人子宮內膜異位細胞 | Immortalized Human Endometriotic Cell Line (12Z) 貨號T0764
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Abmgood藥物篩選平台 | 細胞系列商品 (immortalized cell)
Immortalized Human Endometriotic Cell Line (12Z) 永生化人子宮內膜異位細胞株 | 貨號T0764 細胞數量1×106 cells / 1.0 ml
產品介紹: 永生化的人類子宮內膜異位細胞株（Immortalized Human Endometriotic Cell Line , 12Z）是通過感染SV40病毒感染的，這些細胞是從接受腹腔鏡檢查的37歲女性中獲得的。該細胞株表現出體內可見的子宮內膜異位病變的標誌物的表達。永生化人類子宮內膜異位細胞株（12Z）可用於表徵和鑑定與子宮內膜異位相關的基因和/或標記。Immortalized Human Endometriotic Cell Line (12Z) was generated by infecting cells, obtained from a 37 year-old female undergoing laparoscopy, with SV40 virus. This cell line exhibits expression of markers of endometriotic lesions that are seen in vivo. Immortalized Human Endometriotic Cell Line (12Z) may be used to characterize and identify genes and/or markers related to endometriosis.
必需購買PriCoat™T25培養瓶 (貨號G299)，培養液PriGrowIII (貨號 TM003)。
Immortalized Human Endometriotic Cell Line （SV40 virus）
| Organism | Homo sapiens |
| Source Organ | Uterus |
| Donor Age | 37 years old |
| Donor Gender | Female |
| BioSafety Level | II |
| Growth Properties | Adherent |
| Morphology | Fibroblast-like |
| Recommended Seeding Density | 15,000 – 20,000 cells/cm2 |
| Population Doubling | 55 – 65 hours |
| Immortalization Method | Immortalized with SV40 virus |
| Description | Immortalized Human Endometriotic Cell Line (12Z) was generated by infecting cells, obtained from a 37 year-old female undergoing laparoscopy, with SV40 virus. This cell line exhibits expression of markers of endometriotic lesions that are seen in vivo. Immortalized Human Endometriotic Cell Line (12Z) may be used to characterize and identify genes and/or markers related to endometriosis. |
| Depositor Information | Goethe University |
| Applications | For Research Use Only |
| Markers | SV40T, cytokeratin, vimentin, N-cadherin, estrogen receptor α and β, progesterone receptor, and aromatase P450 |
| Propagation Requirements | Use of PriCoat™ T25 Flasks (G299) or Applied Cell Extracellular Matrix (G422) is required for cell adhesion to the culture vessels. Grow cells in ECM-coated culture vessels with the following conditions. The base medium for this cell line is Prigrow III medium available at abm, Cat. No. TM003. To make the complete growth medium, add the following components to the base medium: fetal bovine serum (TM999)* to a final concentration of 10%, and Penicillin/Streptomycin Solution (G255) to a final concentration of 1%. Carbon dioxide (CO2): 5%, Temperature: 37.0°C. * abm does not recommend to use heat-inactivated FBS for cell culture unless specified otherwise. |
Immortalized Human Endometriotic Cell Line , 12Z細胞株 | 不杇方法 : Immortalized with SV40 virus | 器官來源Uterus | 細胞培養條件: 使用PriCoat™T25培養瓶 (貨號G299)，以最佳化初代和不朽細胞的生長、增殖和擴增。或塗層細胞外基質(Applied Cell Extracellular Matrix) 增強細胞貼附 (貨號G422)。Grow cells in ECM-coated culture vessels with the following conditions. 培養液PriGrowIII (貨號 TM003)。為了製備完整的生長培養基，將下列組分添加到基礎培養基中：胎牛血清（TM999）至最終濃度10％和Penicillin/Streptomycin青黴素/鏈黴素溶液（G255）至最終濃度為1％。二氧化碳（CO2）：5％，溫度：37.0℃。
黴漿菌PCR偵測 | DAPI染核 | 細胞內黴漿菌去除劑 | 水浴槽抑菌劑 | 噴霧式去黴劑 等系列商品
Abmgood不朽化系列商品 (immortalized reagenet) Ready-to-use
Abmgood公司於人類與老鼠不朽之細胞株上，具有幾十年的實驗經驗；提供一系列不朽 (immortalized)化之細胞株、及不朽化之試劑商品。ready-to-use定量好之retrovirus、lentiviru、 adenovirus，可直接加於細胞中進行感染表現；病毒液包括有SV40重組病毒、EBV重組病毒、hTERT病毒液、Myc基因病毒液、p53基因病毒液、Rb基因病毒液、Ras基因病毒液。提供106及109兩種包裝力價之病毒液；亦提供一系列病毒力價濃縮與定量試劑商品。
細胞不朽化的工具中，SV40 T antigen是最簡單且最常用來造成不朽化細胞生成的方法。多數的病毒基因和抑癌基因（p53、Rb等）的不活化相關，會誘導細胞處於replicative senescence的階段。目前也有研究顯示被感染的細胞，SV40 T anbtigen會誘導端粒酶（Telomerase）的活性。與端粒（telomere）長度相關的Telomerase Reverse Transcriptase protein (TERT)是一種不朽細胞的研究應用。平常細胞中，hTERT是處於不活化態，必要時會進行活化保持telomere的長度，避免細胞發生replicative senescence的現象。某些細胞hTERT 過度表現（over-expression）對於誘發細胞不朽化是無效的（如初代上皮細胞），反而會造成細胞死亡；同時表現hTERT catalytic subunit以及p53或RB siRNA在人類初代卵巢上皮細胞會造成細胞不朽化。過度表現Ras或Myc T58A mutants也有初代細胞不朽化的現象產生。
Abmgood不朽化系列商品 (immortalized cell)
根據細胞類型，Primary cells初代細胞在體外具有小於10-50次傳代的有限壽命。 不朽化細胞株能夠延長增殖，並且具有與親代組織相似或相同的基因型和表現型。
哺乳動物細胞的不朽化Immortalized策略
存在用於在培養物中不朽化哺乳動物細胞的幾種方法。 Abmgood多年研發經驗，開發出了一系列Immortalized商品；包括即用型逆轉錄病毒，慢病毒和腺病毒載體。
| Gene Overexpressed | Viruses Offered | Application |
| hTERT | Adenovirus, Lentivirus, Retrovirus |
可靠和常用。 可能在一些細胞類型（例如上皮細胞）中引起細胞死亡 |
| SV40 T Antigen | Adenovirus, Lentivirus, Retrovirus |
可靠和常用。 通常用於不朽化上皮細胞。 |
| EBV genes | Epstein-Barr Virus | 不朽化B淋巴細胞，有時是T淋巴細胞。 |
| HPV E6-E7 | Lentivirus | 不朽化角化細胞。 |
| HOXB8, HOXA9, HOXA10 | Lentivirus | 不朽化造血細胞，包括巨噬細胞，造血祖細胞和骨髓祖細胞。 |
| Adenoviral E1A-E1B | Lentivirus | 不朽化大範圍的初級囓齒動物細胞，包括羊水細胞，原發性上皮細胞，成纖維細胞和原代腎細胞。 |
| p53, Rb siRNA | Lentivirus | 與hTERT共表達以更好地使上皮細胞不朽化。 |
| Bmi1 | Lentivirus | 不朽化上皮細胞。 |
| CDK4 | Lentivirus | 與hTERT共同表達更真實的細胞模型。 |
| Myc T58A (c-Myc), Ras V12 (H-Ras) | Lentivirus | 不朽化各種細胞，包括神經幹細胞，初代腎細胞，成紅細胞和各種上皮細胞（原發性前列腺，乳腺，氣道等）。 |
Decomplement加熱非活化FBS：
1.讓FBS瓶在4°C下完全解凍過夜。
2.將FBS瓶置於56°C的水浴中30分鐘。
Decomplemented FBS可以在-20°C下長期保存。避免頻繁的凍融循環。每2-3天更換一次完整的媒體。不要讓介質顏色變為黃色。
Thawing細胞解凍方法：(每種細胞建議條件可能有許不同，依照原廠建議操作，以下為通用方式) 操作方式下載
1.在37℃水浴中解凍小瓶，直到只有一小塊冰塊。
2.將細胞轉移到含有5ml pre-warmed complete media 之15ml管中。
3.將細胞以290xg離心5分鐘。
4.小心丟棄上清液，不要打擾細胞沉澱，輕輕地上下移液，將細胞重新懸浮在1ml完全培養基中。
5.將細胞培養在150,000-200,000個細胞/ cm2。
Subculture細胞繼代方法: (每種細胞建議條件可能有許不同，依照原廠建議操作，以下為通用方式) 操作方式下載
1.當細胞70-90％ confluency時，建議繼代培養。
- Aspirate old media。懸浮液中的一些細胞仍然是活細胞。或者，也可以收集含有懸浮細胞的上清液並離心（Skip to Step 6 in protocol）。
3.加入1：1比例的1X無菌PBS和0.25％胰蛋白酶-EDTA（TM051）。
4.在室溫下孵育細胞3-5分鐘並攪拌培養容器直至90％的細胞脫落。
- 中和胰蛋白酶:添加等量之trypsin + PBS。
6.收集細胞並以290xg離心5分鐘。
7.丟棄上清液，輕輕地上下移液，將細胞重新懸浮在完全培養基中。
8.建議split ratio比不超過1：3。
Freezing細胞凍結：(每種細胞建議條件可能有許不同，依照原廠建議操作，以下為通用方式) 操作方式下載
Complete growth medium with decomplemented FBS to a final concentration of 50% from PAN Biotech (P40-37500) or from Nucleus Biologics (FBS1824-001) and 5% DMSO.
儲存溫度：液氮氣相。重要提示：此細胞係對FBS批次非常敏感。我們強烈建議最終用戶使用從PAN biotech或Nucleus Biologics 之FBS。
慢病毒包裝系列產品Lentivirus慢病毒低速純化(純化) | Lentivirus 慢病毒高濃度純化(純化) | Lentivirus病毒RT-QPCR定量(定量)