SYK Stable Ba/F3 Cell Line | GFP-ETV6-SYK/SED2 Vector ABMGOOD貨號T3093
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Abmgood藥物篩選平台 | 細胞系列商品 (immortalized cell)
SYK Stable Ba/F3 Cell Line | 貨號T3093 細胞數量1×106 cells / 1.0 ml
SYK Stable Ba/F3 Cell Line （GFP-ETV6-SYK/SED2 Vector）
| Organism | Mus musculus |
| Source Organ | Bone Marrow |
| BioSafety Level | I |
| Growth Properties | Suspension |
| Morphology | Round |
| Recommended Seeding Density | Thaw entire contents into an appropriate T25 flask as specified in the Propagation instructions. |
SYK Stable Ba/F3 Cell Line細胞株 | 不杇方法 : SYK tyrosine kinase (GFP-ETV6-SYK) via retroviral transduction | 器官來源Bone Marrow | 細胞培養條件: 培養液PriGrowII (貨號TM002)，胎牛血清(Cat. No. TM999)最終濃度為10%並填加1% Penicillin/Streptomycin(G255)。Carbon dioxide (CO2), 5%. Temperature: 37.0°C.
將kinase domain激酶結構域融合至homodimerization domain同源二聚化結構域（ETV6的PNT domain結構域）可激活激酶kinase。 SYK Stable Ba / F3細胞株可表現活化的SYK酪氨酸激酶並具GFP報導蛋白表現（GFP-ETV6-SYK架構於SED2載體）。 表達活化的酪氨酸激酶的Ba / F3細胞完全依賴於激酶活性的存活，因此即使在不存在IL-3的情況下也可以繁殖細胞。This cell line carries the SED2 vector which does not have any selection markers
SYK non-receptor非受體酪氨酸激酶家族通常在hematopoietic cells造血細胞中組成蛋白質。 該家族在開發和維持適當的免疫系統中非常重要。 SYK在造血細胞中廣泛表達，並參與將活化的coupling activated immunoreceptors 免疫受體偶聯至不同細胞下游反應，包括proliferation增殖，differentiation分化和phagocytosis吞噬作用。 它被認為是epithelial cell growth上皮細胞生長的調節劑和human breast carcinomas人乳腺癌中潛在的tumour suppressor腫瘤抑制因子。
黴漿菌PCR偵測 | DAPI染核 | 細胞內黴漿菌去除劑 | 水浴槽抑菌劑 | 噴霧式去黴劑 等系列商品
Abmgood不朽化系列商品 (immortalized reagenet) Ready-to-use
Abmgood公司於人類與老鼠不朽之細胞株上，具有幾十年的實驗經驗；提供一系列不朽 (immortalized)化之細胞株、及不朽化之試劑商品。ready-to-use定量好之retrovirus、lentiviru、 adenovirus，可直接加於細胞中進行感染表現；病毒液包括有SV40重組病毒、EBV重組病毒、hTERT病毒液、Myc基因病毒液、p53基因病毒液、Rb基因病毒液、Ras基因病毒液。提供106及109兩種包裝力價之病毒液；亦提供一系列病毒力價濃縮與定量試劑商品。
細胞不朽化的工具中，SV40 T antigen是最簡單且最常用來造成不朽化細胞生成的方法。多數的病毒基因和抑癌基因（p53、Rb等）的不活化相關，會誘導細胞處於replicative senescence的階段。目前也有研究顯示被感染的細胞，SV40 T anbtigen會誘導端粒酶（Telomerase）的活性。與端粒（telomere）長度相關的Telomerase Reverse Transcriptase protein (TERT)是一種不朽細胞的研究應用。平常細胞中，hTERT是處於不活化態，必要時會進行活化保持telomere的長度，避免細胞發生replicative senescence的現象。某些細胞hTERT 過度表現（over-expression）對於誘發細胞不朽化是無效的（如初代上皮細胞），反而會造成細胞死亡；同時表現hTERT catalytic subunit以及p53或RB siRNA在人類初代卵巢上皮細胞會造成細胞不朽化。過度表現Ras或Myc T58A mutants也有初代細胞不朽化的現象產生。
Decomplement加熱非活化FBS：
1.讓FBS瓶在4°C下完全解凍過夜。
2.將FBS瓶置於56°C的水浴中30分鐘。
Decomplemented FBS可以在-20°C下長期保存。避免頻繁的凍融循環。每2-3天更換一次完整的媒體。不要讓介質顏色變為黃色。
Thawing細胞解凍方法：(每種細胞建議條件可能有許不同，依照原廠建議操作，以下為通用方式)
1.在37℃水浴中解凍小瓶，直到只有一小塊冰塊。
2.將細胞轉移到含有5ml pre-warmed complete media 之15ml管中。
3.將細胞以290xg離心5分鐘。
4.小心丟棄上清液，不要打擾細胞沉澱，輕輕地上下移液，將細胞重新懸浮在1ml完全培養基中。
5.將細胞培養在150,000-200,000個細胞/ cm2。
Subculture細胞繼代方法: (每種細胞建議條件可能有許不同，依照原廠建議操作，以下為通用方式)
1.當細胞70-90％ confluency時，建議繼代培養。
- Aspirate old media。懸浮液中的一些細胞仍然是活細胞。或者，也可以收集含有懸浮細胞的上清液並離心（Skip to Step 6 in protocol）。
3.加入1：1比例的1X無菌PBS和0.25％胰蛋白酶-EDTA（TM051）。
4.在室溫下孵育細胞3-5分鐘並攪拌培養容器直至90％的細胞脫落。
- 中和胰蛋白酶:添加等量之trypsin + PBS。
6.收集細胞並以290xg離心5分鐘。
7.丟棄上清液，輕輕地上下移液，將細胞重新懸浮在完全培養基中。
8.建議split ratio比不超過1：3。
可以使用PolyIC（5μg/ ml），CpG（2mM）或LPS（5μg/ ml）進行刺激。這些細胞對FBS的要求特別敏感，因此，建議使用相同的批次培養能夠支持其培養的最佳結果的細胞。我們還建議在完整培養基中添加額外的1％Hepes以促進細胞繁殖。
Freezing細胞凍結：(每種細胞建議條件可能有許不同，依照原廠建議操作，以下為通用方式)
Complete growth medium with decomplemented FBS to a final concentration of 50% from PAN Biotech (P40-37500) or from Nucleus Biologics (FBS1824-001) and 5% DMSO.
儲存溫度：液氮氣相。重要提示：此細胞係對FBS批次非常敏感。我們強烈建議最終用戶使用從PAN biotech或Nucleus Biologics 之FBS。