【EdU DNA合成】直接檢測DNA合成或細胞週期S期合成的方法

測量DNA增殖的最準確方法是直接測量DNA合成，最常用的方法是使用基於抗體的核苷類似物(nucleoside analog)溴脫氧尿苷（bromo-deoxyuridine , BrdU）檢測。EdU（5-乙炔基-2′-脫氧尿苷）是胸腺嘧啶核苷的替代品，它是BrdU的替代品，它也用於DNA增殖檢測，比BrdU檢測更簡單，更快。在EdU染色中，EdU被樣品中的細胞摻入新合成的DNA中。然後加入螢光疊氮化物，例如Green Fluorescence。螢光疊氮化物小到足以在天然組織和DNA中自由擴散，並且在“點擊”化學反應中共價交聯到EdU。與使用BrdU相比，EdU染色的主要優點是: EdU染色無需進行苛刻的DNA水解/ DNA變性步驟（與BrdU分析不同，在BrdU分析中，它用於使BrdU抗體進入DNA中的BrdU。EdU染色比BrdU染色更快，步驟更少。

細胞增殖EdU Image試劑盒 | Cell Proliferation EdU Image Kit

細胞增殖(cell proliferation)的檢測，對於評估細胞健康(cell health)，確定遺傳毒性(genotoxicity)或評估抗癌藥物(anticancer drugs)至關重要。到目前為止，直接測量DNA合成(DNA synthesis)是最準確的方法，通常是通過在複製過程中將[3H]胸苷(thymidine)或5-溴-2′-脫氧尿苷(5-bromo-2’-deoxyuridine)等核苷類似物(nucleoside analog like)摻入細胞中，然後通過放射自顯影或分別使用抗BrdU抗體(anti-BrdU-antibody)。EdU（5-乙炔基-2′-脫氧尿苷）是BrdU（5-bromo-2′-脫氧尿苷）的新型替代品。它被取代胸苷摻入到新合成的增殖細胞DNA中。將5-EdU摻入到增殖細胞中，然後使用點擊連接用螢光疊氮化物進行檢測。與BrdU的使用相反，新方法不需要樣品固定或DNA變性。可用於研究中樞神經系統中的細胞增殖。細胞增殖EdU Image試劑盒(Cell Proliferation EdU Image Kit, 貨號KTA2030)（綠色螢光）是BrdU分析的一種新型替代方法。 EdU（5-乙炔基-2′-脫氧尿苷）是胸苷的核苷類似物，在活性DNA合成過程中被摻入DNA中。與BrdU分析相比，EdU-Click分析不是基於抗體的，因此不需要DNA變性(denaturation)（通常使用HCl或加熱或用DNase消化）來檢測摻入的核苷。檢測基於click reaction，疊氮化物和炔烴之間的銅催(copper-catalyzed)化共價反應在30分鐘內完成。

• Kit components
• EdU (10mM)
  • AbFluor 488 azide  KTA2030  (綠色螢光組Ex/Em = 546/565 , 貨號KTA2030)（ (Orange Fluorescence, Ex/Em = 546/565 nm貨號KTA2031)
  • 10×Reaction buffer
  • Copper
  • Reducing Agent
• Features & Benefits
• No antibody needed.
  • No denaturation steps, preservation of cell morphology and DNA integrity.
  • Simple, reliable and time-saving than traditional methods.
  • Proprietary AbFluor 488 azide (Ex/Em = 501/525 nm)-good photostability and minimizing fluorescence quenching (貨號KTA2030) .Proprietary AbFluor 545 azide (Ex/Em = 546/565 nm)-good photostability and minimizing fluorescence quenching.(貨號KTA2031)
  • Optimized for fluorescent microscopy.
• Storage instructions

Stable for at least 12 months at recommended temperature from date of shipment. Gel pack with blue ice.

• Shipping

Gel pack with blue ice.

引用文獻

In vitro mitochondrial-targeted antioxidant peptide induces apoptosis in cancer cells. W Zhan, X Liao, L Li. Onco Targets Therv.12

Perilaldehyde activates AMP‐activated protein kinase to suppress the growth of gastric cancer via induction of autophagy

Y Zhang, S Liu, Q Feng. JOURNAL OF CELLULAR BIOCHEMISTRY

 活細胞和死細胞雙染色套組  |  CCK-8細胞增殖和細胞毒性試劑盒  | LDH細胞毒性測定試劑盒 | 細胞衰老檢測試劑盒（β-半乳糖苷酶 | 細胞增殖EdU Image試劑盒 

KTC011001	Cell Counting Kit-8 (CCK-8)
KTA1030	LDH Cytotoxicity Assay Kit
KTA3010	Cell Senescence Kit (β-Galactosidase Assay)
KTA2010	TUNEL Apoptosis Detection Kit (Green Fluorescence)
KTA2011	TUNEL Apoptosis Detection Kit (Orange Fluorescence)
KTA4001	Mitochondrial Membrane Potential Assay Kit (JC-1)
KTA0001	Annexin V-AbFluor™ 405 Apoptosis Detection Kit
KTA0002	Annexin V-AbFluor™ 488 Apoptosis Detection Kit
KTA0003	Annexin V-AbFluor™ 555 Apoptosis Detection Kit
KTA0004	Annexin V-AbFluor™ 647 Apoptosis Detection Kit
KTA2030	Cell Proliferation EdU Image Kit (Green Fluorescence)
KTA2031	Cell Proliferation EdU Image Kit (Orange Fluorescence)
KTA3020	Caspase-1 Assay Kit (Colorimetric)
KTA3021	Caspase-2 Assay Kit (Colorimetric)
KTA3022	Caspase-3 Assay Kit (Colorimetric)
KTA3023	Caspase-4 Assay Kit (Colorimetric)
KTA3024	Caspase-6 Assay Kit (Colorimetric)
KTA3025	Caspase-8 Assay Kit (Colorimetric)
KTA3026	Caspase-9 Assay Kit (Colorimetric)