【TB Medium培養基/DH5α大腸桿菌菌株】Terrific Broth, Modified Neogeon NCM0278

微生物－重組大腸桿菌菌株之培養

Terrific Broth, Modified (Tartoff&Hobbs ) | TB Medium 貨號NCM0278

Tartoff和Hobbs開發了 Terrific Broth Modified (貨號NCM0278)，用於培養重組大腸桿菌菌株，Tartoff-Hobbs Medium支持高細胞密度和並在對數階段長期保持增長，提供了更高的重組蛋白質和質體DNA (plasmid DNA)的產量。可提高質體DNA (plasmid DNA) 的得率轉化大腸桿菌，是質體DNA (plasmid DNA)製備的常用培養基。Terrific Broth Modified培養基，具有較高量之酪蛋白酶解產物(Enzymatic Digest of Casein) 及酵母提取物(Yeast Extract) 作為必需的營養物質和輔助因子。兩種磷酸鹽對培養基提供良好的緩衝作用。甘油(Glycerol)被用作碳水化合物來源，與葡萄糖不同，甘油並非發酵成乙酸(acetic acid)。具比其它液態培養基生長慢，最終細胞密度和質體產量為2-4倍高。

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酵母提取物 (Yeast Extract ) ——————————————–24.0g / L

酪蛋白酶消化(Enzymatic Digest of Casein )————————-12.0g / L

Dipotassium Phosphate—————————————————-9.4g / L

Monopotassium Phosphate————————————————2.2g / L

蒸餾水 _________________1000 ml

* Supplement Glycerol, 8 mL，經 121℃滅菌 15 分鐘，最後 pH 值為7.2 ± 0.2。

將47.6克培養基溶於1升純淨水中 (需自己補充8 mL glycerol)。如有必要，經常攪拌加熱以完全溶解Medium。在121℃下高壓滅菌15分鐘。等冷去後，最終7.2 ± 0.2 ，於25℃分裝於Petri dish培養皿中。

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檢驗方法：檢體經系列稀釋後，以平板計數培養基培養及計數之方法。 2.1. 工作環境：工作平台須寬敞、潔淨、光線良好，操作平台光度為 100 呎燭光以上，密閉室內換氣良好，儘可能沒有灰塵及流動空氣。每 15 分鐘落菌數不得超過 15 CFU/培養皿。

文獻References

Tartoff, K. D., and C. A. Hobbs. 1987. Improved media for growing plasmid and cosmid clones. Bethseda Research Laboratories Focus 9:12. 2. Sambrook, J., E. F. Fritsch, and T. Maniatis. 1989. Molecular cloning: a laboratory manual, 2nd ed. Cold Spring Harbor Laboratory, Cold Spring Harbor, N.