2-NBDG 葡萄糖攝取測定試劑盒| 2-NBDG Glucose Uptake Assay Kit 貨號Abnova™ KA6077

200 assays 

2-NBDG 葡萄糖攝取檢測試劑盒(2-NBDG Glucose Uptake Assay Kit )提供了一種靈敏的非放射性檢測方法(non-radioactive assay)，用於測量培養細胞中的葡萄糖攝取(glucose uptake)。螢光訊號可以透過螢光顯微鏡或有488 nm雷射和530/30 nm發射濾光片（FITC通道）的流式細胞儀來監測。此檢測試劑盒是監測葡萄糖轉運蛋白(monitoring glucose transporters)的最強大的工具。葡萄糖代謝(Glucose metabolism)是將葡萄糖(glucose)轉化為能量的過程，也是大多數生物體能量供應的主要來源。 2-NBDG [2-(N-(7-Nitrobenz-2-oxa-1,3-diazol-4-yl)amino)-2-deoxyglucose] 是一種螢光標記的葡萄糖示蹤劑(glucose tracer)，已被證明可以有效監測葡萄糖轉運( glucose transportation)在細胞中，2-NBDG 透過與葡萄糖相同的葡萄糖轉運蛋白 (GLUT) 轉運到細胞中。一旦 2-NBDG 被細胞攝取，它就會在 C-6 位點磷酸化( phosphorylation )，產生 2-NBDG-6-磷酸鹽(2-NBDG-6-phosphate)，並且很好地保留在細胞內。與其他葡萄糖示蹤劑（例如 2-DG 或 FDG）相比，2-NBDG 允許在單細胞層級以高時間和空間分辨率(spatial resolution)原位測量 2-NBDG。

2-NBDG 葡萄糖攝取測定試劑盒(The 2-NBDG Glucose Uptake Assay Kit)提供了一種靈敏的非放射性測定方法(non-radioactive assay)，用於測量培養細胞中的葡萄糖攝取。在這個試劑盒中，Assay Buffer I 用於增強細胞中 2-NBDG 的攝取( uptake )和保留，而 Assay Buffer II 可以提高細胞中 2-NBDG 的訊號背景比( signal-to-background ratio)。螢光訊號可以透過螢光顯微鏡(fluorescence microscope )或有488 nm雷射和530/30 nm發射濾光片（FITC通道）的流式細胞儀來監測。 2-NBDG 葡萄糖攝取檢測試劑盒(The 2-NBDG Glucose Uptake Assay Kit)是監測葡萄糖轉運蛋白最強大的工具。

Summary

1. Prepare cells with your test compounds

2. Add 2-NBDG staining solution

3. Incubate cells at 37°C for 20 minutes

4. Remove 2-NBDG staining solution

5. Wash cells with Assay Buffer I

6. Analyze cells using fluorescence microscope or flow cytometer with 530/30 nm filter (FITC channel)

 

使用 2-NBDG 葡萄糖攝取檢測試劑盒對 CHO-K1 細胞的 2-NBDG 攝取進行流式細胞儀。 CHO-K1 細胞在 37°C 下用或不用 100 uM 根皮素處理 1 小時，然後用 100 uM 2-NBDG 染色溶液孵育 20 分鐘。為了準備用於流式細胞儀的貼壁 CHO-K1 細胞，染色後使用 EDTA 分離細胞。使用 ACEA NovoCyte 流式細胞儀在 FITC 通道中測量螢光強度。

Example Data Analysis and Figures.

使用 2-NBDG 葡萄糖攝取檢測試劑盒拍攝 CHO-K1 細胞中 2-NBDG 攝取的螢光影像。將 CHO-K1 細胞以 40,000 個細胞/孔/100 uL 接種於 96 孔黑壁/透明底板中過夜。將細胞以 20 mM 葡萄糖 (B) 或 100 uM 根皮素 (C) 在 37°C 下處理 1 小時，然後與 100 uM 2-NBDG 染色溶液一起孵育 20 分鐘。未處理的對照細胞在相同條件下染色。使用 FITC 濾光片的螢光顯微鏡測量螢光訊號。