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ViralEntry™轉導增強劑 | 病毒轉導增強劑 ViralEntry™ Transduction EnhancerG515

代理廠牌:
原廠連結:
https://www.abmgood.com
相關下載:

病毒轉導增強劑操作手冊

特點

ViralEntry™病毒轉導增強劑 |  ViralEntry™ Transduction Enhancer abmgood 貨號G515

Abm專業生產重組病毒載體(慢病毒,腺病毒和AAV),在提高病毒載體轉導(virus vector transduction efficiency)效率方面擁有15年以上的經驗。結合各方病毒經驗,並開發了多種病毒增強劑製劑(viral enhancing agents),可用於提高病毒載體轉導效率( transduction efficiency)。有效的病毒增強劑ViralEntry™,不僅有效增強慢病毒( lentiviral)和AAV載體(AAV vector )的轉導效率均顯著提高;包括原代T淋巴細胞(primary T lymphocytes )在內的多種細胞類型的轉導效率(transduction efficiency)提高了10倍以上。優於市場上的任何類似產品。2020 年,我們頂尖科學家取得了一項重大突破,開發出最有效的病毒增強劑 ViralEntry™,它不僅能顯著提高慢病毒和 AAV 載體的轉導效率,還能將包括原代 T 淋巴細胞在內的多種細胞類型的轉導效率提高 10 倍以上。這優於市場上任何同類產品。在多種細胞類型中,病毒轉導效率提升高達 10 倍。專為慢病毒表現系統設計,適用於難處理的細胞類型(例如 T 細胞和 B 細胞。易於使用:直接添加到培養基中。

操作方法

abm ViralEntry™轉導增強劑可在多種細胞中將轉導效率提高100倍。 HEK293T,HeLa,K562,原代人T細胞和原代豬脾巨噬細胞(Primary Swine Spleen Macrophages)用 Scrambled siRNA GFP 慢病毒(貨號LVP015-G)進行轉導,而不使用轉導增強劑(transduction enhancer ),而使用Abm的ViralEntry™轉導增強劑(貨號G515)。

Features:
Highly Effective
Simple Workflows
Consistent Results
Wholesale Prices

ViralEntry™簡易操作手冊說明:

A)對於貼壁和/或懸浮細胞(直接培養-適用於6孔板)

1.第一天。在感染前24小時,將您的目標細胞接種在6孔板中的2×105細胞/孔。

2.第2天。將ViralEntryTM以1:100的比例添加到培養基中,並輕輕混合。用每個孔感染最佳MOI的重組病毒。在適當的溫度(°C)下孵育細胞,然後二氧化碳(%) 條件。MOI =所用病毒的感染單位/細胞數。

3.第4天。更換生長培養基。如果重組病毒包含耐藥基因,為了產生穩定的細胞克隆,將細胞傳代培養到10厘米培養皿中進行藥物選擇。如果重組病毒包含螢光標籤,可以評估轉導效率通過在螢光顯微鏡下檢查訊號。

B)對於懸浮細胞(旋接種-適用於24孔板)T-細胞建議使用此方法

第一天

a用適當的生長培養基稀釋ViralEntryTM 1:100。輕輕混合。

b. 向24孔板的一個孔中加入400 µl 1:100增強劑混合物,並放入CO2中孵化器。

c. 加1×105無菌1.5 ml Eppendorf管中的活細胞,以1500 rpm旋轉5分鐘,吸出上清液,並用100 µl 1:100重懸沉澱增強劑混合。

d. 以最佳MOI加入重組病毒,並輕輕敲打混合。

e. 保持室溫10分鐘,同時每2-3分鐘輕輕敲打試管

f. 以3200 rpm的轉速旋轉20分鐘。

g. 輕輕地重懸細胞沉澱並將懸浮液轉移至24孔板包含400 µl稀釋的ViralEntryTM(步驟b)。適當孵育細胞溫度(°C)和二氧化碳(%) 條件。

第3天

更換生長培養基。如果重組病毒包含耐藥基因,每隔3-4天用包含藥物的介質替換介質來開始藥物選擇,直到可以鑑定出耐藥細胞。如果重組病毒包含螢光標籤,

可以通過顯微鏡檢查螢光下的信號來評估轉導效率。

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