Hybridoma融合瘤細胞 / 抗體subclass Isotyping Kits

融合瘤細胞在生長過程中，需初步篩選： 並非所有 B 細胞都會產生所要的抗體，小白鼠原先就存在許多 B 細胞株對抗一般疾病；因此要用 酵素免疫分析法 (ELISA) 挑出專一性抗體，再篩選專一性抗體。單株化運程中需確定每個細胞株的純系，得到穩定的抗體後，通常要再以 ELISA 方法 檢定該抗體的 subclass 是屬於 IgG, IgM 或 IgA 等。 免疫時間太短的，較可能取得 IgM，但一般仍以 IgG 較多 (IgG 又可分成幾種 sub-subclass)。單株化運程這樣所挑出來的細胞株，也許仍含有兩群以上的細胞，因此要進行單株化 。先將該細胞株稀釋，重新平分到 96 槽細胞培養盤中，計算使得每槽中只含一個細胞，俟其生長成群落後，再次以 ELISA 篩選專一性抗體。所得到的抗體再經純化步驟，以除去雜質，可用下列各種方法的組合︰硫酸銨分劃： 收集約 40% 飽和度的沉澱，是最經濟、方便的方法。離子交換法： 用 DEAE 陰離子交換法，多用在純化 IgG。膠體過濾法： 以分子量的差異分劃出各種抗體，多用在純化 IgM。親和層析法： 以 Protein A-吸著劑 專一性地吸住抗體分子 (IgG)。資料來源參考 單株抗體 – 莊榮輝 – 國立臺灣大學

 單株抗體Clonotyping分型套組-HRP | 貨號5300-05

產品介紹: SBA 單株抗體Clonotyping分型套組-HRP試劑盒，專為小鼠單克隆抗體的同型分型而設計。 它含有2.5mg捕獲抗體和1.0mL HRP綴合的抗小鼠Ig，小鼠IgA，小鼠IgG1，小鼠IgG2a，小鼠IgG2b，小鼠IgG3，小鼠IgM，小鼠κ，小鼠λ和ABTS底物。 當與Mouse Immunoglobulin Panel (SB Cat. No. 5300-01)一起使用時，該試劑盒可用於樣品（如血清，上清液和腹水）中小鼠免疫球蛋白的定量研究。此產品需由儀器進行定量 ELISA儀器設備請按此

產品規格

• Goat Anti-Mouse Ig, Human ads-UNLB
  • Goat Anti-Mouse Ig, Human ads-HRP
  • Goat Anti-Mouse IgA-HRP
  • Goat Anti-Mouse IgG₁, Human ads-HRP
  • Goat Anti-Mouse IgG_2a, Human ads-HRP
  • Goat Anti-Mouse IgG_2b, Human ads-HRP
  • Goat Anti-Mouse IgG₃, Human ads-HRP
  • Goat Anti-Mouse IgM, Human ads-HRP
  • Goat Anti-Mouse Kappa-HRP
  • Goat Anti-Mouse Lambda-HRP
  • ABTS Substrate Powder

 小鼠抗體分型快檢片 | 貨號#G616 (10片/盒)  #G617 (20片/盒)

Mouse Antibody Isotyping Kits

小鼠抗體分型快速檢測試劑套組 (The Mouse Antibody Isotyping Kit, 貨號G616) 在5分鐘內即可快速鑑定單克隆抗體的類別（免疫球蛋白IgG1，IgG2a，IgG2b和IgM）和亞類（ĸ和λ輕鏈），靈敏度相當於ELISA。樣品來源可以使用雜交瘤培養上清液(hybridoma culture supernatant)、純化的單克隆抗體樣品(purified monoclonal antibody samples)、腹水 (ascites fluid)。簡便，不需儀器設備，整個操作過程約15分鐘即可完成抗體分型。使用方法為將稀釋的樣品加入到加樣孔 (loading well) 中，待測樣品會與乳膠珠結合的抗小鼠抗體反應，依其抗體之分型，在快檢片上呈現紅色條帶。

特點

• 可靠：與標準ELISA測定具相當的結果，具Red control line表示運行成功
• 靈敏≥ 100 ng/ml (細胞培養上清液 及腹水液體樣品)
• 快速：從開始到結束5分鐘
• 簡單：只需3個步驟
• 經濟：無需設備或其他試劑
• 高度特異性：與FBS無交叉反應性

應用

該試劑盒用於快速鑑定小鼠單克隆抗體類別（免疫球蛋白IgG1，IgG2a，IgG2b和IgM）和亞類（ĸ和λ輕鏈）。

 HybriMore™, Hybridoma Cloning Factor融合瘤促進因子 | 貨號HB01-1L

Growth promoting supplement especially for hybridoma cells

產品介紹: HybriMore™ 融合瘤促進因子是培養雜交hybridoma cells時培養基中添加的特殊補充物。它可以在細胞培養過程中提供基本必要的生長因子，從而提高克隆效率，提高hybridoma cells的存活率。HybriMore™特色、提高克隆效率和細胞存活率、培養具有更好的抗體分泌和產生的融合瘤細胞、生長促進補充劑具有確定的化學成分和濃度。

Hybrimore™ , Hybiridoma Cloning Factor

圖2.單倍體融合瘤細胞成功率的比較。 來自NS-1或SP2 / 0融合伴侶的8個克隆的融合瘤細胞在含有FCS培養基的培養基中用HybriMore TM（綠色條），具有飼養層（藍色條）的FCS培養基或常規FCS培養基（白色條））單克隆化。 在顯微鏡下肉眼觀察細胞中存活的融合瘤落數。

圖3. secreting Ab加價的比較。 將融合瘤細胞（抗人轉鐵蛋白，L3B5）的克隆在包含具有HybriMore（綠色條）的FCS培養基，具有飼養層（藍色條）的FCS培養基或常規FCS培養基（白色條））的培養基中培養7天。 收集上清液，並通過ELISA測定法檢測分泌型Ab的力價。