黴漿菌快速PCR偵測套組 | 貨號G238

abm’s 黴漿菌快速PCR偵測套組(貨號 G238）可在不到 2 小時的時間內對 200種以上+ (Mycoplasma species )進行高度特異性和靈敏的檢測 。該暢銷試劑盒旨在最大限度地減少假陽性，確保快速可靠地進行細胞培養物的常規篩查。國家公共衛生機構最近的一份官方出版物發現，ABMGOOD試劑盒性能優於 Sigma 和 Lonza 的試劑盒，同時比 ATCC 的試劑盒價格更優惠（Russell 等，2020）。<黴漿菌物種(mycoplasma-species)/菌株資料查閱請按此>

1. 無需 DNA 分離 (No DNA isolation needed) ：直接將細胞培養上清液加入 PCR 反應中
2. 快速而全面(Rapid and Comprehensive)：在不到 2 小時內檢測黴漿菌(Mycoplasma species )
3. 高度敏感和特異(Highly Sensitive and Specific)：與競爭試劑盒相比，顯示出最高的真陽性率和最低的假陽性率
4. 易於使用(Easy-to-use)：包括即用型引物混合物和陽性對照
5. 與競爭試劑盒相比，每個樣品的成本降低 6 倍（Russel 等人，2020 年）
6. 優於 Sigma 和 Lonza 的試劑盒（Russel 等人，2020 年）

品牌ABMGOOD 貨號G238 規格100個反應/25UL

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細胞實驗中，不可忽略”黴漿菌Mycoplasma”污染的問題。黴漿菌污染，影響細胞增殖、代謝反應、基因合成及過程、甚至細胞貼附特性。因此，定期細胞黴漿菌Mycoplasma偵測，為培養細胞例行性之工作。實驗室引入細胞株，也需建立黴漿菌檢測的平台。

黴漿菌偵測介紹

黴漿菌(Mycoplasma)是一種能自我複製的最小原核微生物，和其他細菌不同是-黴漿菌(Mycoplasma) 沒有細胞壁，細胞形態不固定有多種變化，且可以在培養基上形成極小的菌落。許多常見的抗生素(antibiotic)，如盤尼西林或β－內醯胺類抗生素對黴漿菌(Mycoplasma)是無效的，難以清除污染。

難以發現的黴漿菌污染

黴漿菌(Mycoplasma)是細胞培養常見且棘手的汙染問題之一，發生率高且不易肉眼發覺。感染的細胞不會呈現死亡或其他可辨別的現象，但卻會影響細胞增殖(proliferation)、代謝反應(metabolism)、基因合成(gene synthesis)及過程(processing)、甚至細胞貼附(adhesion properties)特性。因此在進行細胞培養時，定期監控黴漿菌汙染是必須執行的例行性工作之一

黴漿菌污染–影響細胞正常實驗

1.     黴漿菌污染，抑制細胞增殖與代謝反應

2.     影響病毒增殖或病毒感染之效率

3.     降低細胞轉染之效率

4.     改變基因表現型態

黴漿菌PCR偵測原理

利用具專一性之primers，經由PCR反應來複製mycoplasma DNA。ABMGOOD提供之Mycoplasma 黴漿菌偵測套組，不須經由DNA純化，可直接使用培養液進行PCR偵測。免去DNA純化步驟，可於二小時以內完成實驗，達到快速篩檢的目的。

黴漿菌PCR偵測kit產品提供 (產品貨號#G238)

PRODUCT COMPONENTS	QUANTITY
BlasTaq™ 2X PCR MasterMix	1.25 ml
Primer Mix	100 μl
Positive Control	250 μl
Nuclease-Free H2O	1.0 ml

黴漿菌PCR偵測kit引用文獻+

Jagadish, N. et al. “A-kinase anchor protein 4 (AKAP4) a promising therapeutic target of colorectal cancer.” Journal of Experimental & Clinical Cancer Research 1:142 (2015). PubMed: 26590805. Application: Cell culture.

Jagadish, N et al. “A-kinase anchor protein 4 (AKAP4) a promising therapeutic target of colorectal cancer.” J Exp Clin Cancer Res 34(1):142 (2015). DOI: 10.1186/s13046-015-0258-y. PubMed: 26590805. Application: Cell Culture.

Saha, A et al. “Effect of Metformin, Rapamycin, and Their Combination on Growth and Progression of Prostate Tumors in HiMyc Mice..” Cancer Prev Res (Phila) 8(7):597-606 (2015). DOI: 10.1158/1940-6207.CAPR-15-0014. PubMed: 25908508. Application: Cell Culture.

Koh, JH et al. “Effect of water-soluble fraction of cherry tomatoes on the adhesion of probiotics and Salmonella to intestinal epithelial cells.” J Sci Food Agric : (2013). PubMed: 23749725. Application: Cell Culture.

<操作流程> 黴漿菌快速PCR偵測套組 

細胞準備: 細胞如正常方法繼代 ( 48-72 hours )至八成滿條件，取2.5ul的細胞上清液 (無需細胞本身)，進行以下PCR反應。

PCR反應液置於冰上混合配製如下(反應體積25ul)

輕輕混合反應物並短暫離心。PCR(聚合酶連鎖反應)設定條件如下(30-40cycles)

PCR 後，將反應維持在 4°C 或儲存在 -20°C 直至使用。 通過瓊脂糖凝膠電泳分析擴增產物。溴化乙錠或 SafeView™（貨號 G108/G108-G）染色觀察。

PCR 產物長度約為 500 bp，表明測試的細胞培養物受到支原體污染。根據支原體菌株的不同，PCR 產物的長度將在 370-550 bp 之間變化。  在進行PCR 之前，將反應混合物置於冰上，反應混合物準備好後立即開始PCR。<原廠操作手冊下載請按此>

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黴漿菌細胞內去除添加劑 cocktail | 貨號G398        規格1.0 ml (3.5 mg/ml) (1000x/2,000x靈敏細胞) Mycoplasma Elimination Cocktail

直接添加於細胞中–黴漿菌去除添加劑 ; 2 週內移除70種以上黴漿菌Species，不影響細胞之生長及活性。

• Direct addition of cocktail to cell culture medium
• Effectively eliminates over 70 types of mycoplasma species
• Not cytotoxic to most mammalian cell lines.

黴漿菌去除劑產品應用

黴漿菌(Mycoplasma)和其他細菌不同是沒有細胞壁，細胞形態不固定有多種變化，且可以在培養基上形成極小的菌落。許多常見的抗生素(antibiotic)，如盤尼西林或β－內醯胺類抗生素對黴漿菌(Mycoplasma)是無效的，難以清除污染。感染的細胞不會呈現死亡或其他可辨別的現象，但卻會影響細胞增殖、代謝反應、基因合成及過程、甚至細胞貼附特性。因此在進行細胞培養時，定期偵測黴漿菌汙染是必須執行的例行性工作之一。ABMGOOD提供黴漿菌移除之去除劑 ，直接添加於培養中的細胞株中，有效預防黴漿菌細胞污染。細胞黴漿菌移去，以1000倍使用於繼代過程, 2週內4個繼代即可完成黴漿菌移除abm’s Mycoplasma Elimination Cocktail is a specially formulated agent to effectively clear cells from Mycoplasma contamination in both adherent and suspension cells. Mycoplasma contamination is currently the most prevalent contamination in all cell culture facilities around the world.

黴漿菌去除劑產品特點

-direct addition of cocktail to cell culture medium – no change to routine cell culture methods needed. -effectively eliminates over 70 types of mycoplasma species – broad range. -not cytotoxic to most mammalian cell lines. -eliminates mycoplasma in less than 2 weeks (4 cell passages).

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