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Mitochondria粒線體分離套組 | Mitochondria Isolation Kit貨號K288-50 (ABCAM ab288084)

代理廠牌:
原廠連結:
http://www.biovision.com
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Mitochondria粒線體分離套組操作手冊

特點

Mitochondria粒線體分離套組 | 貨號K288-50  (ABCAM ab288084) 

Mammalian Mitochondria Isolation Kit For Tissue & Cultured Cells

biovision商品插圖

原理介紹 線粒體是細胞的動力,以三磷酸腺苷(ATP)的形式產生大部分能量供應。 線粒體是雙膜細胞器:外膜outer membrane和folded inner membrane 折疊內膜,稱為嵴 (cristae)。分離的線粒體是研究線粒體呼吸(mitochondrial respiration),呼吸複合物組裝(assembly of the respiratory complexes),細胞凋亡( apoptosis),mtDNA和mtRNA以及線粒體蛋白質譜 (mitochondrial protein profiling)分析的首選樣品。Mitochondria粒線體分離套組為完整線粒體的分離提供了兩個選擇。第一個選擇是利用基於試劑的方法,允許並行處理多個樣品。 第二個選擇使用傳統的均勻分裂,其提供更好的線粒體產量。

粒腺體自細胞或組織分離後, 目前是以JC-1染劑測量。分離後之粒腺體通過使用JC-1染料,分析純化的線粒體的完整性,測試電化學質子梯度(ΔΨ)的內線粒體膜。 測量方式為: 純化的線粒體在冰上解凍,並與JC-1染料(1μg/ ml)在37℃一起孵育15分鐘。 完整的純化線粒體顯示JC-1染料的聚集,其信號可以在Ex / Em = 530 / 590nm測量。用抗黴素A(100μM)處理消除線粒體膜電位,導致螢光信號降低。

產品使用最佳化: 為了避免蛋白質降解,建議在線粒體中添加蛋白酶抑制劑混合物(Cat#K272-1EA)。 細胞裂解效率檢查,可將5μl細胞裂解液放入載玻片中,並加蓋玻片並在顯微鏡下觀察。對於組織,進行足夠的 strokes下即獲得均勻的懸浮液細胞。 或使用Dounce Tissue Homogenizer 組織研磨器均質軟組織(如腸道、肺、心等組織)以及細胞。

Size 50 assays
SKU+Size K288-50
Species Reactivity Mammalian
Applications Useful for mitochondrial respiration studies, assembly of the complexes, apoptosis, mtDNA and mtRNA, and protein profiling.
Western blot and ELISA.
Features & Benefits • Simple & rapid method to isolate highly pure, intact and functional mitochondria from tissues and cultured cells.
Kit Components • Mitochondria Isolation Buffer
• Reagent A
• Storage Buffer

BCA蛋白測定試劑盒 | 貨號K812-1000  蛋白質濃度範圍(0.01-0.6毫克/毫升) 

BCA蛋白測定試劑盒| 貨號K813-5000  蛋白質濃度範圍25-2000μg/ ml 

BCA蛋白測定試劑盒 還原劑兼容 | (562nm) 25-2000μg/ ml 貨號K818-1000 

smartSpectrumlab 102-T0100-01

 

 

 

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