鞘磷脂測定試劑盒| Sphingomyelin Assay Kit Abnova貨號Abnova™KA1373
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鞘磷脂測定試劑盒| Sphingomyelin Assay Kit Abnova貨號Abnova™KA1373
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鞘磷脂檢測試劑盒(Sphingomyelin Assay Kit Abnova貨號Abnova™KA1311) 提供了一種定量血漿或血清中鞘磷脂的方法。
Sphingomyelin (ceramide phosphorylcholine) is an important lipid component of cell membranes and lipoproteins. It consists of a ceramide moiety linked via a phosphodiester bond to phosphorylcholine. Sphingomyelinases are a family of enzymes that can hydrolyze sphingomyelin into ceramide and phosphorylcholine (see Figure 1).1 Ceramides have been implicated as key mediators in signaling pathways, with outcomes as diverse as cell proliferation, differentiation, growth arrest, and apoptosis.1,2 An inherited deficiency of acid sphingomyelinase activity results in the sphingomyelin storage disorder Niemann-Pick disease.3 This disease results in the accumulation of sphinogmyelin in cells, tissues, and fluids. Since sphingomyelin has been implicated in the pathogenesis of several diseases, including atherosclerosis, sensitive and reliable techniques for its quantification are of considerable importance
鞘磷脂(Sphingomyelin)(ceramide phosphorylcholine, 神經醯胺磷酸膽鹼)是細胞膜(cell membranes)和脂蛋白( lipoproteins)的重要脂質組成。它由通過磷酸二酯鍵(phosphodiester bond )與磷酸膽鹼連接的神經酰胺部分組成。鞘磷脂酶是一類酶,可將鞘磷脂水解成神經醯胺和磷酸膽鹼(見圖1)。神經醯胺(Ceramides)被認為是訊號通路中的關鍵介質,包括細胞增殖(cell proliferation)、分化(differentiation)、生長停滯( growth arrest)和凋亡(apoptosis) 。由於鞘磷脂與包括動脈粥狀硬化(atherosclerosis) 在內的多種疾病的發病機制有關,因此靈敏可靠的定量技術非常重要。
檢測原理
鞘磷脂檢測試劑盒(The Sphingomyelin Assay Kit) 提供了一種特異性、靈敏且方便的方法來定量血漿或血清中的鞘磷脂。在此測定中,首先使用鞘磷脂酶(sphingomyelinase)將鞘磷脂(sphingomyelin )水解為磷酸膽鹼(phosphorylcholine)和神經醯胺(ceramide)。然後鹼性磷酸酶從磷酸膽鹼產生膽鹼,新形成的膽鹼用於在膽鹼氧化酶催化的反應中產生過氧化氫。最後,以過氧化物酶為催化劑,過氧化氫與 DAOS 和 4-氨基安替比林反應,產生藍色,在 595 nm 處有最佳吸收(見圖 2)。
Figure 1. Ceramide/Sphingosine Metabolism
Figure 2. Assay Scheme
樣本製備 【鞘磷脂測定試劑盒】
✓ 血漿 人類血漿中鞘磷脂的典型濃度為 25-60 mg/dL。 將血液在 4°C 下以 700-1,000 x g 離心 10 分鐘。吸走頂部黃色血漿層而不干擾白色血沉棕黃層。將血漿儲存在冰上。如果不在同一天進行測定,請冷凍在 -80°C 下。血漿樣本在-80°C保存時可穩定保存1個月。 檢測前無需稀釋血漿。
✓ 血清 人類血清中鞘磷脂的典型濃度為 25-60 mg/dL。 讓血液在 25°C 下凝固 30 分鐘。 將血液在 4°C 下以 2,000 x g 離心 15 分鐘。吸走頂部黃色血清層而不干擾白色血沉棕黃層。將血清儲存在冰上。如果不在同一天進行測定,請冷凍在 -80°C 下。血清樣本在-80°C保存可穩定1個月。 測定前無需稀釋血清。