Size | K555-100 |
| Detection Method | Absorbance (560 nm) |
| Species Reactivity | Mammalian |
| Applications | The assay is useful over the range of 0.1-2 μg. |
| Features & Benefits | • Simple procedure; takes less than ~100 minutes • Convenient and easy to use |
| Kit Components | • Oxidation Buffer • Chloramine T Concentrate • Perchloric acid/Isopropanol Solution • DMAB Concentrate (in DMSO) • Hydroxyproline Standard (1 mg/ml) |
產品問與答尿液樣品的純化
100μl血清/尿中，加入100μl濃鹽酸。 HCl在壓力密封的特氟隆蓋瓶中並在120℃水解3小時。加入5mg活性炭Norit或活性炭Darco（Sigma Cat＃97876或242276）混合。以12000g離心2分鐘。將10ul上清液轉移至96孔板中，在真空下蒸發至乾。繼續操作手冊步驟3。
產品問與答樣品處理與保存
樣品用酸消化/水解以從膠原計算羥脯氨酸。標準品是羥丙基甲基纖維素，因此不需要HCL /蒸煮處理。此外，標準品不是真空乾燥的，因為其不含HCl-在進行其它試劑之前，將樣品乾燥以除去HCl。手冊中，要在真空下乾燥板。若沒這方面設備，可以在60℃的烤箱中乾燥板，確保擺脫HCl。空氣乾燥需要很長時間，不推薦。持水解的裂解物或乾燥的96孔板在-80攝氏度，供以後使用。請將裂解物等分，並在儲存前密封板。樣品製備部分中的反應時間，120.C進行少於3小時，否則水解將不能有效完成。可以將水解O / N繼續第二天，或水解3小時並凍結水解sup 於-80℃，以備使用。細胞若燒焦的外觀不影響實驗。預期當細胞/組織受到高溫處理3小時時，它們會產生燒焦的外觀。在進行下一步之前，讓這種黑色物質作為碎屑沉澱（如果需要，給管子輕輕旋轉）。然後僅取上清液用於下一步蒸發。
試劑盒可以用於像細菌，植物，果蠅，酵母等樣品；K555羥脯氨酸呈色分析套組，優化與哺乳動物樣品的試劑盒。然而，理論上這些試劑盒應與來自多個物種/來源的樣品一起使用。由於最佳條件取決於樣品類型，因此必須調整方案以適應樣品以獲得有效的結果。新鮮樣品總是優於冷凍樣品。然而，也可以使用冷凍樣品，條件是它們在分離後立即冷凍，不是多次冷凍解凍（為此我們建議在冷凍前, 分裝多管使用)。