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【病毒RT-QPCR定量】ABM qPCR Lentivirus Titration(Titer) Kit Lentivirus病毒一個步驟QPCR定量套組(定量) (Cat. No. LV900)

Abmgood提供快速且方便之Lentivirus病毒力價定量套組。其結合一個步驟快速RNA萃取及QPCR技術 (SYBR system)，2個小時完成定量。套組內附有reagent mix (reagent mix included with the kit includes primers and reverse transcriptase for RT) 及primer。primer以HIV based vetors為設計的偵測方式 (試劑不包括qPCR Mastermix, 若需選擇含qPCR Mastermix之Lentivirus病毒力價定量套組, 貨號為 LV900-S，LV900-iC，LV900-R和LV900-LR) 。快速完成病毒力價定量分析。可直接應用於源於產生病毒的細胞(virus-producing cell line)或純化的病毒樣品(purified viral preparations) 之病毒效價(titer) 確定。試劑盒中提供病毒裂解緩衝液(Virus Lysis Buffer) 有助於提取來自病毒樣品的RNA（extract viral RNA病毒裂解液）。然後將Reagentmix和Lentivirus 2X qPCR MasterMix與病毒裂解液和慢病毒標準品（STD1 / STD2），可通過qRT-PCR確定閾值循環（threshold cycle , Ct）值 (comparative Ct experiment)。然後將所得的Ct值用於計算病毒樣品的慢病毒力價。此商品不會有NTC量化問題，完全排除NTC訊號。精確定量Lentivirus titer之方法。標準品STD為lentivirus病毒 (病毒載體DNA)。Standard濃度為 5x 10^7 IU/ml. Standard 2 濃度為6.25×10^6 IU/ml. 兩者standards 相差 2^3, 相當於Ct 值3次方。最低測量10^⁶IU/ml 。Normally, for a viral sample containing around 10^6 IU/ml, the Ct should be around the same as STD1 and STD2. If your Ct values for your samples are beyond 22, this indicates that the titre is too low to obtain accurate readings (6 Ct later than STD2 will indicate that your viral samples are 100X more diluted than Std2).

您可以使用我們的慢病毒力價計算器

Average Ct of STD1     
Average Ct of STD2     
Average Ct of Sample 
  

Titer of sample:  IU/ml

1) STD1, STD2 are provided in the Lentivirus qPCR Titer Kit.
2) The equation we use in this calculation of the titer tool contains a specific coefficient determined in-house to convert the value from GC/ml to IU/ml; as such, the final titer value obtained is in IU/ml.

1. One-Step qPCR，2小時內可完成定量。
2. Primer經特殊設計，解決primer dimer干擾。
3. 附有病毒濃度標準液兩組，準確定量病毒濃度。
4. 搭配ABM qPCR Mastermix，效果更佳。( 若需選擇含qPCR Mastermix之Lentivirus病毒力價定量套組, 貨號為 LV900-S，LV900-iC，LV900-R和LV900-LR)TaqMan qPCR Mastermix系列不適用於LV900-qPCR慢病毒滴度（滴定）試劑盒。該試劑盒只能使用SybrGreen或BrightGreen成分的qPCR Mastermix。

感染複數（MOI）的計算方法：MOI =（產品滴度（IU / ml）x病毒體積（ml））/總細胞數例如，以1 x 10 ^ 6 IU / ml效價獲得10的MOI如果病毒在1 x 10 ^ 5個細胞上，請使用1.0毫升病毒。

產品編號	產品名稱	包裝
LV999	Speedy Lentivirus Purification	100ml
LV900	qPCR Lentivirus Titration(Titer) Kit	100 Reactions
LV998	Ultra-Pure Lentivirus Purification Kit－可純化病毒濃度達1011病毒顆粒	1 Kit
G171 G172 G173	PuRetro™ Lentivirus Purification Kit	2 Standard Units 5 Standard Units 2 Giga Units

【病毒低速純化】 ABM Speedy Lentivirus Purification kit 慢病毒低速30分純化套組 (100倍濃縮)  (Cat. No. LV999)

傳統的病毒純化方法，大多利用超高速離心(ultracentrifuge)，搭配濃度梯度(CsCl)等方法進行病毒分離，需要純熟技術且過程費時。Speedy Lentivirus purification kti病毒純化套組可免除使用超高速離心，更簡單、快速取得高濃度病毒液。30分鐘內快速純化病毒、可達濃縮效果約100x。

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293 cells 感染純化前（A）與純化後（B）的lentivirus 48hr後的結果

【病毒高濃度純化 ^++plus】Ultra-Pure Lentivirus Purification Kit 慢病毒純化及濃度套組，有效提高病毒純度及力價 (Cat. No. LV998)

重組慢病毒lentivirus，廣泛應用於細胞之轉導。轉染後的病毒上清液力價，約10⁶ CFU菌落形成單位（菌落形成單位）/ ml。在高效能病毒力價及體內基因傳遞中，要求較高的病毒純度及力價，且於活體試驗中，避免病毒細胞培養上清液，所造成之污染可能性。因此，病毒上清需要進一步濃縮及純化。Abmgood提供一套病毒純化套組。傳統純化病毒，經由超速離心濃縮。雖然該方法效果很好，但需要特定的的超速離心設備，且技術要求高。此外，以濃縮的病毒上清總體積是有限的超速離心管的大小。報告指出，超速離心過程中，會造成一些不利的物理效應，會影響病毒顆粒的生物活性。

Abmgood發展 Ultra-Pure Lentivirus Purification Kit (Cat. No.LV998).

針對病毒濃縮技術及純度做改良。提供一個快速且有效，純化及濃縮病毒的產品。其設計原理，為利用離子交換的結合和獨特緩衝液，最大限度減少病毒顆粒的損壞，且提高病毒力價。

【病毒快篩定量】 Instant Lentivirus Titration Card慢病毒定量卡/快篩式檢測(Cat. No. G614/G615)

 

使用橫向流方法（lateral flow immunoassay）偵測lentiviral capsule protein進行定量。比起傳統infection based assays需3-4天，Instant Lentivirus Titration Card 只要10分鐘即可得到定量結果。簡單操作，10分鐘獲得結果－不需額外萃取步驟；目測觀察結果顏色變化 用途：評估培養液中適當的病毒濃度。靈敏度可達1×10⁵ IU/mL病毒濃度（或7.7 pg/ml的p24 viral capsid protein）

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