細菌內毒素(Bacterial endotoxins)-熱原(Pyrogens)/非內毒素熱原

在革蘭氏陰性細菌(gram-negative bacteria )的外膜(outer membrane)中發現的細菌內毒素(Bacterial endotoxins)是一類稱為脂多醣 (LPS) 的磷脂的成員。脂多醣 (LPS) 不是革蘭氏陰性菌的外源性產物(exogenous products)，與革蘭氏陰性菌休克( Gram-negative shock)的發展有關。 脂多醣 (LPS) 在細胞死亡和裂解後從細菌中釋放出來。它們在足夠濃度下可通過釋放炎症介質（如細胞因子和白細胞介素）引起人和動物的不良反應，如發熱(fever)、低血壓(hypotension)、肺水腫(pulmonary edema)和彌散性凝血(disseminated coagulation)事件。例如，內毒素(endotoxin )與脂多醣敏感細胞(lipopolysaccharide-sensitive cells )發​​生反應，產生腫瘤壞死因子 α (TNFα)。巨噬細胞(Macrophages)是介導 LPS 毒性活性的細胞，而 TNFα 是內毒素致死作用的主要介質。熱原(Pyrogens)包括內毒素(endotoxins )源自革蘭氏陰性菌(gram-negative bacteria)的毒素，和非內毒素熱原（源自革蘭氏陰性菌以外的微生物或化學物質的物質）。來自革蘭氏陰性菌的內毒素是熱原化合物( pyrogenic compounds)污染引起毒性反應的最常見原因。產生熱原的革蘭氏陰性細菌的典型例子是大腸桿菌(Escherichia coli)、變形桿菌(Proteus)、假單胞菌(Pseudomonas)、腸桿菌(Enterobacter)和克雷伯氏菌(Klebsiella)。由於其耐熱性和穩定性，高壓滅菌不可能完全滅活內毒素。要求在250℃以上的溫度下乾熱滅菌至少30分鐘才能完全滅活。它存在於革蘭氏陰性菌棲息的環境（如水、空氣）中，即使在細菌死亡後，細菌內毒素（bacterial endotoxins) LPS仍然存在。

內毒素檢測套組EndoAlert ES Plate Kit| Beacon analytical systems貨號20-0321-ES

0.01 – 10 Endotoxin units (EU/mL)

Beacon EndoAlert ES 板試劑盒是一種動態比色法，用於定量測定細菌內毒素(bacterial Endotoxin)水溶液。內毒素是一種細菌脂多醣( bacterial lipopolysaccharide)，是大多數革蘭氏陰性菌( gram-negative bacteria)的主要細胞壁成分之一。 EndoAlert ES 板試劑盒可檢測低水平的內毒素，因此是評估內毒素完整性的有用工具生物和環境樣品。檢測範圍為 0.01 – 10 內毒素單位 ( Endotoxin units, EU/mL)。ES 產品專門配製用於檢測內毒素並僅與內毒素反應，並且與細胞真菌壁成分(1,3) B-D 葡聚醣不反應。

Format: 96-well microtiter plate

Standards: Lyophilized Endotoxin (10 EU/vial)

Incubation Time: 60 minutes

Catalog #: 20-0321-ES

The EndoAlert ES Plate Kit是 Levin 和 Bang 於 1968 年首次描述的反應的定量版本(quantitative version)。該測試基於在酶促級聯(enzymatic cascade )反應中，內毒素激活鱟變形細胞裂解物 (Limulus Amebocyte Lysate, LAL) 中的 C 因子，後者又激活B 因子。B 因子激活凝血酶原(Proclotting Enzyme)，然後再激活凝血酶( activates Clotting Enzyme)。無色合成肽底物被凝血酶(Clotting Enzyme)水解產生黃色，可以用分光光度計在 405nm。反應產生的顏色程度與測試樣品中的內毒素(Endotoxin)量成正比，並且可以使用標準曲線計算。

樣品採集和製備
應注意避免樣品受到干擾水平的內毒素污染。務必使用無菌技術，只使用無熱原收集材料。如果樣品在採集後不能立即進行檢測，將樣品在 2-8°C 下儲存少於 24 小時或在≤-18°C 下儲存 24 小時或更長時間。樣品應保存在適當的收集容器以確保准確測量內毒素濃度，因為內毒素可能吸附到內表面。樣品的 pH 值應在 6.0 – 8.0 的範圍內。可使用無熱原調節樣品 pH 值氫氧化鈉或鹽酸。水和簡單的鹽溶液不需要調整 pH 值。避免污染，測試大量樣品溶液的小等分試樣的 pH 值。

內毒素EndoAlert ES Plate Kit (套組內容物) 

【工業用污染檢測】 多溴化二苯醚(Polybrominated diphenyl ethers (PBDEs)  | 毒殺芬(Toxaphene)Tube Kit  |

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Beacon Analytical Systems, Inc. 是一家 ELISA 生物技術公司和 ELISA 試劑盒供應商，位於美國緬因州薩科。 Beacon 目前擁有 10,000 平方英尺的實驗室和辦公空間，其中包括研發和製造業務。作為美國頂級的 ELISA 試劑盒經銷商，我們的 QC 實驗室獲得了美國實驗室認可協會 (A2LA) 的 ISO/IEC 17025:2017 標準（證書編號 5433.01）的認可，用於規定的範圍和實驗室質量管理體系的運作。 自 1996 年以來，美國排名第一的 ELISA 試劑盒製造商 Beacon Analytical 專門為環境、農業和食品安全市場生產免疫診斷檢測試劑盒。我們在這些領域中的每一個領域都開發了許多免疫測定試劑盒，其中精選試劑盒擁有美國 EPA ETV 驗證、USDA GIPSA 認證和 AOAC 驗證。在 ELISA 測試套件之外，Beacon 還為需要針對其 ELISA 測試需求定制方法的公司提供合同方法開發。