細胞活力試劑盒 | ATP形成與降解測量 | 微生物ATP檢測套組 

　　BioThema於2001年建立於瑞典，專門研發生產冷光（Bioluminescence）之相關產品，提供高品質、高穩定性之ATP與冷光分析試劑套組。其應用包括快速細胞計數、細胞增生與毒性、免疫試驗、酵素與代謝物監控、Luciferase reporter geneassay、環境衛生檢測等分析。

　　ATP生物冷光反應技術是一種快速檢測方法，用以檢測生物ATP的含量。此方法為美國太空總署於1960年代發展出來的技術，當初發展此項技術的目的是希望能用以檢測外太空是否有生命物質存在，其反應原理與螢火蟲體內發光反應相同，在螢光素（luciferin）與螢光酵素（luciferase）存在下，ATP與luciferin及luciferase催化下產生淡藍色的光。反應方程式如下：

　　近來生物ATP冷光反應在食品與醫藥領域中被廣泛使用。以原核生物而言，一隻細菌體內約含2 x 10^-18 mol ATP；真菌細胞則含10^-15～10^-16 mol ATP。應用ATP冷光反應技術檢測生菌數時，需先將食品中非微生物的ATP水解，再將微生物體內的ATP釋放出來，反應後以ATP生物冷光儀偵測。若檢測食品接觸表面的清潔度，則無需去除食品中的ATP，直接測量即可。檢測結果則以相對吸光值（relative light unit, RLU）的多寡來表示ATP濃度的高低，藉此反推微生物含量和可能的食物殘留，以表示食物接觸面清潔度的情況。

　　目前ATP生物冷光反應技術應用在各項食品產業，包括生乳生菌數估算、環境設備清潔評估、畜產業中屠體的污染評估、果汁產業的生菌數估算、製酒工業及飲料業等。

微生物快速定量套組產品分類：

產品編號	品名	規格
266-112	Microbial ATP Kit HS	375 test
266-111	Intracellular ATP Kit HS	375 test
266-311	ATP Biomass Kit HS	375 test

Microbial ATP Kit HS, 266-112 微生物ATP檢測套組 可選擇微孔板和 cuvette 方法測量

微生物的ATP試劑盒 (貨號誌266-112)，用於檢測細菌ATP (adenosine triphosphate)的含量。當檢體來自體液、唾液等，可經由套組內的ATP消除試劑，先移除或降解掉細菌以外的ATP來源。細菌感染人體後，很難經由全部樣品中，直接測量細菌的細胞數。因此必須在進行測量細菌細胞數前，先移除或降解掉細菌以外的ATP；最後真實測量細菌本身之ATP含量。

微生物ATP檢測套組 | 產品特點

1. 2×10^-18 mole ATP per cell
2. 移除細菌外ATP，測量真正之細菌數
3. ATP試劑的改良，每分6%的速度衰減
4. ATP分析的校正-不須Standard curve
5. 15分鐘內完成ATP活性分析

Biothema AB成立1987年，是世界上專業利用螢火蟲酶 (Luciferase) 技術進行細胞、基因、酶與新陳代謝研究的領先者。Biotherma公司創始人Arne Lundin 博士是此領域的國際權威人物。www.biothema.com Biotherma核心技術Biotherma基於螢火蟲螢光素酶Luciferase技術，提供高品質的ATP試劑，其具有高靈敏度及使用簡單。

產品編號	產品名稱	規格
ATP生成代謝
111-021	Kinase RR Kit－偵測Kinase或aminoacyl tRNA合成酶及相關受質	1000 tests
144-041	ATP Kit SL－偵測ATP生成與降解	1000 tests
快速細胞計數與細胞毒性分析
155-050	Cellular ATP Kit HTS－偵測Mammalian cells且使用具分注器之冷光儀	1200 tests
188-441	Cell Viability Kit SL－偵測Mammalian cells且使用無分注器之冷光儀	1600 tests
微生物快速定量
266-111	Intracellular ATP Kit HS－偵測含有Mammalian cells及含有細胞外ATP之微生物	375 tests
266-112	Microbial ATP Kit HS－偵測無Mammalian cells但含有細胞外ATP之微生物	375 tests
266-311	ATP Biomass Kit HS－偵測無Mammalian cells及細胞外ATP之微生物	375 tests
Luciferase reporter gene assay
484-001	Luciferase Assay Kit	800 tests
484-102	Luciferase Assay Kit HTS－適合大量分析且無分注器之冷光儀	4800 tests
484-103	Luciferase Assay Kit HTS－適合大量分析且具分注器之冷光儀	4600 tests

Intracellular ATP Kit HS (266-111)操作手冊下載

Microbial ATP Kit HS (266-112)操作手冊下載

ATP Biomass Kit HS (266-311)操作手冊下載

微生物ATP檢測技術 (Microbial ATP Kit HS, 266-112)

ATP含量在所有的活細胞中是相似的，每個細胞中的ATP含量與細胞大小成比例相關。大部份的細菌細胞，大約具有2×10^-18 mole ATP per cell。真核細胞比細菌大，大約含有10^{-15 mole ATP。}

^{Biothema冷光試劑靈敏度最高}

Biothema提供市面上最高靈敏度的ATP試劑，可以檢測Sensitivity10^-17mole ATP。大部份的細菌細胞，大約具有2×10^-18 mole ATP per cell。真核細胞比細菌大，大約含有10^-15 mole ATP。因此檢體內若含有5個細菌細胞，即可測得其ATP含量。

Biothema移除細菌外ATP，測量真正細菌之細胞數

在過去30年中，螢光素酶ATP分析的靈敏度只局限於10^-14。現在提高接近10^-18 mole ATP 。因此更廣泛應用於食品工廠、微生物控制、真核細胞與原核細胞活性分性。細菌感染人體後，很難經由全部樣品中，直接測量細菌的細胞數。因此必須在進行測量細菌細胞數前，先移除或降解掉細菌以外的ATP，例如體液，血液，唾液等等。

ATP試劑的改良，每分10%的速度衰減

Biothema公司20多年於ATP冷光試劑之不斷研究與經驗累積下，提供最佳化ATP冷光試劑。其發光效率以每分鍾10%的速度衰減。因此即使是手動操作，也提供良好的準確性。而此ATP試劑的背景值低於不可檢測的水平範圍 (小於10^-18/檢測)。

ATP分析的校正–不須Standard curve

ATP分析必須通內在ATP標準品來進行校正。獨特內校式ATP標準品，不需另作標準曲線即可快速偵測樣品ATP含量，其測得的數值為絕對單位(mole)，非一般相對單位(RLU)

15分鐘內完成ATP活性分析

細菌外ATP之移除與降解過程大約10分鐘，其於步驟加完即完成。全部流程大約15分內完成。

操作方法:  取20（50）µL樣品與等體積ATP消除試劑(ATP Eliminating Reagent) 混合，室溫10分鐘。

加入20（50）µL Extractant B/S

加入160（400）µL ATP Reagent HS, 並測量冷光 Ismp

加入10（10）µL 100 nmol / L ATP標準液，即1pmol ATP，測量冷光Ismp + std

Microbial ATP KIT HS, 266-112產品特點整理

Fast Assay: Results within minutes Highly Sensitive: 10^-17 mol ATP (~ 5 bacteria) Reliable: Stable, Ready-to-use ATP Standard Cost-efficient: No Standard curve required Flexible: Choice of μ-plate & cuvette method

Microbial ATP KIT HS, 266-112產品規格

一組ATP reagent HS試劑可以做150~375次。每一小管可進行25個Tube luminometer及62.5個microplate luminometer。整組kit包括有6小管ATP reagent HS，所以可進行150個Tube luminometer及375個microplate 。luminometer。

1. ATP Reagent HS (6Vials)凍乾型式；含有螢光素酶(luciferase) 和螢光素( luciferin) 使用前需與 Diluent B溶液重組
2. Diluent B 10ml (6 vials)重組試劑；Buffer used to reconstitute ATP Reagent HS. 重組試劑中的螢光素酶活性   Diluent B 10 mL (6 vials)
3. Extractant B/S 10ml, (1 vial) 細胞ATP萃取液: 釋放細胞內ATP
4. ATP standard 5ml (1 vial), contains 10^-7 mol/L ATP
5. ATP Eliminating Reagent (1 vial) 使用前需與Cell lysing Reagent重組。
6. Cell lysing Reagent重組試劑10ml (1 vial). Used to reconstitute ATP Eliminating Reagnent.