細胞培養基的外泌體分離試劑盒 | Exosome Isolation Kit for Cell Culture Media APExBIO貨號K2707

A kit for rapid extraction of exosomes from cell culture medium (Precipitation Method)

產品介紹

外泌體(Exosomes )是一類直徑約30-150 nm的囊泡狀結構(vesicle-like structures )，由細胞經由胞吐作用(exocytosis)釋放到細胞外環境。它們存在於幾乎所有生物體的體液中，包括血液(blood)、尿液(urine)、唾液(saliva)、乳汁(milk)和體外培養的細胞上清液。外泌體(Exosomes )是細胞間通訊的重要工具，可以攜帶和遞送蛋白質、脂質、RNA和DNA等多種生物分子，在調節免疫反應、促進組織修復、傳遞遺傳訊息等方面發揮重要作用。

用於細胞培養基的外泌體分離試劑盒(Exosome Isolation Kit)是一種利用聚合物沉澱物(polymer precipitation)從細胞培養基中高效、簡單、快速萃取外泌體的試劑盒。該試劑盒不需要超速離心或超濾，只需簡單的低速離心即可直接從細胞培養上清液中獲得大量完整且高純度的外泌體。此試劑盒對設備要求低，耗時少，且不含 RNases/DNases/蛋白酶。使用此試劑盒萃取的外泌體可用於蛋白質分析、核酸分析、Western Blot、PCR、RNA萃取、高通量定序、外泌體粒徑和濃度分析（奈米顆粒示蹤分析，NTA）、電鏡分析和細胞分析。本試劑盒適用於從細胞培養基萃取外泌體，不適用於從血清/血漿中純化外泌體。-80℃長期保存時，外泌體可分裝，避免反覆凍融循環。

1. 樣品製備：

1) 在適當的條件下培養細胞。當細胞密度達到70%-80%時（以對數計）生長期），在細胞中添加不含外泌體的含血清培養基或無血清培養基。繼續培養12-24 h，當細胞密度達到90%-100%時收集細胞上清液。

將收集的細胞在 4°C、500 g 下離心 5 分鐘，輕輕緩慢地將上清移入新的培養皿中。然後將新所得的上清液在4℃、10000-16500g離心30min，輕輕地、緩慢地將上清液吸至新的離心管中。

最佳化: 將所得上清液經由 0.22 μm 注射器過濾器過濾，並將過濾後的上清液轉移至新離心管。使用超濾管（10-100KDa）將上清液濃縮到一定程度。這然後從超濾管的體積收集器收集濃縮的上清液隨後的外泌體萃取。

2. 外泌體萃取(Exosome extraction)

1) 細胞培養基以外泌體分離試劑呈黏稠狀。使用前充分混合。
2) 每1 mL製備的上清液中加入190 μL細O/N
3) 4°C 10000 g 離心 30 分鐘，用 1 mL 移液器吸頭小心棄去上清液，
小心不要觸摸顆粒。顆粒中含有外泌體。所得的外泌體可以用適量的PBS或生理食鹽水重懸，10mL細胞培養基可用0.1-1mL重懸浮液重懸。沉澱後可直接用於後續實驗。

部分樣本非外泌體雜質較多，可能會導致大量沉澱，且可以透過離心去除雜質。用 PBS 重懸沉澱，然後 12000 g 離心4°C 2 分鐘並收集上清液。若沉澱較大，可將上清液短暫離心數次，直至無明顯沉澱。

APExBIO台灣代理商

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APExBIO提供優質的胜肽和生物分析試劑，廣泛產品線如Protease、Chromatin/Epigenetics表觀遺傳學、MAPK Signal、DNA Damege/DNA repair、細胞凋亡、腫瘤生物學、Stem cell等研究領域， 還提供定制的服務，包括多肽合成，抗體的生產和檢測的發展。產品線DNA/RNA prep kit、Drug Screening panel、Bioactive peptides、Growth factors、Biotinylation Reagents、tag peptides、amino Acids、Growth factors等。APExBIO產品質量都伴隨著證書的分析，高效液相色譜，質譜，和HMNR數據。

產品貨號	產品品項	反應數	產品介紹連結
K2249	MTT細胞增殖檢測試劑盒	500T/2500T	操作手冊
K2262	中性紅血球增殖檢測試劑盒	500T	操作手冊
K2234	Alamar Blue 細胞活力檢測試劑盒	5ML/25ML/100ML	操作手冊
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