【Fc受體阻斷劑】 Innovex Fc Receptor Block 貨號NB309
【Fc receptor 受體阻斷劑】
適用於阻斷所有類型的Fc Receptor受體,例如 I receptors ,II receptors 和III型Fc-γ受體; Fc-ε受體I和II型; Fc –α受體,Fcα/ µR和FcRn。
Fc受體(Fc receptors , FcR)是分子量約為50-70 kD的糖蛋白(glycoproteins)。他們廣泛在整個免疫細胞(immune cells)中表達。它們存在於白血球(leukocytes)如單核細胞(monocytes),組織巨噬細胞(tissue macrophages),B細胞(B cells),粒細胞(granulocytes)嗜酸性粒細胞(eosinophils),嗜鹼性粒細胞(basophils),嗜中性粒細胞(neutrophils),NK細胞和一些T細胞。Fc receptors肥大細胞,濾泡樹突細胞(follicular dendritic cells),上皮細胞(epithelial cells),內皮細胞(endothelial cells),肝細胞上也存在受體和langerhans cells等等。 Fc受體(FcR)有幾種類型,它們基於他們所識別的抗體上。有一些對單體IgG的Fc區具有很高的親和力抗體,稱為Fc-Gamma受體,與IgA抗體結合的抗體稱為Fc-α受體,那些結合IgE抗體的抗體稱為Fc-ε受體。非特異性Fc受體在IHC,免疫螢光(IF)和流式細胞儀等檢測中可以染色。這是由於一抗和二抗的Fc區與細胞上Fc受體的結合所致。在IHC,IF和流式細胞儀中,消除Fc受體染色是理想的。
Innovex Fc受體阻斷劑 (Innovex Fc Receptor Block) | 貨號NB309
Innovex Fc受體阻滯劑 (Innovex Fc Receptor Blocker, NB309) 是一種通用的Fc阻滯劑,適用於阻斷所有類型的Fc Receptor受體,例如 I receptors ,II receptors 和III型Fc-γ受體; Fc-ε受體I和II型; Fc –α受體,Fcα/ µR和FcRn。 Innovex Fc阻斷劑不包含抗體,免疫球蛋白或免疫球蛋白片段。 INNOVEX Fc阻斷劑可用於阻斷人類,小鼠和所有動物等所有物種中的所有類型的Fc受體, 通過多種免疫測定(例如IHC,免疫螢光(Immunofluorescence, IF)和流式細胞儀(Flow cytometry) )檢測細胞和組織。 INNOVEX Fc阻斷劑也常用於消除腦細胞( Brain cells)/組織中(tissues)的背景染色。 Fc受體阻滯劑也可用kappa ,lambda antibodies 及免疫球蛋白( Immunoglobulins , lgs)於 IHC,IF和流式細胞進行特異性染色。 如CD表型(CD phenotyping),白血病分型(leukemia typing )和活細胞功能測定( live cell functional assays)。
產品介紹: Fc受體阻滯劑 (Innovex Fc Receptor Block) ,先進和獨特的功能;阻斷人和動物細胞中的Fc受體。是準確的淋巴瘤,白血病和黑色素瘤分型以及無背景Kappa和λ染色的必需品。Innovex Fc Receptor Block是一種基於peptide based的技術,不含抗體,血清,免疫球蛋白,免疫球蛋白片段或鏈黴蛋白酶。目的為阻斷所有白血球細胞(white blood cells),淋巴瘤(lymphomas)和黑色素瘤(melanomas)中存在的Fc受體(Fc Receptors)。在室溫下對人體組織/細胞進行30分鐘的孵育步驟;動物組織/細胞孵育45分鐘至1小時。消除白血球細胞,淋巴組織,細胞株(血液和骨髓),黑色素瘤和其他表達Fc的腫瘤的假陽性染色,確保准確的淋巴瘤和白血病分型。
Fc受體(Fc Receptors)也在大多數腫瘤(tumors)上表達。阻斷Fc受體對於淋巴(lymphoid)和腫瘤組織(tumor tissues)和細胞的準確分型至關重要。 Fc受體染色通過細胞上存在的Fc受體與初級和/或第二抗體的Fc區的結合而發生。 Fc受體阻斷劑可用於IHC(冷凍和石蠟),免疫螢光(immunofluorescence),流式細胞術(flow cytometry)和原位雜交(in-situ hybridization)。對於活細胞和功能測定,建議使用Azide-Free Fc Block (貨號NB335)。
產品特點:
- Blocks Fc Receptors in both human and animal cells
- 30 minute incubation step at room temperature for human tissues/cells
- 45 minutes to 1-hour incubation for animal tissues/cells
- Eliminates false positive staining of white blood cells, lymphoid tissues, cytosmears (blood & bone marrow), melanoma tumors and other Fc expressing tumors
- Insures accurate lymphoma and leukemia typing
- liminates negative control staining of lymphomas, lymphoid tissues, and blood and bone marrow smears
- Eliminates false positive staining for Kappa and Lambda staining
- Eliminates false positive staining of Reed Sternberg cells
- A must for CD markers staining in IHC, immunofluorescence
- A must for CD phenotyping via flow cytometry
- A must for Immunoglobulins (Igs) staining via IHC, flow cytometry and immunofluorescence
- A must for kappa and lambda staining
文獻資料
https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC4395339/
Ready-to-use IHC kit (Biotin free), One-Step HRP Polymer anti-Mouse, Rat and Rabbit IgG (H+L) with DAB
產品描述:免疫組織化學(Immunohistochemistry , IHC)/免疫細胞化學(Immunocytochemistry , ICC)是通過使用標記的抗體作為特異性試劑,通過抗原 – 抗體相互作用來定位組織切片/細胞中的抗原,抗原 – 抗體相互作用通過諸如螢光染料(fluorescent dye) ,酶(enzyme,) ,放射性元素(radioactive element) 或膠體金的標記物等讓表現可視化。 通常使用幾種IHC技術,例如標記的生物素二抗鏈黴抗生物素蛋白 – 過氧化物酶 (labeled biotin secondary antibody streptavidin-peroxidase, HRP) ,抗HRP-HRP,ABC催化的信號放大,polymer system聚合物系統(一步或兩步)等,以檢測組織和細胞中的抗原。 BioVision的即用型IHC試劑盒採用聚合物技術( polymer system),可提高靈敏度和檢測靈敏度。 IBSC一步法,針對抗小鼠,大鼠和兔IgG(H + L) polymer,不同於免疫生物素/抗生物素蛋白的系統 (biotin/avidin free system),可以對膜 (membrane) ,細胞質 (cytoplasmic) 和核抗原(nuclear antigens) 直接進行染色。 它為用戶提供了快速且易於使用的IHC檢測系統。
Cat # +Size | K405-50 |
Size | 50 tests |
Species Reactivity | Mouse, rat, and rabbit |
Applications | A biotin/avidin free system that stains membrane, cytoplasmic and nuclear antigens. Immunohistochemistry (IHC) and immunocytochemistry (ICC). |
Features & Benefits | • Simple procedure; takes ~ 3 hours • Fast and convenient • The assay is sensitive and stable • The TUNEL-based assay kit provides complete components including positive and negative control cells for convenient detection of DNA fragmentation in cultured cells and tissue sections. |
Kit Components | • Ready-to-use, peroxidase block, hydrogen peroxide • Ready-to-use protein blocking solutions • Primary antibody dilution buffer • IBSC-one-step HRP-anti-mouse, rat, and rabbit polymer • Reagent BS (ready to use buffer & substrate) • Reagent C (conc. DAB chromogen) |
Storage Conditions | 2-8°C |
Shipping Conditions | Gel Pack |
IHC/ICC 免疫組織化學染色步驟-冷凍,石蠟切片和細胞塗片
套組內不包含Washing buffer | Retrieval Solution | positive or negative control | primary antibody | 螢光封片劑 。
將試劑儲存在2-8°C,不要冷凍。使用前將試劑置於常溫,應該同時進行陽性和陰性對照組。
1.組織切片脫蠟 (Deparafinize) 和水合(hydrate )通過二甲苯 (xylene)或其他清除劑和graded alcohols使組織切片脫蠟和水合。注意事項: 對於冷凍切片(frozen sections)或細胞塗片(cell smears )使用 unfixed, acetone fixed 或適當的 fixative for the antigen 。細胞塗抹(cell smears )使用detergent – Triton or NP40 (0.1-0.2% in PBS for 10 min使滲透性。Tween20,皂甙,Digitonin或類似於leucoperm(在PBS中0.2-0.5%,持續10-30分鐘)適用於細胞質或質膜(plasma membrane)抗原。
2.用蒸餾水(distilled或去離子水(deionized water)洗滌2-3次。
3.在室溫下用過Peroxidase Block (clear cap) 切片/細胞塗片反應5-10分鐘。用蒸餾水(distilled water)洗3次。注意事項:antigen retriever (胰蛋白酶AR-6541,Pronase AR-6542,胃蛋白酶AR-6543,檸檬酸鹽緩衝液AR-6544,緩衝液(with EDTA pH 8.5 AR6545,Tris緩衝液pH 10 AR-6546),它可用於這一步。
4.用PBS或Tris saline buffer(含0.02-0.05%非離子洗滌劑,Triton X100,Tween 20或NP-40)洗滌載玻片3次。
5.切片/細胞塗片於Protein blocking solution (blue cap),在室溫下孵育5-10分鐘。
6.Incubate sections/cell smear with primary antibody(未提供,僅提供緩衝液用於稀釋)20-30分鐘。該提供的一抗稀釋緩衝液(primary antibody dilution buffer)也可用作陰性對照。
7.用PBS洗滌載玻片5-7次。在室溫下與One-Step HRP polymer (brown cap)孵育20-30分鐘。
8.用PBS或TBS洗滌載玻片5-7次,建議使用0.025-0.05%非離子型去污劑 without
sodium azide(Triton x-100或Tween-20或NP-40)洗滌。注意事項:過氧化物酶試劑被疊氮化鈉 (sodium azide)破壞,應避免在所有緩衝液和試劑中使用。
9.用去離子水(deionized)或蒸餾水(distilled)洗2-3次。
10.在試管中,加入1 ml Reagent BS和50μl試劑C(DAB chromogen)混合 (即用型DAB試劑限7-8小時內使用完。)
11.在組織載玻片上加入幾滴即用型DAB試劑 (步驟10),在室溫下等待6-10分鐘。 (更高溫度37°C也可用於DAB chromogen,但孵化時間應由個別實驗室確定
12.用PBS洗滌5-7次,然後用離子水(deionized)或蒸餾水(distilled)沖洗。
13.與DAB兼容的複染劑(未提供)孵育30-60秒。We prefer hematoxylin。
14.用蒸餾水(distilled )/去離子水(deionized water)清洗載玻片。
15.用適當的封片劑封片,例如SuperImmunoHistoMountTM(BV Cat.No:1219-30)