【LB Broth/LB Agar培養基】NEOGEN貨號NCM0088A/NCM0142A (Miller配方)

微生物之檢驗方法－Escherichia coli DH5 a培養

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LB Broth (Miller)| 貨號LAB169 / NCM0088A

LB培養基（Miller）（Lysogeny broth，LB），是微生物學實驗中最常用的營養性培養基，用於培養大腸桿菌等細菌之生長和維持。分為液態培养基和加入瓊脂製成的固態培養基。Minimum QC organisms: Escherichia coli DH5 a(ATCC® 53868)。LB Broth(Miller)培養基用於分子微生物學程序中使用的大腸桿菌菌株的生長和維持，營養豐富，旨在用於重組菌株純培養物的生長。大腸桿菌在LB培養基中生長至對數後期(late log phase)。一些vectors載體無需選擇性擴增(selectively amplified) 即可複製至高拷貝數(high copy numbers)。一些載體不能自由複製，需要選擇性擴增。可以加入氯黴素(Chloramphenicol)以抑制宿主合成並防止細菌染色體複製。LB Broth(Miller)培養基含有高含量的氯化鈉(sodium chloride)，有助於維持plasmids。如果使用lambda噬菌體 (temperate bacteriophages)，建議添加2g / l的硫酸鎂(magnesium sulphate)以促進噬菌體吸收(phage absorption)。如果需要，可以在滅菌後對培養基進行無菌葡萄糖(glucose)補充。

酵素萃取物Yeast Extract ————————-5.0g / L

酪蛋白酶消化(Enzymatic Digest of Casein )————————-10.0g / L

Sodium Chloride——————————————————-10.0g / L

蒸餾水 _________________1000ml

，經 121℃滅菌 15 分鐘，最後 pH 值為7.3 ± 0.2。

將25克培養基溶於1升純淨水中。如有必要，經常攪拌加熱以完全溶解Medium。在121℃下高壓滅菌15分鐘。等冷去後，最終pH：7.3 ± 0.2, 25℃分裝於Petri dish培養皿中。

檢驗方法：檢體經系列稀釋後，以平板計數培養基培養及計數之方法。 2.1. 工作環境：工作平台須寬敞、潔淨、光線良好，操作平台光度為 100 呎燭光以上，密閉室內換氣良好，儘可能沒有灰塵及流動空氣。每 15 分鐘落菌數不得超過 15 CFU/培養皿。更多資料來自FDA生菌數之檢驗 (參考方法)。

LB Agar (Miller配方)培養基 | 貨號NCM0142A

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LB培養基（Lysogeny broth，LB）廣泛解釋爲Luria-Bertani培養基，依據其發明人貝爾塔尼（Giuseppe Bertani）的說法，這個名字來源於英語的 Lysogeny broth，即溶菌培養基。Luria-Bertani培養基是微生物學實驗中最常用的營養性培養基，用於培養大腸桿菌(E. coli i) 等細菌，Broth加入瓊脂(Agar)製成的固態培養基。加入抗生素的 LB 培養基(LB Broth) 可用於篩選大腸桿菌爲宿主的cloning。

產品介紹: LB Agar（Miller）是一種營養豐富的培養基，設計用於培養重組菌(recombinant strains) 的純培養物，它基於Miller描述的配方。大腸桿菌在LB培養基中生長至對數晚期 (late log phase)。一些plasmid vectors複製到high copy number並且不需要選擇性擴增。一些載體不能如此自由地複制並且需要被選擇性地擴增。可加入氯黴素(Chloramphenicol)以抑制宿主合成(host synthesis)並防止細菌染色體(bacterial chromosome)的複製。LB Agar，Miller含有10 g / L的氯化鈉，與Lennox配方中的含量不同。這允許研究人員為特定菌株選擇最佳鹽濃度。培養基可以無菌補充葡萄糖glucose或抗生素antibiotics。註明: Product was previously known as Acumedia Product: 7213 LB Agar (Miller); and LabM Product: LAB168 LB Agar (Miller)。氯化鈉的量經常隨細菌的生長需求不同而有所改變LB-Miller (10 g/L NaCl)、LB-Lennox (5 g/L NaCl)、LB-Luria (0.5 g/L NaCl)。

胰蛋白腖 (Tryptone )————————————- 10.0 g / L

酵母抽提物(Yeast Extract ) ———-5.0g / L

Sodium Chloride ————————10.0g / L

Agar—————————–15.0 g/L

Preparation培養基使用方法: 將40克培養基溶於1升純淨水中。如有必要，經常攪拌加熱以完全溶解Medium。在121℃下高壓滅菌15分鐘。等冷去後，最終7.0 ± 0.2 at 25°C, 25℃分裝於Petri dish培養皿中。

檢驗方法：檢體經系列稀釋後，以平板計數培養基培養及計數之方法。 2.1. 工作環境：工作平台須寬敞、潔淨、光線良好，操作平台光度為 100 呎燭光以上，密閉室內換氣良好，儘可能沒有灰塵及流動空氣。每 15 分鐘落菌數不得超過 15 CFU/培養皿。

Product #	Product Description
NCM0142A	LB Agar (Miller), 500 g
NCM0142B	LB Agar (Miller), 5 kg
NCM0142C	LB Agar (Miller), 10 kg
NCM0142D	LB Agar (Miller), 25 kg (European only size)
NCM0142E	LB Agar (Miller), 50 kg (US only size)

更多資料來自FDA生菌數之檢驗 (參考方法)

文獻References

European Pharmacopoeia 9th Edition (2017) 2. United States Pharmacopeia National Formulary 2017: USP 40 NF 35 3. Japanese Pharmacopeia 17th Edition (2017) 4. Sabouraud, R. 1892. Ann. Dermatol. Syphilol. 3:1061. 5. Jarett, L., and A. C. Sonnenwirth (eds.). 1980. Gradwohl’s and parasitic infections, 7th ed. American Public Health Association, Washington, D.C.