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Minute™ 質膜蛋白分離和細胞分級分離試劑盒 |Plasma Membrane Protein Isolation and Cell Fractionation Kit Invent貨號SM-005

代理廠牌:
原廠連結:
http://www.inventbiotech.com/
相關下載:

質膜蛋白分離和細胞分級分離試劑盒操作手冊

特點

快速蛋白質提取試劑盒系列-Rapid Protein Extraction Kits

Minute™蛋白萃取套組,使用創新『Column Filter』技術,效果更佳,完成只需 一 分鐘蛋白萃取只需要vortex、transfer、spin 。避免 RIPA 不溶性蛋白質的問題基於旋轉柱的方法獲得更完整的蛋白質譜。Minute ™一系列蛋白質提取試劑盒;適用於多種物種(包括哺乳動物、海洋動物、昆蟲、植物和細菌)快速和容易地提取/分離蛋白質的優異工具 。與市場上的任何其他蛋白質提取試劑盒不同,優化的緩衝液系統,結合最新的專有濾筒技術(spin column);快速提高蛋白萃取的效能及方便性;用於總蛋白提取,細胞分離和膜蛋白分離,只需簡單四步驟即可完成蛋白質萃取。無須長時間等待、免除重複性的wash步驟。

Minute™ 質膜蛋白分離和細胞分級分離試劑盒 | Invent貨號SM-005

Minute™ Plasma Membrane Protein Isolation and Cell Fractionation Kit (50 Preps)

手冊和協議 | 材料安全數據表 (MSDS) | 參考文獻 (331)

Minute TM代新一代細胞質分離套組(plasma membrane (PM) isolation and cell fractionation),結合獨特的專利技術機制,細胞/組織只需通過Filter即完成質膜蛋白的萃取。在該過程中,細胞膜破裂不必使用傳統的均質化或超音波處理、不需要超速離心。處理量:1×106-50×106 cells/sample。時間:<45 min。Yield:1-3 mg/ml

工作原理:細胞/組織首先被緩衝液 A 敏化,然後在施加高速離心力時以之字形方式通過專有的過濾器,產生含有破裂的細胞膜和完整細胞核的細胞裂解液。結果核污染幾乎被消除。通過隨後使用常規台式微量離心機的差速離心和密度離心,將 PM 與細胞裂解物(粗膜、完整細胞核、胞質蛋白和細胞器的混合物)進一步分離。可獲得 5 種不同的細胞組分: 總膜(total membrane)、PM、細胞質(cytosol)、細胞核(nucleus)和細胞器(organelles)。該過程可在 45 分鐘內完成。

圖 1. A. 來自人和大鼠培養細胞的總細胞裂解物 (TC) 和分離的質膜蛋白 (PM) 的 SDS-PAGE 譜。泳道1,人肺癌細胞A549總細胞裂解液;泳道 2,A549 的孤立 PM;泳道3,大鼠REL-6TN細胞的PM;泳道 4,大鼠 REL-6TN 細胞的總細胞裂解物。

B. 蛋白質印跡:將 A 中的蛋白質轉移至硝酸纖維素膜上,並用抗 Na/K ATPase α1(一種質膜標記物(Upstate,克隆 464.6))和抗核纖層蛋白 B1(一種核膜標記物(ab16048,Abcam Cambridge)進行探測, 嘛)。通過比色底物 Opti-4CN (Bio-RAD) 使特定蛋白質條帶可視化。

C. B 中 Na/K ATPase α1 信號的光密度測量(TC 與 PM)。通過微變性總蛋白提取試劑盒(SD-001,Invent Biotechnologies,Eden Prairie,MN)提取總細胞裂解物。

Figure 1. A. SDS-PAGE profiles of total cell lysate (TC) and isolated plasma membrane proteins (PM) from human and rat cultured cells. Lane 1, Human lung cancer cell A549 total cell lysate; Lane 2, Isolated PM of A549; Lane 3, PM of rat REL-6TN cells; Lane 4, Total cell lysate of rat REL-6TN cells.

B. Western blotting: Proteins in A were transferred to nitrocellulose membrane and probed with anti-Na/K ATPase alpha1, a plasma membrane marker (Upstate, Clone 464.6), and anti-lamin B1, a nuclear envelope marker (ab16048, Abcam Cambridge, MA). The specific protein bands were visualized by a color metric substrate Opti-4CN (Bio-RAD).

C. Densitometry measurement of Na/K ATPase alpha1 signals in B (TC vs. PM). Total cell lysates were extracted by Minute Denaturing Total Protein Extraction Kit (SD-001, Invent Biotechnologies, Eden Prairie, MN).

圖 2 A. 從小鼠組織中分離的總膜蛋白的 SDS-PAGE 譜(T= 總細胞裂解物,C= 細胞溶膠組分,M= 總膜組分)

B. 將 A 中所示的蛋白質轉移到硝酸纖維素膜上,並通過蛋白質印跡法用兔抗小鼠泛鈣粘蛋白 (ab6529, Abcam, Cambridge, MA) 和抗肌動蛋白進行探測。通過比色底物 Opti-4CN (Bio-RAD) 使特定蛋白質條帶可視化。總膜蛋白組分中的泛鈣粘蛋白(一種 130 kDa 質膜標記物)信號顯著增強。通過 Minute™ 變性總蛋白提取試劑盒(SD-001,Invent Biotechnologies,普利茅斯,明尼蘇達州)提取總細胞裂解物。

Figure 2 A. SDS-PAGE profiles of isolated total membrane proteins from mouse tissues (T=Total Cell Lysate, C=Cytosol Fraction, M= Total Membrane Fraction)

B. Proteins shown in A were transferred to a nitrocellulose membrane and probed with rabbit-anti mouse pan-cadherin (ab6529, Abcam, Cambridge, MA), and anti-actin by Western blotting. The specific protein bands were visualized by a color metric substrate Opti-4CN (Bio-RAD). Signals of pan-cadherin (a 130 kDa plasma membrane marker) were significantly enhanced in total membrane protein fractions. Total cell lysates were extracted by Minute™ Denaturing Total Protein Extraction Kit (SD-001, Invent Biotechnologies, Plymouth, MN).

圖 3.A. 小鼠組織的總膜蛋白組分 (TM) 和分離的質膜蛋白組分的 SDS-PAGE 譜。

B. A 中蛋白質的蛋白質印跡被轉移到硝酸纖維素膜上並用兔抗鈣粘蛋白(abcam,劍橋,馬薩諸塞州)探測。通過比色底物 Opti-4CN (Bio-RAD) 使特定蛋白質條帶可視化。

C. B 中鈣粘蛋白信號的光密度測量(TM 與 PM)。

Minute™ 質膜蛋白分離和細胞分級分離試劑 Kit includes:

Items Quantity
Buffer A 25 ml
Buffer B 10 ml
Protein Extraction Filter Cartridges 50 units
Collection Tubes with Caps 50 units
Plastic Rods 2 units
Tissue Dissociation Beads 10 grams

原廠連結01

基於旋轉柱(SPIN-COLUMN-BASED )的蛋白質提取/細胞分級(CELL FRACTIONATION)

Compined-F

Invent Biotechnologies 成立於 2010 年,因革新蛋白質提取(protein extraction)和細胞分離(cell fractionation)而享譽全球。我們開發了基於旋轉柱(spin column-based)的創新技術,用於蛋白質研究( protein research),可簡化和增強樣品製備。這會帶來更順暢的工作流程和始終可靠的結果,從而帶來卓越的數據質量。選擇 Minute™ 試劑盒進行蛋白質提取(protein extraction)和細胞分級分離(cell fractionation)的研究人員可以相信,他們的樣品準確地代表了所研究的細胞或組織的自然特徵。這些套件只需要一台台式離心機,最大限度地減少實驗變量並確保高質量的材料以獲得更可靠的數據。Minute™ 方法的有效性得到了越來越多 journals的支持 (Nature, Science, and Cell.)。

The Minute™ 的優點:
• 超快(快至 1 分鐘)
• 樣本量小
• 最小化交叉污染
• 內源性基線不變
• 所有活體和組織類型

The Minute™ 應用:
• 蛋白質運輸/易位
• 蛋白質-蛋白質相互作用
• 蛋白質修飾
• 信號轉導
• sc/snRNA-seq

Invent Minute™ 徹底改變蛋白質樣品製備和細胞分級分離

自 2010 年成立以來,我們的首要目標是利用我們基於旋轉柱的創新技術徹底改變全球蛋白質提取(protein extraction)和細胞分離(cell fractionation)市場。我們的目標是讓 Minute™ 試劑盒成為標準實驗室程序,取代所有基於溶液的樣品製備方法。通過利用這些套件,研究人員只需一台台式離心機即可獲得一致的結果並獲得卓越的數據質量。

改變蛋白質提取(Transforming protein extraction)

Minute™ 總蛋白提取試劑盒採用簡單的旋轉柱( simple spin column ),可有效消除細胞或組織裂解過程(lysis)中的非系統性蛋白質損失(non-systematic protein loss)。這代表著相對於傳統的基於解決方案的方法,例如 RIPA 緩衝液(RIPA buffer)和超聲處理(sonication)的顯著進步,這些方法以其可變性和無法提供全面的蛋白質譜而聞名。用於總蛋白提取的 Minute™ 試劑盒與來自各種生物體和組織類型的小樣本量兼容,為研究人員提供了未改變的內源蛋白基線( endogenous proteins),從而實現更精確的定量和分析。

Invent Biotech’s Minute Kit shows a more complete cell lysis compared to RIPA buffer, in which a pellet remains, leading to an alteration of the protein profile.

改進細胞分級分離(Revamping cell fractionation)

由於缺乏簡單的實驗方案,傳統的細胞分級分離方法長期以來一直受到用戶偏差和結果不一致的影響。 Minute™ 細胞分離試劑盒徹底改變了這一過程,使研究人員能夠在 90 分鐘內獲得高純度的細胞器群,並且使用最少的洗滌劑。通過採用簡單的旋轉柱,這些試劑盒無需均質化(homogenization)、密度梯度分離(density gradient separation)和超速離心等傳統技術( ultra-centrifugation),從而減少了實驗變量的數量。這可以防止細胞器損傷( organelle damage)並產生更一致和生理相關的結果。憑藉多種 Minute™ 試劑盒可滿足不同的細胞分級(cell fractionation)分離要求,我們正在推動蛋白質組研究的轉型。

支持所有研究學科(Supporting all research disciplines)

Minute™ 試劑盒旨在無縫集成到現有的蛋白質提取和細胞分級分離工作流程中,提供快速且一致的性能,確保可靠的結果。然而,不要只相信我們的話——我們的產品已在科學文獻中被廣泛引用,這表明研究界對簡化且可靠的樣品製備方法的需求不斷增長。立即切換到 Minute™,體驗我們技術的優勢,無論您的研究領域如何。

SD-001/SN-002 Minute TM Total Protein Extraction Kit  for Animal Cultured Cells/Tissues (50 Tests)
SC-003 Minute TM Cytoplasmic and Nuclear Fractionation kit (50 Tests)
SN-006 Minute TM Detergent-Free Total Protein Extraction Kit for Animal Cells/Tissues (50 Tests)
SM-005 Minute TM Plasma Membrane Protein Isolation Kit (50 Tests)
SM-005-p Minute TM Plasma Membrane Protein Isolation Kit for Plants (50 Tests)
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MM-038 Minute TM Mitochondria Isolation Kit for Muscle Tissues/Cultured Muscle Cells (50 Tests)
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WA-005 Minute TM Peroxidase Suppressor (30 ml)
WA-006 Minute TM High Efficiency Protein Precipitation kit
WA-007 MinuteTM RBC Lysis Buffer (250 ml)
WA-008 MinuteTM WB Blocking Solution (250 ml)
WA-009 MinuteTM Denaturing Protein Solubilization Reagent (10 ml)
WA-010 MinuteTM Non-Denatured Protein Solubilization Reagent (10 ml)
WA-011 MinuteTM Protein Solubilization Reagent for MS (2 ml)
WA-012 MinuteTM SDS-Remover (10 ml)
WA-013 MinuteTM Albumin Depletion Reagent for Plasma and Serum (20 ml)
WA-014 MinuteTM Anti-Clumping Nuclei Storage Buffer NEW!

 

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