Human Endometrial Somatic Stem Cells (Stromal Fraction hESP-ICEs) 貨號T4108
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Abmgood藥物篩選平台 | 細胞系列商品 (immortalized cell)
AIZ-AR Stable 22Rv1 Luciferase Reporter Cell Line | 貨號T4108 細胞數量1×106 cells / 1.0 ml
產品介紹: 子宮內膜體幹細胞(specialized somatic stem cell, SSC)是根據側面群體（Side Population , SP）技術分離的，該技術依賴於細胞排除與DNA結合的Hoechst 33342染料的能力。基於低Hoechst 333，通過流式細胞儀對細胞進行標記和分類。人們通常通過使用“側面種群”（Side Population , SP）技術來鑑定人子宮內膜中的特定體細胞幹細胞（specialized somatic stem cell, SSC）種群，以介導子宮內膜的再生。人子宮內膜體幹細胞由人子宮內膜側群細胞建立，特別是由上皮部分（ICEp; 貨號T4107）或基質部分（ICEs；貨號T4108）建立。兩種細胞類型都具有在體外經歷成骨(osteogenic)和成脂分化(adipogenic differentiation)的能力。成脂誘導 (adipogenic induction) 後，細胞顯示脂質在細胞質中蓄積並增加脂蛋白脂肪酶（LPL）的表達。在成骨誘導下，這些細胞的骨唾液蛋白（BSP）染色呈陽性，並顯示osterix的表達增加。此外，當將兩種細胞類型移植到NOD-SCID小鼠的腎囊下方時，它們都能夠在體內重建全部子宮內膜樣組織。人子宮內膜體幹細胞可作為測試子宮內膜生理學和病理學相關靶標的可靠模型。
| Organism |
Homo sapiens
| Source Organ | Human endometrium from healthy women |
| BioSafety Level | II |
| Growth Properties | Adherent |
| Morphology | Fibroblast-like |
| Population Doubling | Proliferation ceases after about 20 weeks of culture. |
| Disease | Normal |
| Isolation | Endometrial Somatic Stem Cells are isolated based on the Side Population (SP) technique- a method that replies on the capability of cells to exclude the DNA binding Hoechst 33342 dye. Cells are labeled and sorted by flow cytometry based on low Hoechst 333. |
| Description |
A specialized somatic stem cell (SSC) population in the human endometrium, often identified by using the Side Population (SP) technique, is thought to mediate the endometrial regeneration. The Human Endometrial Somatic Stem Cells are established from human endometrial side population cells, specifically from the Epithelial fraction (ICEp; Cat. No. T4107) or the Stromal fraction (ICEs; Cat. No. T4108). Both cell types retain the ability to undergo osteogenic and adipogenic differentiation in vitro . After adipogenic induction, the cells show lipid accumulation in the cytoplasm and increased expression of lipoprotein lipase (LPL). When under osteogenic induction, the cells stain positive for bonesialoprotein (BSP) and show increased expression of osterix. Furthermore, both cell types are capable of reconstructing total endometrial-like tissue in vivo when transplanted beneath the renal capsule of NOD-SCID mice. The Human Endometrial Somatic Stem Cells serve as a reliable model to test relevant targets for endometrial physiology and pathology. |
| Materials from | IVI Foundation (C/ Catedrático Agustín Escardino nº 9, PARC CIENTIFIC UNIVERSITAT DE VALENCIA Edificio 3, CUE. 2ª Planta. Despacho 2.02 46980 Paterna (Valencia) Tel. +34 96 390 33 05· Fax +34 96 390 25 22 ) |
| Applications | For Research Use Only |
| Markers | 1) Purity and origin of cells are confirmed by expression of CD9 (epithelial marker) or vimentin (stromal marker) and CD90, CD73 and CD105 (mesenchymal attributes); 2) Undifferentiated status of the cells are confirmed by expression of OCT4, NANOG, GDF3. |
子宮內膜體幹細胞(specialized somatic stem cell, SSC)細胞株 |子宮內膜體幹細胞(specialized somatic stem cell, SSC)是根據側面群體（Side Population , SP）技術分離的，該技術依賴於細胞排除與DNA結合的Hoechst 33342染料的能力。基於低Hoechst 333，通過流式細胞儀對細胞進行標記和分類。 器官來源: 健康女性的子宮內膜Human endometrium from healthy women | 細胞培養條件: 使用PriCoat™T25培養瓶 (貨號G299)，表面塗有I型膠原組成的細胞外基質，以最佳化初代和不朽細胞的生長、增殖和擴增。或塗層細胞外基質(Applied Cell Extracellular Matrix) 增強細胞貼附 (貨號G422)。Grow cells in ECM-coated culture vessels with the following conditions. 培養液PriGrowIV (貨號 TM004)。為了製備完整的生長培養基，將下列組分添加到基礎培養基中：胎牛血清（TM999）至最終濃度10％，2 mM L-glutamine (G275)，和Penicillin/Streptomycin青黴素/鏈黴素溶液（G255）至最終濃度為1％。二氧化碳（CO2）：5％，溫度：37.0℃。
黴漿菌PCR偵測 | DAPI染核 | 細胞內黴漿菌去除劑 | 水浴槽抑菌劑 | 噴霧式去黴劑 等系列商品
Abmgood不朽化系列商品 (immortalized reagenet) Ready-to-use
Abmgood公司於人類與老鼠不朽之細胞株上，具有幾十年的實驗經驗；提供一系列不朽 (immortalized)化之細胞株、及不朽化之試劑商品。ready-to-use定量好之retrovirus、lentiviru、 adenovirus，可直接加於細胞中進行感染表現；病毒液包括有SV40重組病毒、EBV重組病毒、hTERT病毒液、Myc基因病毒液、p53基因病毒液、Rb基因病毒液、Ras基因病毒液。提供106及109兩種包裝力價之病毒液；亦提供一系列病毒力價濃縮與定量試劑商品。
細胞不朽化的工具中，SV40 T antigen是最簡單且最常用來造成不朽化細胞生成的方法。多數的病毒基因和抑癌基因（p53、Rb等）的不活化相關，會誘導細胞處於replicative senescence的階段。目前也有研究顯示被感染的細胞，SV40 T anbtigen會誘導端粒酶（Telomerase）的活性。與端粒（telomere）長度相關的Telomerase Reverse Transcriptase protein (TERT)是一種不朽細胞的研究應用。平常細胞中，hTERT是處於不活化態，必要時會進行活化保持telomere的長度，避免細胞發生replicative senescence的現象。某些細胞hTERT 過度表現（over-expression）對於誘發細胞不朽化是無效的（如初代上皮細胞），反而會造成細胞死亡；同時表現hTERT catalytic subunit以及p53或RB siRNA在人類初代卵巢上皮細胞會造成細胞不朽化。過度表現Ras或Myc T58A mutants也有初代細胞不朽化的現象產生。
Decomplement加熱非活化FBS：
1.讓FBS瓶在4°C下完全解凍過夜。
2.將FBS瓶置於56°C的水浴中30分鐘。
Decomplemented FBS可以在-20°C下長期保存。避免頻繁的凍融循環。每2-3天更換一次完整的媒體。不要讓介質顏色變為黃色。
Thawing細胞解凍方法：(每種細胞建議條件可能有許不同，依照原廠建議操作，以下為通用方式)
1.在37℃水浴中解凍小瓶，直到只有一小塊冰塊。
2.將細胞轉移到含有5ml pre-warmed complete media 之15ml管中。
3.將細胞以290xg離心5分鐘。
4.小心丟棄上清液，不要打擾細胞沉澱，輕輕地上下移液，將細胞重新懸浮在1ml完全培養基中。
5.將細胞培養在150,000-200,000個細胞/ cm2。
Subculture細胞繼代方法: (每種細胞建議條件可能有許不同，依照原廠建議操作，以下為通用方式)
1.當細胞70-90％ confluency時，建議繼代培養。
- Aspirate old media。懸浮液中的一些細胞仍然是活細胞。或者，也可以收集含有懸浮細胞的上清液並離心（Skip to Step 6 in protocol）。
3.加入1：1比例的1X無菌PBS和0.25％胰蛋白酶-EDTA（TM051）。
4.在室溫下孵育細胞3-5分鐘並攪拌培養容器直至90％的細胞脫落。
- 中和胰蛋白酶:添加等量之trypsin + PBS。
6.收集細胞並以290xg離心5分鐘。
7.丟棄上清液，輕輕地上下移液，將細胞重新懸浮在完全培養基中。
8.建議split ratio比不超過1：3。
Freezing細胞凍結：(每種細胞建議條件可能有許不同，依照原廠建議操作，以下為通用方式)
Complete growth medium with decomplemented FBS to a final concentration of 50% from PAN Biotech (P40-37500) or from Nucleus Biologics (FBS1824-001) and 5% DMSO.
儲存溫度：液氮氣相。重要提示：此細胞係對FBS批次非常敏感。我們強烈建議最終用戶使用從PAN biotech或Nucleus Biologics 之FBS。
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