Cultrex® BME基底膜提取物 | PathClear LEDV free貨號3433-001-01

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特點

Cultrex Reduced Growth Factor Basement Membrane Extract, PathClear

Cultrex®基底膜提取物（Cultrex® Basement Membrane Extract , BME）是從Engelbreth-Holm-Swarm（Engelbreth-Holm-Swarm , EHS）腫瘤純化的基底膜(basement membrane)的可溶形式。該提取物提供了天然的細胞外基質水凝膠(extracellular matrix hydrogel)，該凝膠在37°C聚合形成重組的基底膜。基底膜(Basement membranes)是特殊的細胞外基質(extracellular matrix)的連續片，形成內皮(endothelial)，上皮(epithelial)，肌肉(muscle)或神經元細胞(neuronal cells)與其相鄰基質之間的界面，並通過影響細胞粘附(cell adhesion)，遷移(migration)，增殖(proliferation)和分化(differentiation)在組織組織中發揮重要作用。基底膜提取物（Cultrex® Basement Membrane Extract , BME）的主要成分包括層粘連蛋白(laminin)，膠原蛋白IV(collagen IV)，動蛋白(entactin)和硫酸乙酰肝素蛋白聚醣(heparan sulfate proteoglycans)。

Cultrex RGF BME 可用於多種應用，包括維持原代內皮、上皮、平滑肌、幹細胞和類器官/3-D 細胞培養物的生長或促進分化。它還可用於細胞附著、神經突生長、血管生成、體外細胞侵襲和體內致瘤性測定。基底膜是專門的細胞外基質的連續片，形成內皮細胞、上皮細胞、肌肉細胞或神經元細胞及其鄰近基質之間的界面，並通過影響細胞粘附、遷移、增殖和分化在組織組織中發揮重要作用。

Cultrex® BME Endothelial Tube Formation.

Cultrex®RGF BME是一種已開發，生產並符合一般細胞培養應用要求的基底膜基質。對Cultrex®RGF BME進行了處理，以減少與基質相關的生長因子，並提供了更明確的模型系統。

質量控制(Quality control)規格：

使用小鼠抗體生產（mouse antibody production , MAP）測試，常規篩查小鼠菌落的病原體。
Engelbreth-Holm-Swarm（Engelbreth-Holm-Swarm , EHS）腫瘤不含LDEV。
PathClear®–通過PCR檢測為陰性的17種細菌和病毒株，通常包含在小鼠抗體生產（mouse antibody production , MAP）測試中，另外還有13種鼠類傳染原(murine infectious agents)，包括LDEV，共計31種生物和病毒。
根據USP無菌測試指南，在37°C下孵育14天後未檢測到細菌或真菌生長。,
LAL測定(Limulus Amoebocyte Lysate) 的內毒素濃度≤8 EU / ml。
蛋白質濃度為12 – 18 mg / ml。PCR未檢測到mycoplasma污染。
在不含酚紅的Dulbecco改良型Eagle培養基（DMEM）中提供，含10 µg / ml硫酸慶大霉素(gentamicin sulfate)。
凝膠穩定性(Gel stability tested)在37°C下測試14天。
Tube Formation Assay – Cultrex RGF BME supports formation of capillary-like structures by human (HBMVEC; HUVEC) or mouse (SVEC4-10) endothelial cells in a tube formation assay.

確定每個批次的生物活性(Biological activity)：管形成分析(Tube formation assay)– BME促進人（HBMVEC; HUVEC）或小鼠（SVEC4-10）內皮細胞形成毛細血管樣結構。

引用文獻15⁺

厚凝膠法(Thick Gel Method)：

1. 如上所述解凍 Cultrex BME。

2. 緩慢上下吹打溶液混合 Cultrex BME；小心不要引入氣泡。

3. 將每平方厘米 200-300 μL 移液到生長表面上。

4. 將塗層物體在 37 °C 下放置 30 分鐘。

5. 塗層物體即可使用。

薄層法（Thin Layer Method 非膠凝）：

1. 如上所述解凍 Cultrex BME。

2. 緩慢上下吹打溶液混合 Cultrex BME；小心不要引入氣泡。

3. 在冷的無血清培養基中將 Cultrex BME 稀釋至所需濃度。推薦 1:100 稀釋用於原代細胞的繁殖。可能需要根據您的應用確定最佳塗層濃度。

4. 添加足量的溶液以覆蓋整個生長表面積。建議體積為 300 µL/cm2。

5. 在室溫下孵育塗層物體一小時。

6. 吸出包被溶液並立即平板細胞。不要讓塗層表面變乾。

REFERENCES

1. Albini, A. et al. (1987) Cancer Res. 47:3239.

2. Fridman, R. et al. (1990) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 87:6698.

3. Fridman, R. et al. (1991) J. Natl. Cancer Inst. 83:769.

4. Fridman, R. et al. (1992) Int. J. Cancer 51:740.

5. Kubota, Y. et al. (1988) J. Cell Biol. 107:1589.

6. Ponce, M. et al. (1999) Circ. Res. 84:688.

7. Eisenstein, M. (2006) Nature Methods 3:1035.

8. Benton, G. et al., (2009) J. Cell. Physiol. 221:18.

9. Arnaoutova, I. et al. (2009) Angiogenesis 12:267.

10. Arnaoutova, I. et al. (2010) Nature Protocol 5:628.

11. Benton, G. et al. (2011) Int. J. Cancer 128:1751.

12. Arnaoutova, I. et al. (2012) Stem Cell Rev. 8:163.

13. Fridman, R. et al. (2012) Nature Protocol 17:1138.

產品型號	產品名稱	包裝
3432-001-01 3432-005-01 3432-010-01	Cultrex® Basement Membrane Extract, PathClear®	1 ml 5 ml 2 × 5 ml
3440-100-01	Cultrex Rat Collagen I 3440-005-01 (5 mg)/3440-100-01 (100 mg)	3440-005-01 (5 mg) 3440-100-01 (100 mg)
3410-010-02	Cultrex Mouse Collagen IV	1mg
3400-010-02	Cultrex Mouse Laminin I, Pathclear	1mg
1030-FN-01M	Bovine Fibronectin Protein, CF	1mg
3433-001-01 3433-005-01 3433-010-01	Cultrex® Reduced Growth Factor Basement Membrane Extract, PathClear®	1 ml 5 ml 2 × 5 ml
3532-001-02 3532-005-02 3532-010-02	Cultrex® Basement Membrane Extract, Type 2, PathClear®	1 ml 5 ml 2 × 5 ml
3533-001-02 3533-005-02 3533-010-02	Cultrex® Reduced Growth Factor Basement Membrane Extract, Type 2, PathClear®	1 ml 5 ml 2 × 5 ml
3632-001-02 3632-005-02 3632-010-02	Cultrex® Basement Membrane Extract, Type 3, PathClear®	1 ml 5 ml 2 × 5 ml
3445-001-01 3445-005-01 3445-010-01	Cultrex® 3-D Culture Matrix™ Reduced Growth Factor Basement Membrane Extract, PathClear®	1 ml 5 ml 2 × 5 ml
3415-001-03	Cultrex® Stem Cell Qualified Human Basement Membrane Extract, PathClear®	1 ml
3434-001-02 3434-005-02	Cultrex® Stem Cell Qualified Reduced Growth Factor Basement Membrane Extract, PathClear®	1 ml 5 ml
3430-50-01	100X Phenol Red Solution	50 µl

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