DPPH 自由基清除能力測定試劑盒| DPPH Free Radical Scavenging Capacity Assay Kit-AK0036

DPPH Free Radical Scavenging Capacity Assay Kit-Spectrophotometer/ Microplate reader (100T/48S)

測定意義：

DPPH自由基(DPPH free radical )是一種非常穩定的以氮為中心的自由基。它是樣品抗氧化能力的重要指標之一，廣泛應用於抗氧化食品(antioxidant foods)、保健品(health products)和藥品(pharmaceuticals)的研究。DPPH自由基(DPPH free radical )具有單電子，其醇溶液呈紫色，在515 nm處有強吸收。當抗氧化劑存在時，DPPH自由基(DPPH free radical )被清除，溶液顏色變淺，515 nm處的吸光度降低。在一定範圍內，吸光度的變化與自由基清除程度成正比。在該試劑盒中，樣品去除DPPH自由基(remove DPPH free radicals )的能力是通過吸光度下降的程度來反映的。

Components:
Extract solution: Liquid 80mL×1. Storage at 4C.
Reagent I: Absolute ethanol 30mL×1. Self-provided reagent
Reagent Ⅱ : Powder×1. Storage at 4C. (0.6 mL EP tube placed in 8 mL reagent bottle).
Add 4.05 mL of reagent I before use to shake and dissolve. Unused reagents can be stored at -20C for one month. It is recommended to store them separately; According to the required amount of the test sample to prepare Working solution: reagent II: reagent I (V: V) =4:21. The unused working solution can be stored at 4C for a week; The working fluid needs to be temporarily prepared before use .
Reagent III: Powder×1, Storage at 4C. Add 1mL extract solution before use to prepare 10mg/mL positive control tube.

需要但未提供的試劑和設備
分光光度計(Spectrophotometer) /microplate reader、water bath、離心機(centrifuge)、微型玻璃比色皿(micro glass cuvette)/96孔平底板(96 well flat-bottom plate)、電機/研磨機( grinder)、無水乙醇( absolute ethanol)、烘箱(oven)、30-50 mesh sieve篩和蒸餾水。

操作流程-樣品製備
1、組織樣品(Tissue samples)：將新鮮樣品在60℃烘箱中乾燥至恆重，在研缽（或研磨機）中研磨，過30-50mesh sieve。稱取約0.05 g樣品，加入1 mL提取液，40℃水浴浸提30 min。室溫下 10,000 rpm 離心 10 分鐘。取出上清液並將其置於冰上進行測試。

2. 血清(Serum)、果汁(juice)或其他液體樣品：
吸取 100 μL 樣品溶液至 900 μL 提取液中，渦旋混勻，室溫 10,000 rpm 離心 10 min，取上清液，置於冰上備用。測試。
3.可以將提取物（或藥物）製備成一定濃度，例如5mg/mL。注意事項：不同樣品去除DPPH自由基的能力可能存在較大差異。為保證實驗結果的準確性，應根據預實驗結果對樣品進行適當調整（若去除率大於90%，建議用提取液稀釋提取的樣品；去除率低於5%，建議增加乾燥樣品的質量或提取液體樣品的體積。

操作流程-樣品製備

操作流程-結果計算

注意事項：

1、不同樣品的DPPH自由基清除能力可能存在較大差異。如果要比較不同樣品的DPPH自由基清除能力，建議在同一批樣品中加入等量的樣品：將紅酒、組織勻漿、果汁等液體樣品加入到相同的體積；將提取物（或藥物）配製為相同的濃度。比較時根據預實驗結果適當調整樣品，比較相同濃度（相同稀釋倍數）的清除率。

2. 樣品建議在提取當天進行檢測。

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