人類乳腺成纖維細胞– hTERT | Immortalized Human Mammary Fibroblasts (HMF3A)(貨號 T0153)

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Abmgood不朽化系列商品 (immortalized cell)
永生化人類乳腺成纖維細胞(HMF3A)– hTERT (貨號 T0153)
Immortalized Human Mammary Fibroblasts (HMF3A)
人類乳腺成纖維細胞 – hTERT;通過與SV40大T抗原的溫度敏感突變體(U19tsA58)和人端粒酶(hTERT)的催化亞單位組合轉導乳腺成纖維細胞,產生Immortalized人乳腺成纖維細胞(HMF3A)。 HMF3A細胞在33.5℃的溫度下生長最好,並在36.5℃完全停止。 這些細胞與永生化人類乳腺成纖維細胞(HMF3S)(abm,T0154)不同,是溫度敏感的。 這些有條件的永生化細胞適用於細胞工程,理論上能夠產生不朽的二倍體人類細胞系。

人類乳腺成纖維細胞 – hTERT 細胞特性: Adherent / Spindle | 不杇方法: hTERT | 來源Mammary Tissue 。細胞培養條件: The cells must be split 1:5 twice a week.使用PriCoat™T25培養瓶 (貨號G299) 以最佳化初代和不朽細胞的生長、增殖和擴增。或塗層細胞外基質(Applied Cell Extracellular Matrix) 增強細胞貼附 (貨號G422)。Grow cells in ECM-coated culture vessels with the following conditions. 培養液PriGrowI II(貨號 TM003),胎牛血清(Cat. No. TM999)最終濃度為10%並填加1% Penicillin/Streptomycin 。1%. Atmosphere: air, 95%; Carbon dioxide (CO2), 5%. Temperature: 37.0°C

其它細胞株 人乳腺上皮細胞(HMEC 2.6) | 人乳腺前驅細胞 (K5+/K19+) Cells | 永生化人類乳腺成纖維細胞(HMF3A)
| BioSafety Level | II |
| Organism | Homo sapiens |
| Source Organ | Mammary Tissue |
| Growth Properties | Adherent |
| Morphology | Spindle |
| Recommended Seeding Density | Thaw entire contents into an appropriate T25 flask as specified in the Propagation instructions. |
| Applications | For Research Use Only |
| Immortalization Method | Combined transduction with retrovirus carrying a temperature sensitive mutant (U19tsA58) of the SV40 Large T Antigen and a catalytic subunit of human telomerase (hTERT) |
細胞特性: 型態為Spindle。細胞培養液更換大約1週2次;細胞繼代為胰蛋白酶溶液0.25% trypsin(TM050) 的下37℃下incubator 3-5分鐘,直到細胞環繞,在顯微鏡下不時監測。細胞外基質Coating dish,用PBS稀釋G422(1:1)並塗覆更少的時間。膠原蛋白含量較高,從而使與細胞的結合更強。可以嘗試減少incubator時間以及塗覆更薄的層。
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Abmgood不朽化系列商品 (immortalized reagenet) Ready-to-use
Abmgood公司於人類與老鼠不朽之細胞株上,具有幾十年的實驗經驗;提供一系列不朽 (immortalized)化之細胞株、及不朽化之試劑商品。ready-to-use定量好之retrovirus、lentiviru、 adenovirus,可直接加於細胞中進行感染表現;病毒液包括有SV40重組病毒、EBV重組病毒、hTERT病毒液、Myc基因病毒液、p53基因病毒液、Rb基因病毒液、Ras基因病毒液。提供106及109兩種包裝力價之病毒液;亦提供一系列病毒力價濃縮與定量試劑商品。
細胞不朽化的工具中,SV40 T antigen是最簡單且最常用來造成不朽化細胞生成的方法。多數的病毒基因和抑癌基因(p53、Rb等)的不活化相關,會誘導細胞處於replicative senescence的階段。目前也有研究顯示被感染的細胞,SV40 T anbtigen會誘導端粒酶(Telomerase)的活性。與端粒(telomere)長度相關的Telomerase Reverse Transcriptase protein (TERT)是一種不朽細胞的研究應用。平常細胞中,hTERT是處於不活化態,必要時會進行活化保持telomere的長度,避免細胞發生replicative senescence的現象。某些細胞hTERT 過度表現(over-expression)對於誘發細胞不朽化是無效的(如初代上皮細胞),反而會造成細胞死亡;同時表現hTERT catalytic subunit以及p53或RB siRNA在人類初代卵巢上皮細胞會造成細胞不朽化。過度表現Ras或Myc T58A mutants也有初代細胞不朽化的現象產生。
