神經生長因子（NGF）是一種神經營養因子和神經胜肽，主要參與調節某些目標神經元的生長、維持、增殖和存活。據報導，當嗜鉻細胞瘤細胞系 PC12 暴露於神經生長因子 (NGF) 時，細胞會在一周內做出反應，停止細胞分裂並延長神經突（Greene 和 Tischler，1976）。細胞在含有 5% 胎牛血清和 10% 馬血清的 Ham’s F12K 中在聚賴氨酸或膠原蛋白包被的平板上生長。當細胞達到對數生長期時，加入新鮮培養基和10ng/mL的NGF，然後每天用倒置顯微鏡觀察細胞。PC12細胞與NGF(10ng/mL)孵育6天後細胞分裂停止與分化如圖1所示。未接受NGF的對照組未顯示神經突生長，細胞增生迅速。

NGF 也參與調節神經元生命週期以外的途徑。此外，α-2-巨球蛋白（a2M）已被鑑定為NGF的相互作用物，因此進行結合ELISA測定來檢測重組人類NGF和重組人a2M的相互作用。簡而言之，NGF 在含有 0.01% BSA（pH 7.4）的 PBS 中連續稀釋。然後將 100μL 的重複樣本轉移至 a2M 包被的微量滴定孔中，並在 37℃ 下孵育 2 小時。用PBST洗孔並與抗-NGF pAb一起孵育1小時，然後吸乾並洗3次。與 HRP 標記的二抗體孵育後，吸乾孔並洗 3 次。加入底物溶液後，將孔在37℃下孵育15-25分鐘。最後，在孔中加入 50μL 終止液並立即在 450nm 處讀取。NGF和a2M的結合活性如圖2所示，且此作用呈現劑量依賴性。
數字。NGF與a2M的結合活性

除了調節神經元(neurons)生命週期(life cycle )的途徑外，NGF 還參與其中。 此外，Alpha-2-巨球蛋白 (Alpha-2-Macroglobulin, a2M) 已被確定為 NGF 的相互作用物，因此進行了結合 ELISA 測定以檢測重組人 NGF 和重組人 a2M 的相互作用。 簡而言之，將 NGF 在含有 0.01% BSA (pH 7.4) 的 PBS 中連續稀釋。 然後將 100μL 的重複樣品轉移到 2M 包被的微量滴定孔中，並在 37℃下孵育 2 小時。 用 PBST 洗滌孔並用抗 NGF pAb 孵育 1 小時，然後吸出並洗滌 3 次。 與 HRP 標記的二抗孵育後，吸出孔並洗滌 3 次。 加入底物溶液後，將孔在 37℃下孵育 15-25 分鐘。 最後，向孔中加入 50µL 終止液，並立即在 450nm 處讀數。 NGF與a2M的結合活性如圖2所示，這種作用呈劑量依賴性。

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