ARG2 慢病毒載體（人類）（CMV）（pLenti-GIII-CMV）貨號12270061
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特點
ARG2 慢病毒載體（人類）（CMV）（pLenti-GIII-CMV）貨號12270061
慢病毒簡介
慢病毒（Lentivirus）的結構可分成套膜（envelop）、蛋白質膜（capsid）、以及遺傳物質。Lentivirus感染宿主後，會將其基因嵌入宿主細胞使其表達。現為實驗室中常見的基因重組工具。
目前lentivirus已可藉由 1. 帶有target gene的lentivector，加上 2. packaging system，構成無致病性的psuedovirus。
ABM Lentiviral Expression System 慢病毒表現載體
- 不僅可做為病毒載體使用，亦可做為一般載體進行轉染。
- 帶有兩種抗生素篩選位，供原核或真核生物使用。
- 一系列具有不同啟動子的慢病毒載體，如EF1a、CMV、UbC、PGK。亦有專供promoter研究之promoterless載體。EF1a 啟動子(EF1a promoter)使表達轉基因的細胞百分比最高，其次是 PGK 和 UBC。然而，PGK 啟動子(PGK promoter) 在陽性細胞中提供更高的基因表現水平。
- 可依不同實驗需求使用bicistronic、tricistronic，或是帶有reporter gene （GFP、RFP、Luciferase）之病毒載體。
- 依不同需求生產客製化載體。
| Cat. No. | 12270061 |
| Name | ARG2 Lentiviral Vector (Human) (CMV) (pLenti-GIII-CMV) |
| Unit | 1.0 µg DNA |
| Gene Name | ARG2 |
| Gene Full Name | arginase, type II |
| Accession Number | BC029050 |
| Species | Human |
| Vector Map | pLenti-GIII-CMV (click blue link to view) |
| System | Lentiviral Vector |
| Insert Size | 1065 |
| Vector Size | 7684 |
| Storage Condition | 1 year when stored at -20°C or lower in a non-frost free freezer. |
MOI = 產物滴度 (IU/ml) x 病毒體積 (ml) / 細胞總數
MOI 是指感染中使用的每個細胞的病毒顆粒數量，例如 MOI 為 5 表示孔中每個細胞有 5 個感染單位 (IU) 或轉導單位 (TU)。要確定感染複數 (MOI)，請計算每個孔中添加的病毒顆粒數量，然後將該數字除以接種到孔中的細胞數量。我們也建議使用一系列 MOIs 進行轉導，因為不同的細胞類型可能需要不同的 MOIs 才能成功轉導。MOI = 病毒滴度 (IU/ml) x 病毒體積 (ml) / 細胞總數
MOI 是指感染中使用的每個細胞的病毒顆粒數量，例如 MOI 為 5 表示孔中每個細胞有 5 個感染單位 (IU) 或轉導單位 (TU)。要確定感染複數 (MOI)，請計算每個孔中添加的病毒顆粒數量，然後將該數字除以接種到孔中的細胞數量。我們也建議使用一系列 MOIs 進行轉導，因為不同的細胞類型可能需要不同的 MOIs 才能成功轉導。MOI = 病毒滴度 (IU/ml) x 病毒體積 (ml) / 細胞總數
SV40 正向引子序列 5′ ACTGAGGGGCCTGAAATGA SV40 反向引子序列 5′ GACTCAGGGCATGAAACAGG 這些是 qPCR 引物，條帶大小為 61 bp。
影響慢病毒包裝力價的因素有很多，包括插入片段大小( insert size)、插入片段序列(insert sequence)（specific sequence/特定序列）以及用於病毒載體生產的菌株。沒有人可以確定哪種插入物效果更好。轉導(Transduction)可以具有更高的轉導效率和更高水平的基因表達，因為可以超過100個拷貝的DNA進入細胞。但只有約 1% 的轉導細胞會整合到宿主細胞中。由於只有 1-10 個拷貝的病毒顆粒進入細胞，慢病毒效率通常低於轉染，表達量也低於轉染表達。此外，效率也依賴細胞株。我們已經充分證明慢病毒可以輕鬆轉導 293 和 MDA-MB-468 細胞。請測試這兩種細胞株，以確定是否是力價問題，或者可能是該特定細胞株難以被慢病毒轉導。