BioVision的蛋白質提取和純化產品系列

BioVision的蛋白質提取和純化產品系列包含抗生素，細菌細胞的細胞裂解劑，細胞級分試劑盒，洗滌劑，磷酸酶和蛋白酶抑製劑雞尾酒，標籤抗體和蛋白質定量試劑盒。其中胞器蛋白分離試劑盒可以分離胞質，細胞器，線粒體，核，質膜和細胞骨架級等商品。另外還包括用於分離基因組和/或線粒體DNA的試劑盒。洗滌劑系列包括高品質的非離子洗滌劑（NP-40，Triton X-100，Tween-20，Tween80，OG，OTG），兩性洗滌劑（CHAPS，ASB-14，磺基甜菜鹼3-16）和離子洗滌劑（SDS）。亦提供磷酸酶和蛋白酶抑制劑混合物作為即用型抑制劑，並且包括多種多樣的組合形式，包括磷酸酶和蛋白酶抑製劑。標籤抗體系包括GST-，His-，HA-，S-，CBP-，DYDDDDK-和Myc-標籤抗體，而抗HA標籤抗體也提供生物素或FITC綴合物。蛋白質定量試劑盒包括基於BCA和Bradford型蛋白質分析。

蛋白酶和磷酸酶抑制劑 | EZBlock™磷酸酶抑制劑 | Ser / Thr和鹼性磷酸酶Inhibitor | Protease蛋白酶抑制劑

胞器蛋白質分離–系列商品介紹

胞器蛋白分離的應用；探討細胞核內轉錄因子和特定DNA序列相互作用。檢測蛋白質和一段特定DNA序列(label)相互結合的技術原理: 當特定序列的DNA和某蛋白質結合後，整個蛋白質複合體分子量會增加,經由電泳後,在gel中的移動速度變慢,整個band進上可加入特定抗體檢測是否有特定蛋白質Binding( Supershift)。細胞凋亡時,粒線體膜電位去極化的過程會增加膜的通透性並使膜內蛋白,如Cytochrome C, AIF, Smac/DIABLO等分子釋放到細胞質中,引發caspase-9活化, 造成一連串凋亡反應發生. COX4蛋白位於粒腺體細胞內側, 並在Apoptosis發生時依舊保留在粒線體內。二維電泳與MDLC(液相層析)並列為研究蛋白質體學的重要技術之一。原理: 利用分子量(一維)與等電點(二維)一次可分離大約2000個蛋白質。限制: 膜蛋白(Hydrophobic)在電泳中不易看到.蛋白質若是為low abundant protein則欲得到準確而可信的實驗結果要做胞器分離( sample prefractionation) 胞器分離在2d應用的優點: 移去abundant protein 、增加 low abundant protein、減少蛋白質的複合體發生

  線粒體/細胞質分離試劑盒  | Mitochondria/Cytosol Fractionation Kit貨號K256-100

Isolates mitochondria/cytosol w/o ultracentrifugation

產品介紹: 線粒體/細胞溶質分餾試劑盒提供了獨特的試劑配方，用於從包括凋亡細胞和非凋亡細胞的哺乳動物細胞的細胞溶質部分有效分離高度富集的線粒體部分。富集的線粒體和細胞質可用於研究凋亡和信號轉導途徑，可進行凋亡研究，或用Western Blot、ELISA來檢測，目標蛋白於細胞質和線粒體的localization情況。 程序簡單易行，無超速離心和有毒化學物質。

  細胞核/細胞質分離試劑盒 Nuclear/Cytosol Fractionation Kit | 貨號K266-100

產品介紹: 試劑盒內包含，分離哺乳動物細胞的細胞核和細胞質所有試劑，不僅能夠分離細胞核和細胞質蛋白質，而且可以保持蛋白質的完整性。所分離的細胞核和細胞質蛋白質可進行轉錄活性、RNA 剪接、凝膠阻滯電泳實驗、報告蛋白檢測、酶活性檢測及Western Blot 研究等。

 細胞質/胞內顆粒快速分離試劑盒| Cytosol/Particulate Rapid Separation Kit貨號K267-50

產品介紹: 蛋白質，信號分子和細胞內的其他小分子的位置和易位調節細胞生長，分化和許多其他細胞功能。 分離細胞質和顆粒級分是研究細胞組分亞細胞定位的重要一步。 然而，傳統方法通常需要數小時才能從細胞質中分離細胞質，因此在分離過程中，某些細胞成分，特別是小分子和代謝物正在擴散或重新分佈。 新的Cytosol / Particulate快速分離試劑盒將細胞溶質與顆粒狀物質快速分離，通過油層，因此兩部分不會相互接觸或擴散。 使用該方法，即使對於小分子也可以避免污染。 可以準確地進行亞細胞定位和感興趣因素的分析。

 哺乳細胞 / 膜蛋白抽提試劑盒Membrane Protein Extraction Kit | 貨號K268-50  

Extracts membrane proteins within an hr.

產品介紹: 膜蛋白提取試劑盒提供優化的緩衝液和試劑，用於從哺乳動物組織和細胞中有效提取膜蛋白。 與其他只能提取總細胞膜蛋白（血漿和細胞膜蛋白的組合）的其他可用程序不同，BioVision的試劑盒不僅提取總細胞膜蛋白，而且還專門純化質膜蛋白。該方法提供一致的產量和高純度（超過90％）。 使用試劑盒製備的膜蛋白可用於各種應用，如Western印跡，2-D凝膠和酶分析多種檢測方法。整個過程需要不到1小時。

  四合一胞器分離試劑盒FractionPREP™ Cell Fractionation Kit貨號K270-50

產品介紹: 該試劑盒能從一個哺乳動物樣本中抽提出四種蛋白質，細胞質、細胞核、膜/顆粒及細胞骨架組分等。方法簡單、快速，整個過程只需2 小時、不需超高速離心, 快速萃取細胞質、細胞膜、細胞核、細胞骨架等細胞內蛋白質；；結果重複性好； 所分離的蛋白質可用於一維或二維電泳，適用於各類蛋白質分析實驗。如SDS-PAGE、2D Gel electrophoresis、Western blot、ELISA、EMSA、RNA splicing、translocation、reporter assays、酵素活性分析等實驗。 應用種類：細胞、組織皆適

胞器蛋白分離的操作方式

以FractionPREP Cell Fractionation Kit的操作方法為例:其它組kit方法雷同

操作方法

1. 收集4~8×106~400mg組織/1ml PBS,700xg離心5分, 以5~10ml的預冷PBS wash,後以700xg再離心5分
2. 將細胞重新懸浮於1ml的預冷PBS,700xg 離心5分,並移去supernatant.
3. 加入400ul cytosol extraction buffer-mix(已加DTT及Protease inhibitor cocktail) pipette數次以混合細胞
4. 冰上放置20分鐘作用, 每5分翻轉3~4次
5. 將sample700xg離心10分鐘, 並收集supernatant—-

à所得到為cytosolic fraction

6. 將留下的pellet再加入400ul 預冷的membrane extraction buffer A mix,  pipetter 10~15秒以混合均勻
7. 加入22ul的membrance extraction buffer-B 振盪5秒後冰上靜置1分
8. 再振盪5秒後以1000xg離心5分,收集supernatatn於預冷的tube

à所得為membrane/partivulate fraction

9. 將pellet再加入200ul預冷的Nuclear extraction buffer mix, 振盪15秒後,冰上放置40分,每10分振盪15秒
10. 高速離心10分, 將supernatant 轉移至新的預冷之tube—

à所得為nuclear fraction

11. 最後所留下的pellet,再溶於100ul buffer(0.2% SDS, 10mM DTT)irm SDS-PAGE sample buffer)

à所得為cytoskeletal fraction

產品編號	產品名稱	包裝
K270-50	FractionPREP™ Cell Fractionation Kit 四種胞器萃取一組搞定	50 assays
K256-25 K256-100	Mitochondria/Cytosol Fractionation Kit	25 assays 100 assays
K266-25 K266-100	Nuclear/Cytosol Fractionation Kit	25 assays 100 assays
K267-50	Cytosol/Particulate Separation Kit	50 assays
K269-500	Mammalian Cell Extraction Kit	500 assays
K268-50	Membrane Protein Extraction Kit	50 assays
K288-50	Mitochondria Isolation Kit For Tissue & Cultured Cells	50 assays
K280-50	Mitochondrial DNA Isolation Kit	50 assays
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K810-1000	Protein Quantitation Kit	1000 assays
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K289-50	Yeast Nuclei Isolation Kit	50 assays