脂肪酸攝取測定 | Fatty Acid Uptake Assay Kit (Cell-Based)貨號K408-100 (ABCAM ab287857)
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Fatty Acid Uptake Assay Kit (Cell-Based) (ABCAM ab287857)
產品介紹: 脂肪酸(Fatty acids)是必需的飲食營養物質(essential dietary nutrients)，由與長脂肪族烴鏈(long aliphatic hydrocarbon chain)相連的羧酸部分組成。它們是更複雜的脂質（例如形成細胞膜的脂質）的基本構建基塊。在血液中，長鏈脂肪酸與血清白蛋白(serum albumin)結合，並通過SLC27跨膜轉運蛋白(transmembrane transporter proteins)家族的成員轉運到細胞中。脂肪細胞攝取長鏈游離脂肪酸(adipocyte fatty acid uptake)對於調節循環脂質水平和細胞脂質代謝至關重要。脂肪細胞脂肪酸攝入和脂質代謝異常是肥胖(obesity)，糖尿病(diabetes )/代謝綜合徵(metabolic syndrome)，心血管疾病(cardiovascular disorders)和非酒精性脂肪肝疾病（nonalcoholic fatty liver disease , NAFLD）的主要促成因素。由於飲食和運動在對抗肥胖方面始終未能取得任何持久的結果，因此正在研究以脂肪酸為吸收目標的藥理學作為一種潛在的治療策略。 BioVision的脂肪酸攝取測定試劑盒(Fatty Acid Uptake Assay Kit)可快速測定表達脂肪酸轉運蛋白的活細胞中之即時脂肪酸攝取動力學(real-time fatty acid uptake kinetics)。該測定法使用高螢光長鏈脂肪酸類似物（Ex / Em = 488/523 nm），該類似物充當跨膜脂肪酸轉運蛋白（transmembrane fatty acid transporters , FATP）的底物並積聚在細胞內脂質小滴中。專有的無毒不可滲透膜淬滅劑消除了細胞外空間產生的任何螢光，從而確保了細胞內脂肪酸積累的特定測量，而無需任何繁瑣的洗滌步驟。該測定法高度靈敏，具有簡單的“mix-and-read”方案，並且高通量適用於篩選脂肪酸攝取調節性測試化合物或治療條件。該試劑盒包含一套完整的試劑，足以在96孔板中進行100次反應
螢光成像顯示 60 分鐘後螢光脂肪酸類似物的吸收程度。 (i) 未分化的3T3-L1 纖維母細胞，(ii-iv) 以(ii) 載體（含0.1% DMSO 的培養基）、(iii) 250 nM 胰島素或(iv) 250 nM 胰島素和5 μM 預處理的分化3T3-L1 脂肪細胞渥曼青黴素。使用 Nikon TE2000 倒置顯微鏡使用 20X Plan Fluor 物鏡和 FITC 濾光片立方體取得螢光影像。
在存在劑量遞增的胰島素（0、25 和 250 nM）以及胰島素和渥曼青黴素混合物（250 nM + 5 μM）的情況下，3T3-L1 脂肪細胞中的終點螢光。加入攝取反應混合物 60 分鐘後測量螢光。數據為 4 個獨立板的平均值 RFU ± SEM，每個數據點代表四個孔的平均值。
| Cat # +Size | K408-100 (ABCAM ab287857) |
| Size | 100 assays |
| Kit Summary | • Detection method- Fluorescence (Ex/Em = 488/523 nm) • Species reactivity- Mammalian • Applications- This easy-to-use, one-step, non-radioactive kit can detect free fatty acid uptake using a variety of cell types. |
| Detection Method | Fluorescence (Ex/Em: 488/523 nm) |
| Species Reactivity | Eukaryotes |
| Applications | • Characterization of fatty acid uptake kinetics in live cells. • Screening and characterization of drugs and test compounds for modulation of fatty acid uptake. |
| Features & Benefits | • Simple procedure (One Step) • Fast and convenient • The assay is easy, non-radioactive, and highly sensitive |
| Kit Components | • Uptake Assay Buffer • Extracellular Quenching Solution (100X) • Fluorescent Fatty Acid Probe (200X) |
| Storage Conditions | -20°C |
| Shipping Conditions | Gel Pack |
| USAGE | For Research Use Only! Not For Use in Humans. |