脫蛋白樣品製備試劑盒 | Deproteinizing Sample Preparation Kit貨號PI-0103 

Deproteinizing Sample Preparation Kit

產品介紹: 蛋白質和各種酶活性的存在經常干擾生物樣品中小分子的分析。許多生物測定需要在分析前從樣品中去除蛋白質。生物化學及相關領域的基本要求是能夠去除所研究樣品中的那些會以多種方式（物理和化學）方式干擾分析的成分。當所討論的分析物是小分子時，蛋白質、核酸和碳水化合物等大分子的存在會嚴重損害分析。在過去半個世紀開發的脫蛋白方案中，高氯酸（PCA）沉澱已經廣泛應用於許多不同的樣品製備程序，因為它不僅可以去除大部分存在的蛋白質，而且還可以穩定許多小分子分析物。通常使用丙酮(acetone)、高氯酸 (perchloric acid, PCA)、偏磷酸 (metaphosphoric acid, MPA)、磺基水楊酸 (sulfosalicylic acid, SSA) 或三氯乙酸 (trichloroacetic acid, TCA) 等化學物質之一透過沉澱去除蛋白質。PCA去蛋白化方法已經成功應用於定量小分子陣列（包括糖原，ATP，cAMP，穀胱甘肽，抗氧化劑等）之前的準備樣品中。新設計的脫蛋白樣品製備試劑盒(Deproteinizing Sample Preparation Kit) 利用高氯酸 (perchloric acid, PCA)沉澱法，提供獨特的工具準備樣品用於分析各種小分子。除蛋白質沉澱外，去除多餘的高氯酸 (perchloric acid, PCA)，樣品最後被中和。使用該試劑盒製備的樣品可直接用於各種生物測定。該方法方便，方便，可用於製備大量樣品。

圖：血清樣本的去蛋白。依照試劑盒方案，使用不同量的 PCA 對 400 µl 血清進行去蛋白化。測量溶液中剩餘的蛋白質濃度 OD280 (♦) 和樣品 pH (•)。將樣本（純血清；透過 10kD MW 截止過濾器過濾並經過 PCA 處理的血清）稀釋 20 倍，以便於測量 280 nm 的 OD。將相同 PCA 處理的樣品的單獨等分部分與 pH 7.75 測定緩衝液以 1:1 混合，並測定混合物的 pH 值。此圖顯示，在所得檢測 pH 值保持在目標檢測 pH 值約 0.5 個 pH 單位的範圍內時，可以容忍高達 20% 的樣品/PCA 比率誤差。使用 10 kDa MW 截止過濾器可去除約 98% 的蛋白質，而 PCA/樣本比例為 1:4 時的 PCA 沉澱物可去除約 95% 的蛋白質。

Components	Identifier	200 tests
Neutralization Solution	NM	1 x 4ml
PCA	WM	1 x 20ml

脫蛋白樣品製備方案 (Deproteinizing Sample Preparation Protocol)

This procedure may be scaled to handle a wide range of sample sizes.

1. 蛋白質沉澱(Protein Precipitation) : For samples with a protein concentration < ~20 mg/ml (tissue homogenate, cell lysate, urine, etc.), to 500 µl of sample, add 100 µl of ice cold PCA in a 1.5 ml microfuge tube, vortex and place on ice for 5 min. Centrifuge at 13,000 x g for 2 min. Transfer precisely 480 µl of the supernatant to a fresh tube. For serum and other samples with a high protein concentration, to 400 µl of sample, add 100 µl of ice-cold PCA, place on ice for 5 min. Centrifuge at 13,000 x g for 2 min. Transfer precisely 380 µl of the supernatant to a fresh tube. Depending on the nature of the analyte, PCA treated samples may be stored at -70°C for up to a month.根據分析物的性質，PCA 處理的樣品可在 -70°C 下保存長達一個月。

2. 樣本中和(Sample Neutralization): To the clear supernatant obtained after centrifugation, add 20 µl of shaken ice-cold Neutralization Solution and vortex briefly to neutralize the sample and precipitate excess PCA. There will be some gas (CO2) evolution so vent the sample tube. Place on ice for 5 min then spin briefly. Samples are now deproteinized, neutralized, and PCA has been removed. The samples may now be used in a variety of assays directly.短暫渦旋以中和樣本並沉澱過量的 PCA。將會產生一些氣體 (CO2)，因此請對樣品管進行排氣。置於冰上 5 分鐘，然後短暫旋轉。樣品現已被脫蛋白、中和，並且 PCA 已被去除。這些樣品現在可以直接用於各種測定。

AkrivisBio品牌介紹

AkrivisBio 是生命科學和生物技術產業研究產品的提供者。 「Akrivis」來自希臘語，意思是精確，集中體現了我們的目標、Bio、我們的領域。我們的產品始於各種化學、生化和酵素活性測定。我們設計它們比其他公司提供的產品更容易使用、更具可重複性且更便宜。我們希望看到我們的檢測方法在尋找癌症、糖尿病、肥胖、神經退化性疾病和其他領域解決方案的生化研究中發揮重要作用。我們努力及時向客戶提供最好的產品。我們相信卓越、勤奮、創造力和承諾。我們對科學充滿熱情，致力於為客戶提供有價值的產品、專家建議和無可挑剔的客戶支援。我們擁有全球經銷商網路。