基因型鑑定產品介紹 | 最簡單gDNA萃取方法 (100ml/500個反應) 貨號102-T

免去Column、免去Phenol/Chloroform純化、一個步驟同管萃取gDNA方法

DirectPCR Lysis Reagent (mouse tail)

生物樣品的粗提物，無法直接PCR反應；因組織內含有PCR反應抑制因子，抑制PCR反應。須經由有機溶劑或kit萃取gDNA。Viagen Biotech Inc.“專利研發”具有抑制PCR抑制物的反應，不須考量PCR抑制問題，所得的DNA提取物與基因組PCR相容，可直接進行基因分型( genotyping) 。使用方法只要一個加熱步驟反應，即可將DNA由組織中快速釋放，不須經由任何純化的步驟 (不需Geneaid genomicDNA purification或有機溶劑Phenol/Chloroform純化步驟)，加熱完後的溶液可以直接PCR，並進行genotyping分析。ViagenDirectPCR®DNA提取系統是一種單管系統，用於從小鼠尾巴 (mouse tails)，耳朵 (ear pieces)，卵黃囊 (yolk sac) 和培養細胞 ( culture cells) 中快速製備DNA。DirectPCR Lysis Reagent (mouse tail), Cat# 101-T( 50m l包裝), Cat#102-T( 100m l包裝)

最經濟的萃取試劑 500次尾巴 ( 0.5c m尾巴加入200ul為例 )。

Brief procedure:

1.  Lyse tails in DirectPCR® Lysis Reagent.
2.  Incubate for 45 min at 85°C.
3.  PCR genotyping with 1 µl lysates.

DirectPCR DNA Extraction Reagents	Cat#	Comments
DirectPCR Lysis Reagent (mouse tail)	[101-T]	250 mouse tails (50 ml)
DirectPCR Lysis Reagent (mouse tail)	[102-T]	500 mouse tails (100 ml)
DirectPCR Lysis Reagent (yolk sac)	[201-Y]	yolk sacs (50 ml)
DirectPCR Lysis Reagent (yolk sac)	[202-Y]	Yolk sacs (100 ml)
DirectPCR Lysis Reagent (cell	[301-C]	cultured cells (50 ml)
DirectPCR Lysis Reagent (cell)	[302-C]	cultured cells (100 ml)
DirectPCR Lysis Reagent (mouse ear)	[401-E]	mouse ear (25 ml)
DirectPCR Lysis Reagent (mouse ear)	[402-E]	mouse ear (50 ml)

【產品問與答】

VIAGEN BIOTECH產品如何分類?

VIAGEN BIOTECH將產品分為四種，視客戶需求選擇不同產品: 其分類有尾巴genomic DNA萃取、細胞genomic DNA萃取、耳朵genomic DNA萃取、卵黃囊genomic DNA萃取。

【產品問與答】

傳統尾巴gDNA萃取, 都須經由Phenol/Chloroform萃取步驟, 或者市售genomic DNA Purification套組(通過column等繁瑣步驟)來純化genomic DNA, 為何VIAGEN BIOTECH公司出售的產品, 可以一個步驟完成反應?

傳統萃取 “尾巴gDNA”，無法直接PCR；因組織內含有PCR反應抑制因子，抑制PCR反應。須經由有機溶劑或kit萃取gDNA。“專利研發” DirectPCR Lysis Reagents具有抑制PCR抑制物的反應，不須考量PCR抑制問題。VIAGEN BIOTECH公司專門以DirectPCR Lysis Reagent銷售為事業， 其公司研發、生產、銷售。品質穩定，銷售第一。

【產品問與答】

genomic DNA沒有經由萃取步驟,不知genomic DNA品質如何?genomic DNA的穩定性如何?

VIAGEN BIOTECH專門為genomic DNA萃取而設計，PCR反應後產物, 可以大於15Kb, 尾巴經由DirectPCR Lysis Reagent後, 其在4度C，可以維持不變的效能。在-20度C, 可以維持1年品質都不會改變。

【產品問與答】

尾巴經由DirectPCR Lysis Reagent後，如何純化Crude lysates?

DNA in crude lysates can be rescued for further analysis. Add NaCl to a final concentration of 250mM , and then add 0.7 volume of isopropanol. DNA will form precipitates. Centrifuge at 4°C for 2 min, discard supernatant, wash DNA with 1 ml 70% EtOH, and dissolve DNA in 50 μl 10 mM Tris-HCl (8.0). Use 1 μl for PCR.

【產品問與答】

需要添加Proteinase K嗎?

需要，Proteinase K 0.2 -0.4 m g/ml ，若需訂購Proteinase K，請按此 分子等級重組蛋白酶K (20 mg / ml溶液) | 貨號9211

產品描述：一種絲氨酸蛋白酶 (serine protease)，具有天然蛋白質的能力，從而在不依賴變性過程的情況下inactivating DNase和RNase等酶。 它在SDS和尿素存在下保持其活性。 它被二異丙基氟磷酸酯（diisopropyl fluorophosphates, DFP）和苯基甲磺酰氟（phenyl methane sulfonyl fluoride , PMSF）inactivated。

Alternate Name	Protease K, Endopeptidase K, Tritirachium alkaline proteinase, Molecular Biology grade Proteinase K
Gene Symbol	PROK
Gene ID	5621
Accession #	P06873
Source	Tritirachium album
Appearance	Liquid
Physical Form Description	Recombinant Proteinase K dissolved in water to a final concentration of 20 mg/ml.
Purity by SDS-PAGE	≥90%
Handling	Centrifuge the vial prior to opening.

 分子等級重組蛋白酶K (溶液) | 分子等級重組蛋白酶K 100 mg | NGS等級重組蛋白酶K 100 mg