【ViralEntry™病毒轉導增強劑】 Primary T-Cell 淋巴細胞高效轉導效率ABM貨號G515
ViralEntry™病毒轉導增強劑 | Primary T淋巴細胞高效轉導效率 貨號G515
Abm專業生產重組病毒載體(慢病毒,腺病毒和AAV),在提高病毒載體轉導效率方面擁有15年以上的經驗。結合各方病毒經驗,並開發了多種病毒增強劑製劑,可用於提高病毒載體轉導效率。有效的病毒增強劑ViralEntry™,不僅有效增強慢病毒和AAV載體的轉導效率均顯著提高;包括原代T淋巴細胞在內的多種細胞類型的轉導效率提高了10倍以上。優於市場上的任何類似產品。
ViralEntry™轉導增強劑 | 病毒轉導增強劑 ViralEntry™ Transduction EnhancerG515 1ML
abm’s ViralEntry™ Transduction Enhancer boosts transduction efficiency by up to 100X in a broad range of cells. HEK293T, HeLa, K562, Primary Human T Cells, and Primary Swine Spleen Macrophages were transduced with Scrambled siRNA GFP Lentivirus (Cat. No. LVP015-G) without using a transduction enhancer and using abm‘s ViralEntry™ Transduction Enhancer (Cat. No. G515). abm的ViralEntry™轉導增強劑可在多種細胞中將轉導效率提高100倍。 HEK293T,HeLa,K562,原代人T細胞和原代豬脾巨噬細胞(Primary Swine Spleen Macrophages)用 Scrambled siRNA GFP 慢病毒(貨號LVP015-G)進行轉導,而不使用轉導增強劑(transduction enhancer ),而使用Abm的ViralEntry™轉導增強劑(貨號G515)。
Boosts transduction efficiency up to 100X; Works with difficult cells (T & B cells); Easy-to-use: add directly into media
ViralEntry™簡易操作手冊說明:
A)對於貼壁和/或懸浮細胞(直接培養-適用於6孔板)
1.第一天。在感染前24小時,將您的目標細胞接種在6孔板中的2×105細胞/孔。
2.第2天。將ViralEntryTM以1:100的比例添加到培養基中,並輕輕混合。用每個孔感染最佳MOI的重組病毒。在適當的溫度(°C)下孵育細胞,然後二氧化碳(%) 條件。MOI =所用病毒的感染單位/細胞數。
3.第4天。更換生長培養基。如果重組病毒包含耐藥基因,為了產生穩定的細胞克隆,將細胞傳代培養到10厘米培養皿中進行藥物選擇。如果重組病毒包含螢光標籤,可以評估轉導效率通過在螢光顯微鏡下檢查訊號。
B)對於懸浮細胞(旋接種-適用於24孔板)T-細胞建議使用此方法
第一天
a用適當的生長培養基稀釋ViralEntryTM 1:100。輕輕混合。
b. 向24孔板的一個孔中加入400 µl 1:100增強劑混合物,並放入CO2中孵化器。
c. 加1×105無菌1.5 ml Eppendorf管中的活細胞,以1500 rpm旋轉5分鐘,吸出上清液,並用100 µl 1:100重懸沉澱增強劑混合。
d. 以最佳MOI加入重組病毒,並輕輕敲打混合。
e. 保持室溫10分鐘,同時每2-3分鐘輕輕敲打試管
f. 以3200 rpm的轉速旋轉20分鐘。
g. 輕輕地重懸細胞沉澱並將懸浮液轉移至24孔板包含400 µl稀釋的ViralEntryTM(步驟b)。適當孵育細胞溫度(°C)和二氧化碳(%) 條件。
第3天
更換生長培養基。如果重組病毒包含耐藥基因,每隔3-4天用包含藥物的介質替換介質來開始藥物選擇,直到可以鑑定出耐藥細胞。如果重組病毒包含螢光標籤,
可以通過顯微鏡檢查螢光下的信號來評估轉導效率。