Abmgood不朽化系列商品 (immortalized cell)

永生化人類皮膚角化細胞（16E6 / E7 HFK） | 貨號T0658

Immortalized Human Foreskin Keratinocytes (16E6/E7 HFK)

永生化人類外皮角化細胞（16E6 / E7 HFK）來源於新生兒的包皮組織，並用表達HPV-16E7和HPV-16E6的逆轉錄病毒轉染。 HPV-16 E6和E7延遲細胞分化，即使進入表皮上皮層之後，永生化細胞仍處於DNA合成狀態。 血清誘導和鈣誘導的永生化人類包皮角質形成細胞的分化也被HPV-16 E6抑制。 在這些永生化細胞中，HPV-16 E6和E7的調控基因可能在HPV生命週期和HPV介導的致癌作用中起作用，這使得永生化人類包皮角質形成細胞（16E6 / E7 HFK）不僅作為一個模型 在免疫學中也是在基因調控研究中。

人類皮膚角化細胞（16E6 / E7 HFK）細胞特性: Adherent / Polygonal | 不杇方法: retrovirus expressing HPV-16 E7 and HPV-16 E6 | 來源Foreskin tissue。細胞培養條件:使用PriCoat™T25培養瓶 (貨號G299) 以最佳化初代和不朽細胞的生長、增殖和擴增。或塗層細胞外基質(Applied Cell Extracellular Matrix) 增強細胞貼附 (貨號G422)。Grow cells in ECM-coated culture vessels with the following conditions. 培養液Keratinocyte-SFM (Gibco-BRL, Rockville, MD)，填加1% Penicillin/Streptomycin 。1%. Atmosphere: air, 95%; Carbon dioxide (CO2), 5%. Temperature: 37.0°C。

細胞特性: 型態為Polygonal。細胞培養液更換大約1週2-3次；細胞繼代為胰蛋白酶溶液0.25% trypsin(TM050) 的下37℃下incubator 3-5分鐘，直到細胞環繞，在顯微鏡下不時監測。細胞外基質Coating dish，用PBS稀釋G422（1：1）並塗覆更少的時間。膠原蛋白含量較高，從而使與細胞的結合更強。可以嘗試減少incubator時間以及塗覆更薄的層。

 

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Abmgood不朽化系列商品 (immortalized reagenet) Ready-to-use

Abmgood公司於人類與老鼠不朽之細胞株上，具有幾十年的實驗經驗；提供一系列不朽 (immortalized)化之細胞株、及不朽化之試劑商品。ready-to-use定量好之retrovirus、lentiviru、 adenovirus，可直接加於細胞中進行感染表現；病毒液包括有SV40重組病毒、EBV重組病毒、hTERT病毒液、Myc基因病毒液、p53基因病毒液、Rb基因病毒液、Ras基因病毒液。提供106及109兩種包裝力價之病毒液；亦提供一系列病毒力價濃縮與定量試劑商品。

細胞不朽化的工具中，SV40 T antigen是最簡單且最常用來造成不朽化細胞生成的方法。多數的病毒基因和抑癌基因（p53、Rb等）的不活化相關，會誘導細胞處於replicative senescence的階段。目前也有研究顯示被感染的細胞，SV40 T anbtigen會誘導端粒酶（Telomerase）的活性。與端粒（telomere）長度相關的Telomerase Reverse Transcriptase protein (TERT)是一種不朽細胞的研究應用。平常細胞中，hTERT是處於不活化態，必要時會進行活化保持telomere的長度，避免細胞發生replicative senescence的現象。某些細胞hTERT 過度表現（over-expression）對於誘發細胞不朽化是無效的（如初代上皮細胞），反而會造成細胞死亡；同時表現hTERT catalytic subunit以及p53或RB siRNA在人類初代卵巢上皮細胞會造成細胞不朽化。過度表現Ras或Myc T58A mutants也有初代細胞不朽化的現象產生。