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5mins Stripping buffer | 抗體抗原去除液 貨號 JB11-K002

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Stripping buffer操作手冊

特點

【Membrane stripping for western blot】西方墨點法之相關緩衝液 -Stripping buffer

Western Blot Stripping Buffer | 500ml T-PRO 貨號JB11-K002

5 mins 快速抗體抗原去除液 Western Blot Stripping Buffer (JB11-K002) Stripping buffer目的用於Western Blot中,去除已經用化學發光的抗體;再重新探測。去除膜可以是硝化纖維素或PVDF /尼龍。產品特點: 5~15分鐘即可完成印跡剝離。無須加熱, 只需室溫孵育。無惡臭氣味,且不添加2-mercaptoethanol或其類似物。採用環保無害的有機溶劑(氣味輕微)的專有配方,可完全分離結合的抗體。彈性應用廣-  NC或PVDF轉漬膜皆適用。Stripping 並重新檢測蛋白質印跡 ( western blot) 是一種將一抗和二抗從蛋白質印跡中去除,以便重新檢測印跡的方法。blot可以剝離並重新檢測多次,以顯示其他蛋白質或優化對某種蛋白質的檢測(例如,抗體濃度),而無需多次凝膠電泳和轉印。

T-Pro Western Blot 剝離試劑使用方法

• 將10 ml剝離試劑倒入乾淨的容器中,並將膜放入其中。確保膜完全浸沒在剝離緩衝液中。

• 將膜在室溫下與剝離試劑一起孵育3分鐘,並劇烈攪拌兩次。對於高親和力抗體,孵育時間需要最佳化,通常對於大多數抗體,37℃下剝離5~10分鐘即可。

• 在室溫下使用大量(例如 100 毫升)的 TBS-T 或 PBS-T 清洗膜兩次

什麼是膜剝離 (membrane stripping)?

膜剝離 (Membrane stripping) 是從蛋白質印跡膜上去除一抗和二抗的過程。其目的是在不切開膜的情況下在同一印跡上研究多種蛋白質。膜剝離 (Membrane stripping) 在檢測目標蛋白質的同時使用合適的上樣對照,或研究兩種分子量相近的蛋白質時尤其有用。膜剝離 (Membrane stripping) 也在其他情況下非常有用。例如,當使用了錯誤的抗體,或由於背景訊號過高而必須重新進行膜封閉時,膜剝離 (Membrane stripping) 非常有用。透過stripping並重新檢測單個薄膜,您可以節省樣品和時間,避免運行和印跡多個凝膠。避免對剝離前後檢測的標靶進行定量比較,因為該操作會從膜上去除一些樣品蛋白質。基於同樣的原因,不應檢測剝離後的膜來證明蛋白質的缺失,例如用於敲除測試或RNAi實驗。我們建議使用 PVDF 膜來最大限度地減少樣品蛋白質的損失,因為硝酸纖維素膜往往會有更嚴重的蛋白質損失。

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