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【Fc受體阻斷劑】 Innovex Fc Receptor Block 貨號NB309

【Fc receptor 受體阻斷劑】 

適用於阻斷所有類型的Fc Receptor受體,例如 I receptors ,II receptors  和III型Fc-γ受體; Fc-ε受體I和II型; Fc –α受體,Fcα/ µR和FcRn。

Fc受體(Fc receptors , FcR)是分子量約為50-70 kD的糖蛋白(glycoproteins)。他們廣泛在整個免疫細胞(immune cells)中表達。它們存在於白血球(leukocytes)如單核細胞(monocytes),組織巨噬細胞(tissue macrophages),B細胞(B cells),粒細胞(granulocytes)嗜酸性粒細胞(eosinophils),嗜鹼性粒細胞(basophils),嗜中性粒細胞(neutrophils),NK細胞和一些T細胞。Fc receptors肥大細胞,濾泡樹突細胞(follicular dendritic cells),上皮細胞(epithelial cells),內皮細胞(endothelial cells),肝細胞上也存在受體和langerhans cells等等。 Fc受體(FcR)有幾種類型,它們基於他們所識別的抗體上。有一些對單體IgG的Fc區具有很高的親和力抗體,稱為Fc-Gamma受體,與IgA抗體結合的抗體稱為Fc-α受體,那些結合IgE抗體的抗體稱為Fc-ε受體。非特異性Fc受體在IHC,免疫螢光(IF)和流式細胞儀等檢測中可以染色。這是由於一抗和二抗的Fc區與細胞上Fc受體的結合所致。在IHC,IF和流式細胞儀中,消除Fc受體染色是理想的。

相關試劑 Innovex Fc受體阻斷劑 (Innovex Fc Receptor Block) | 貨號NB309

Innovex Fc受體阻滯劑 (Innovex Fc Receptor Blocker, NB309) 是一種通用的Fc阻滯劑,適用於阻斷所有類型的Fc Receptor受體,例如 I receptors ,II receptors  和III型Fc-γ受體; Fc-ε受體I和II型; Fc –α受體,Fcα/ µR和FcRn。 Innovex Fc阻斷劑不包含抗體,免疫球蛋白或免疫球蛋白片段。 INNOVEX Fc阻斷劑可用於阻斷人類,小鼠和所有動物等所有物種中的所有類型的Fc受體, 通過多種免疫測定(例如IHC,免疫螢光(Immunofluorescence, IF)和流式細胞儀(Flow cytometry) )檢測細胞和組織。 INNOVEX Fc阻斷劑也常用於消除腦細胞( Brain cells)/組織中(tissues)的背景染色。 Fc受體阻滯劑也可用kappa ,lambda antibodies 及免疫球蛋白( Immunoglobulins , lgs)於 IHC,IF和流式細胞進行特異性染色。 如CD表型(CD phenotyping),白血病分型(leukemia typing )和活細胞功能測定( live cell functional assays)。

產品介紹: Fc受體阻滯劑 (Innovex Fc Receptor Block) ,先進和獨特的功能;阻斷人和動物細胞中的Fc受體。是準確的淋巴瘤,白血病和黑色素瘤分型以及無背景Kappa和λ染色的必需品。Innovex Fc Receptor Block是一種基於peptide based的技術,不含抗體,血清,免疫球蛋白,免疫球蛋白片段或鏈黴蛋白酶。目的為阻斷所有白血球細胞(white blood cells),淋巴瘤(lymphomas)和黑色素瘤(melanomas)中存在的Fc受體(Fc Receptors)。在室溫下對人體組織/細胞進行30分鐘的孵育步驟;動物組織/細胞孵育45分鐘至1小時。消除白血球細胞,淋巴組織,細胞株(血液和骨髓),黑色素瘤和其他表達Fc的腫瘤的假陽性染色,確保准確的淋巴瘤和白血病分型。

Fc受體(Fc Receptors)也在大多數腫瘤(tumors)上表達。阻斷Fc受體對於淋巴(lymphoid)和腫瘤組織(tumor tissues)和細胞的準確分型至關重要。 Fc受體染色通過細胞上存在的Fc受體與初級和/或第二抗體的Fc區的結合而發生。 Fc受體阻斷劑可用於IHC(冷凍和石蠟),免疫螢光(immunofluorescence),流式細胞術(flow cytometry)和原位雜交(in-situ hybridization)。對於活細胞和功能測定,建議使用Azide-Free Fc Block (貨號NB335)。

產品特點:

  1. Blocks Fc Receptors in both human and animal cells
  2. 30 minute incubation step at room temperature for human tissues/cells
  3. 45 minutes to 1-hour incubation for animal tissues/cells
  4. Eliminates false positive staining of white blood cells, lymphoid tissues, cytosmears (blood & bone marrow), melanoma tumors and other Fc expressing tumors
  5. Insures accurate lymphoma and leukemia typing
  6. liminates negative control staining of lymphomas, lymphoid tissues, and blood and bone marrow smears
  7. Eliminates false positive staining for Kappa and Lambda staining
  8. Eliminates false positive staining of Reed Sternberg cells
  9. A must for CD markers staining in IHC, immunofluorescence
  10. A must for CD phenotyping via flow cytometry
  11. A must for Immunoglobulins (Igs) staining via IHC, flow cytometry and immunofluorescence
  12. A must for kappa and lambda staining

文獻資料

https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC4395339/

相關試劑 即用型IHC試劑盒 | 貨號K405-50

Ready-to-use IHC kit (Biotin free), One-Step HRP Polymer anti-Mouse, Rat and Rabbit IgG (H+L) with DAB 

產品描述:免疫組織化學(Immunohistochemistry , IHC)/免疫細胞化學(Immunocytochemistry , ICC)是通過使用標記的抗體作為特異性試劑,通過抗原 – 抗體相互作用來定位組織切片/細胞中的抗原,抗原 – 抗體相互作用通過諸如螢光染料(fluorescent dye) ,酶(enzyme,) ,放射性元素(radioactive element) 或膠體金的標記物等讓表現可視化。 通常使用幾種IHC技術,例如標記的生物素二抗鏈黴抗生物素蛋白 – 過氧化物酶 (labeled biotin secondary antibody streptavidin-peroxidase, HRP) ,抗HRP-HRP,ABC催化的信號放大,polymer system聚合物系統(一步或兩步)等,以檢測組織和細胞中的抗原。 BioVision的即用型IHC試劑盒採用聚合物技術( polymer system),可提高靈敏度和檢測靈敏度。 IBSC一步法,針對抗小鼠,大鼠和兔IgG(H + L) polymer,不同於免疫生物素/抗生物素蛋白的系統 (biotin/avidin free system),可以對膜 (membrane) ,細胞質 (cytoplasmic) 和核抗原(nuclear antigens) 直接進行染色。 它為用戶提供了快速且易於使用的IHC檢測系統。

 

Cat # +Size K405-50
Size 50 tests
Species Reactivity Mouse, rat, and rabbit
Applications A biotin/avidin free system that stains membrane, cytoplasmic and nuclear antigens. Immunohistochemistry (IHC) and immunocytochemistry (ICC).
Features & Benefits • Simple procedure; takes ~ 3 hours
• Fast and convenient
• The assay is sensitive and stable
• The TUNEL-based assay kit provides complete components including positive and negative control cells for convenient detection of DNA fragmentation in cultured cells and tissue sections.
Kit Components • Ready-to-use, peroxidase block, hydrogen peroxide
• Ready-to-use protein blocking solutions
• Primary antibody dilution buffer
• IBSC-one-step HRP-anti-mouse, rat, and rabbit polymer
• Reagent BS (ready to use buffer & substrate)
• Reagent C (conc. DAB chromogen)
Storage Conditions 2-8°C
Shipping Conditions Gel Pack

 IHC/ICC 免疫組織化學染色步驟-冷凍,石蠟切片和細胞塗片

套組內不包含Washing buffer |  Retrieval Solution |  positive or negative control | primary antibody | 螢光封片劑 。

將試劑儲存在2-8°C,不要冷凍。使用前將試劑置於常溫,應該同時進行陽性和陰性對照組。

1.組織切片脫蠟 (Deparafinize) 和水合(hydrate )通過二甲苯 (xylene)或其他清除劑和graded alcohols使組織切片脫蠟和水合。注意事項: 對於冷凍切片(frozen sections)或細胞塗片(cell smears )使用 unfixed, acetone fixed 或適當的 fixative for the antigen 。細胞塗抹(cell smears )使用detergent – Triton or NP40 (0.1-0.2% in PBS for 10 min使滲透性。Tween20,皂甙,Digitonin或類似於leucoperm(在PBS中0.2-0.5%,持續10-30分鐘)適用於細胞質或質膜(plasma membrane)抗原。

2.用蒸餾水(distilled或去離子水(deionized water)洗滌2-3次。

3.在室溫下用過Peroxidase Block (clear cap) 切片/細胞塗片反應5-10分鐘。用蒸餾水(distilled water)洗3次。注意事項:antigen retriever (胰蛋白酶AR-6541,Pronase AR-6542,胃蛋白酶AR-6543,檸檬酸鹽緩衝液AR-6544,緩衝液(with EDTA pH 8.5 AR6545,Tris緩衝液pH 10 AR-6546),它可用於這一步。

4.用PBS或Tris saline buffer(含0.02-0.05%非離子洗滌劑,Triton X100,Tween 20或NP-40)洗滌載玻片3次。

5.切片/細胞塗片於Protein blocking solution (blue cap),在室溫下孵育5-10分鐘。

6.Incubate sections/cell smear with primary antibody(未提供,僅提供緩衝液用於稀釋)20-30分鐘。該提供的一抗稀釋緩衝液(primary antibody dilution buffer)也可用作陰性對照。

7.用PBS洗滌載玻片5-7次。在室溫下與One-Step HRP polymer (brown cap)孵育20-30分鐘。

8.用PBS或TBS洗滌載玻片5-7次,建議使用0.025-0.05%非離子型去污劑 without

sodium azide(Triton x-100或Tween-20或NP-40)洗滌。注意事項:過氧化物酶試劑被疊氮化鈉 (sodium azide)破壞,應避免在所有緩衝液和試劑中使用。

9.用去離子水(deionized)或蒸餾水(distilled)洗2-3次。

10.在試管中,加入1 ml Reagent BS和50μl試劑C(DAB chromogen)混合 (即用型DAB試劑限7-8小時內使用完。)

11.在組織載玻片上加入幾滴即用型DAB試劑 (步驟10),在室溫下等待6-10分鐘。 (更高溫度37°C也可用於DAB chromogen,但孵化時間應由個別實驗室確定

12.用PBS洗滌5-7次,然後用離子水(deionized)或蒸餾水(distilled)沖洗。

13.與DAB兼容的複染劑(未提供)孵育30-60秒。We prefer hematoxylin。

14.用蒸餾水(distilled )/去離子水(deionized water)清洗載玻片。

15.用適當的封片劑封片,例如SuperImmunoHistoMountTM(BV Cat.No:1219-30)

 

 

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